| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-46页 |
| 1.1 引言 | 第13-14页 |
| 1.2 神经系统发育 | 第14-19页 |
| 1.2.1 神经系统与神经元 | 第14页 |
| 1.2.2 神经元发育 | 第14-16页 |
| 1.2.2.1 神经元极化 | 第14-16页 |
| 1.2.2.2 轴突生长与导向 | 第16页 |
| 1.2.3 神经营养蛋白 | 第16-17页 |
| 1.2.4 化学趋向性 | 第17-18页 |
| 1.2.5 不同陡度分子梯度的差异性调控 | 第18-19页 |
| 1.3 微流控芯片简介 | 第19-20页 |
| 1.4 微流控芯片与神经细胞生物学研究 | 第20-36页 |
| 1.4.1 神经元培养与共培养 | 第21-24页 |
| 1.4.2 神经系统疾病研究 | 第24-26页 |
| 1.4.3 神经干细胞研究 | 第26-27页 |
| 1.4.4 神经元生长导向研究 | 第27-36页 |
| 1.4.4.1 传统的分子梯度形成方法 | 第27-29页 |
| 1.4.4.2 微流控芯片用于分子梯度形成 | 第29-33页 |
| 1.4.4.3 神经元极化与轴突生长导向研究 | 第33-36页 |
| 1.5 本论文立题背景和研究内容 | 第36-37页 |
| 1.6 参考文献 | 第37-46页 |
| 第2章 微流控芯片形成陡度渐变分子梯度用于轴突响应研究 | 第46-66页 |
| 2.1 引言 | 第46-47页 |
| 2.2 实验部分 | 第47-54页 |
| 2.2.1 仪器装置与试剂 | 第47-48页 |
| 2.2.2 溶液的配制 | 第48-49页 |
| 2.2.3 微流控芯片设计与制作 | 第49-51页 |
| 2.2.4 微流控芯片分子梯度模拟 | 第51-52页 |
| 2.2.5 分子梯度的荧光表征 | 第52-53页 |
| 2.2.6 底物键合Laminin梯度构建及免疫荧光染色 | 第53页 |
| 2.2.7 海马神经元分离及培养 | 第53-54页 |
| 2.2.8 海马神经元活细胞染色 | 第54页 |
| 2.2.9 显微荧光成像及数据分析 | 第54页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第54-63页 |
| 2.3.1 不同陡度分子梯度的形成及调控 | 第54-56页 |
| 2.3.2 分子梯度的荧光表征分析 | 第56-57页 |
| 2.3.3 底物键合Laminin梯度的免疫荧光染色分析 | 第57-59页 |
| 2.3.4 海马神经元对Laminin梯度的响应结果分析 | 第59-63页 |
| 2.4 本章小结 | 第63页 |
| 2.5 参考文献 | 第63-66页 |
| 第3章 微流控芯片形成高分辨陡度梯度用于精确定量轴突响应研究 | 第66-93页 |
| 3.1 引言 | 第66-68页 |
| 3.2 实验部分 | 第68-74页 |
| 3.2.1 仪器装置与试剂 | 第68-69页 |
| 3.2.2 溶液的配制 | 第69页 |
| 3.2.3 微流控芯片设计与制作 | 第69-70页 |
| 3.2.4 分子梯度模拟与荧光表征 | 第70页 |
| 3.2.5 底物键合分子梯度构建及免疫荧光染色表征 | 第70-71页 |
| 3.2.6 底物键合分子梯度吸附密度测量 | 第71-72页 |
| 3.2.7 底物键合分子梯度模拟 | 第72-73页 |
| 3.2.8 神经元培养与染色 | 第73页 |
| 3.2.9 微荧光成像及数据分析 | 第73-74页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第74-88页 |
| 3.3.1 不同陡度分子梯度形成原理与调控 | 第74-76页 |
| 3.3.2 不同尺寸芯片的分子梯度荧光表征 | 第76-78页 |
| 3.3.3 底物键合Laminin梯度免疫荧光染色表征及模拟分析 | 第78-81页 |
| 3.3.4 海马神经元对底物键合Laminin梯度的响应分析 | 第81-85页 |
| 3.3.5 底物键合Ephrin-A5梯度免疫荧光染色表征及模拟分析 | 第85-86页 |
| 3.3.6 海马神经元对底物键合Ephrin-A5梯度的响应结果分析 | 第86-88页 |
| 3.4 本章小结 | 第88-89页 |
| 3.5 参考文献 | 第89-93页 |
| 第4章 多层微流控芯片用于轴突对扩散因子响应研究 | 第93-106页 |
| 4.1 引言 | 第93-94页 |
| 4.2 实验部分 | 第94-98页 |
| 4.2.1 仪器装置与试剂 | 第94-95页 |
| 4.2.2 溶液的配制 | 第95页 |
| 4.2.3 微流控芯片设计与制作 | 第95-96页 |
| 4.2.4 多层微流控芯片构建及分子梯度形成 | 第96-97页 |
| 4.2.5 海马神经元培养与染色 | 第97页 |
| 4.2.6 荧光成像观察及数据分析 | 第97-98页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第98-102页 |
| 4.3.1 多层微流控芯片分子梯度荧光表征分析 | 第98-99页 |
| 4.3.2 海马神经元的胞体-轴突分离培养 | 第99-100页 |
| 4.3.3 灌流模式下的海马神经元培养 | 第100-101页 |
| 4.3.4 海马神经元对netrin-1溶液梯度的实时响应分析 | 第101-102页 |
| 4.4 本章小结 | 第102-103页 |
| 4.5 参考文献 | 第103-106页 |
| 第5章 微流控芯片三维基质材料中IKVAV修饰与NGF梯度构建 | 第106-122页 |
| 5.1 引言 | 第106-107页 |
| 5.2 实验部分 | 第107-115页 |
| 5.2.1 仪器装置与试剂 | 第107-108页 |
| 5.2.2 溶液的配制 | 第108页 |
| 5.2.3 微流控芯片设计与制作 | 第108-109页 |
| 5.2.4 鼠尾Ⅰ型胶原提取与纯化 | 第109页 |
| 5.2.5 胶原溶解与成型 | 第109-110页 |
| 5.2.6 胶原的IKVAV片段修饰 | 第110-113页 |
| 5.2.6.1 胶原酰胺化修饰双键 | 第111-112页 |
| 5.2.6.2 胶原修饰IKVAV的Thiol-Ene反应 | 第112-113页 |
| 5.2.7 芯片内3D分子梯度模拟及荧光表征 | 第113-114页 |
| 5.2.8 海马神经元3D培养与染色 | 第114页 |
| 5.2.9 荧光成像观察及数据分析 | 第114-115页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第115-118页 |
| 5.3.1 胶原材料表征与细胞培养 | 第115页 |
| 5.3.2 胶原材料IKVAV修饰表征 | 第115-116页 |
| 5.3.3 3D片内扩散分子梯度模拟 | 第116-118页 |
| 5.3.4 3D芯片内『散分子梯度黃光表征 | 第118页 |
| 5.4 本章小结与展望 | 第118-119页 |
| 5.5 参考文献 | 第119-122页 |
| 附录：攻读博士学位期间已发表或待发表的科研成果 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
