| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第11页 |
| 1.2 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.2.1 玉米赤霉烯酮的化学结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 玉米赤霉烯酮(ZEN)的毒性研究 | 第12页 |
| 1.2.3 玉米赤霉烯酮的污染情况 | 第12-13页 |
| 1.2.4 玉米赤霉烯酮（ZEN）的检测方法 | 第13-14页 |
| 1.2.5 玉米赤霉烯酮（ZEN）的清除方法 | 第14-15页 |
| 1.2.6 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的结构及性质 | 第15页 |
| 1.2.7 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的毒性研究 | 第15-16页 |
| 1.2.8 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的污染情况 | 第16页 |
| 1.2.9 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的检测方法 | 第16-17页 |
| 1.2.10 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的清除方法 | 第17-18页 |
| 1.2.11 本论文的主要研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 菌种与载体 | 第20页 |
| 2.1.2 酶和主要生物化学试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 常用试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 黑曲霉基因组DNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.2 基因克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.3 根癌农杆菌介导的黑曲霉的遗传转化 | 第24-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-54页 |
| 3.1 黑曲霉表达载体的构建 | 第28-37页 |
| 3.1.1 表达载体p106ZEN的构建 | 第28-29页 |
| 3.1.2 表达载体p106OZEN的构建 | 第29-30页 |
| 3.1.3 表达载体p1062-α-factor-ZEN的构建 | 第30-32页 |
| 3.1.4 表达载体p1062-α-factor-OZEN的构建 | 第32页 |
| 3.1.5 表达载体p106DON的构建 | 第32-33页 |
| 3.1.6 表达载体p106ODON的构建 | 第33-34页 |
| 3.1.7 表达载体p1062-α-factor-DON的构建 | 第34-35页 |
| 3.1.8 表达载体p1062-α-factor-ODON的构建 | 第35-37页 |
| 3.2 农杆菌介导法对黑曲霉的遗传转化 | 第37-41页 |
| 3.2.1 冻融法转化农杆菌 | 第37-40页 |
| 3.2.2 农杆菌介导法转化黑曲霉 | 第40-41页 |
| 3.3 同源重组转化子的鉴定 | 第41-45页 |
| 3.3.1 阳性转化子的鉴定 | 第41-45页 |
| 3.4 同源重组菌株的鉴定 | 第45-49页 |
| 3.5 ZEN和DON降解酶在重组菌株中的表达检测 | 第49-54页 |
| 3.5.1 ZEN和DON降解酶的SDS-PAGE检测 | 第49-50页 |
| 3.5.2 Western Blot检测ZEN降解酶的表达 | 第50-51页 |
| 3.5.3 液相色谱法测定ZEN和DON降解酶的表达 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 4.1 黑曲霉表达系统 | 第54页 |
| 4.2 ZEN降解酶和DON降解酶在黑曲霉中的表达 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 5.1 构建ZEN降解酶和DON降解酶基因表达载体 | 第56页 |
| 5.2 重组菌株中ZEN降解酶和DON降解酶基因的表达 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63页 |
