| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 前言 | 第8-17页 |
| 1.1 神经干细胞 | 第8-11页 |
| 1.1.1 神经干细胞的定义 | 第8页 |
| 1.1.2 神经干细胞的特点 | 第8页 |
| 1.1.3 神经干细胞的分布 | 第8-9页 |
| 1.1.4 神经干细胞在疾病方面的作用 | 第9-11页 |
| 1.1.4.1 神经干细胞在多发性硬化症方面的作用 | 第9-10页 |
| 1.1.4.2 神经干细胞在创伤性脊髓损伤方面的作用 | 第10页 |
| 1.1.4.3 神经干细胞在阿尔兹海默症方面的作用 | 第10-11页 |
| 1.2 基因Nfib的研究简介 | 第11页 |
| 1.3 长链非编码RNA | 第11-16页 |
| 1.3.1 长链非编码RNA的定义 | 第11-12页 |
| 1.3.2 长链非编码RNA的分类 | 第12页 |
| 1.3.3 长链非编码RNA的生物学功能 | 第12-14页 |
| 1.3.3.1 lncRNA在基因表观遗传水平的调控作用 | 第12-13页 |
| 1.3.3.2 lncRNA在基因转录水平的调控作用 | 第13页 |
| 1.3.3.3 lncRNA在基因转录后水平的调控作用 | 第13-14页 |
| 1.3.4 长链非编码RNA与人类疾病 | 第14-16页 |
| 1.3.4.1 lncRNA与神经性疾病 | 第14-15页 |
| 1.3.4.2 lncRNA与癌症 | 第15-16页 |
| 1.4 本论文研究意义 | 第16-17页 |
| 第二章 实验材料 | 第17-20页 |
| 2.1 细胞 | 第17页 |
| 2.2 动物 | 第17页 |
| 2.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.4 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.5 实验抗体信息 | 第19页 |
| 2.6 引物信息 | 第19-20页 |
| 第三章 实验方法 | 第20-35页 |
| 3.1 Lnc158引物设计 | 第20-21页 |
| 3.1.1 Lnc158片段序列信息 | 第20页 |
| 3.1.2 Lnc158引物设计 | 第20-21页 |
| 3.1.2.1 引物序列信息 | 第21页 |
| 3.1.2.2 PCR验证引物设计是否合理 | 第21页 |
| 3.2 原代分离神经前体细胞(Neural progenitor cells,NPC) | 第21-24页 |
| 3.2.1 神经前体细胞原代分离过程 | 第22页 |
| 3.2.2 悬浮培养NPC传代 | 第22-23页 |
| 3.2.3 贴壁培养NPC传代 | 第23页 |
| 3.2.4 NPC细胞冻存 | 第23-24页 |
| 3.2.5 细胞复苏 | 第24页 |
| 3.3 细胞免疫荧光染色 | 第24-25页 |
| 3.3.1 包埋 | 第24-25页 |
| 3.3.2 细胞免疫荧光染色过程 | 第25页 |
| 3.4 病毒感染神经前体细胞 | 第25-29页 |
| 3.4.1 siRNA信息 | 第26页 |
| 3.4.2 合成oligo信息 | 第26-27页 |
| 3.4.3 病毒感染过程 | 第27-29页 |
| 3.5 qPCR检测基因表达差异性 | 第29-30页 |
| 3.5.1 细胞RNA的提取过程 | 第29-30页 |
| 3.5.2 RNA快速逆转合成cDNA | 第30页 |
| 3.6 Western Blot检测蛋白表达量的变化 | 第30-35页 |
| 3.6.1 蛋白质裂解过程 | 第30-31页 |
| 3.6.2 蛋白定量:BCA法 | 第31页 |
| 3.6.3 Western Blot实验步骤 | 第31-35页 |
| 第四章 实验结果 | 第35-58页 |
| 4.1 Lnc158与Nfib的位置关系 | 第35-36页 |
| 4.1.1 Lnc158与Nfib的序列在人和小鼠基因组间的比较 | 第35页 |
| 4.1.2 Lnc158与Nfib单细胞测序结果 | 第35-36页 |
| 4.2 qPCR检测Lnc158、Nfib在小鼠各组织中的表达差异性 | 第36-38页 |
| 4.2.1 Lnc158与Nfib在小鼠脑部各个区域表达差异性检测 | 第36-37页 |
| 4.2.2 Lnc158与Nfib在小鼠其他器官中表达差异性检测 | 第37-38页 |
| 4.3 原代分离NPC体外培养 | 第38-40页 |
| 4.3.1 神经前体细胞正常生长状态 | 第38-39页 |
| 4.3.2 NPC鉴定 | 第39页 |
| 4.3.3 NPC分化鉴定 | 第39-40页 |
| 4.3.3.1 神经元细胞免疫染色结果 | 第39-40页 |
| 4.3.3.2 星形胶质细胞免疫染色结果 | 第40页 |
| 4.3.3.3 少突胶质细胞免疫染色结果 | 第40页 |
| 4.4 神经前体细胞病毒感染结果 | 第40-50页 |
| 4.4.1 预实验摸索感染最适MOI结果 | 第40-44页 |
| 4.4.2 LV-lnc-158-RNAi感染NPC细胞 | 第44-46页 |
| 4.4.2.1 LV-lnc-158-RNAi感染NPC细胞效率 | 第44-45页 |
| 4.4.2.2 病毒感染后qPCR检测Lnc158敲低效率 | 第45-46页 |
| 4.4.3 正式感染病毒实验结果 | 第46-48页 |
| 4.4.3.1 病毒感染NPC荧光效率结果 | 第46-47页 |
| 4.4.3.2 qPCR检测Lnc158对Nfib的调控作用 | 第47-48页 |
| 4.4.4 Western Blot检测Lnc158对Nfib蛋白表达调控作用 | 第48-50页 |
| 4.5 IGF-1诱导NPC向少突胶质细胞分化 | 第50-58页 |
| 4.5.1 NPC分化最佳时间 | 第50-51页 |
| 4.5.2 NPC分化为少突胶质细胞染色结果 | 第51-52页 |
| 4.5.3 qPCR检测少突胶质细胞标志CNP的表达情况 | 第52-53页 |
| 4.5.4 NPC感染病毒后分化为少突胶质细胞结果 | 第53-56页 |
| 4.5.4.1 CNP免疫染色结果 | 第53-55页 |
| 4.5.4.2 NPC感染病毒后分化为少突胶质细胞的分化比 | 第55-56页 |
| 4.5.5 NPC感染病毒后分化为少突胶质细胞相关基因表达量检测 | 第56-58页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第58-60页 |
| 5.1 结论 | 第58页 |
| 5.2 讨论 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
