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CDC42对胰岛β细胞胰岛素分泌的调节作用及其机制

摘要第3-5页
abstract第5-6页
第1章 绪论第10-16页
    1.1 研究背景第10-11页
    1.2 胰岛素的双相分泌第11-12页
    1.3 CDC42与胰岛素分泌第12-13页
    1.4 Ca~(2+)参与胰岛素分泌中的作用机制第13-16页
        1.4.1 胰岛素分泌中相关的Ca2+信号通路第13-14页
        1.4.2 CDC42在Ca~(2+)信号通路中的潜在分子机制第14-16页
第2章 实验方法和材料第16-31页
    2.1 实验方法第16-27页
        2.1.1 小鼠胰岛的分离、纯化第16-17页
        2.1.2 小鼠基因型的鉴定第17-19页
        2.1.3 小鼠胰岛β 细胞瘤MIN6细胞系的培养和传代第19页
        2.1.4 胰岛素含量的测定(ELISA法)第19-20页
        2.1.5 BCA法蛋白定量第20-21页
        2.1.6 免疫印迹Western blot第21-23页
        2.1.7 免疫荧光第23页
        2.1.8 RNA的提取第23页
        2.1.9 RNA反转录(Thermo反转录试剂盒)第23-24页
        2.1.10 荧光定量PCR(SYBR法)第24-25页
        2.1.11 琼脂糖凝胶电泳第25页
        2.1.12 凝胶成像系统分析第25页
        2.1.13 胞浆钙[Ca2+]c的实时监测第25-27页
    2.2 实验材料和方法第27-31页
        2.2.1 实验材料第27-28页
        2.2.2 实验用试剂的配制第28-29页
        2.2.3 实验仪器设备第29-30页
        2.2.4 统计学分析第30-31页
第3章 实验结果第31-43页
    3.1 CDC42在小鼠组织中的分布第31-32页
        3.1.1 CDC42在小鼠组织中的基因相对表达量第31页
        3.1.2 CDC42在小鼠胰腺中不同年龄阶段的基因相对表达量第31-32页
    3.2 构建胰岛β 细胞特异性敲除CDC42小鼠第32-33页
        3.2.1 胰岛β 细胞特异性敲除CDC42小鼠的构建策略第32页
        3.2.2 胰岛β 细胞特异性敲除CDC42小鼠的基因型鉴定第32-33页
        3.2.3 胰岛β 细胞特异性敲除CDC42小鼠的蛋白水平验证第33页
    3.3 CDC42对小鼠胰岛素分泌的影响第33-36页
        3.3.1 特异性敲除CDC42的胰岛β 细胞下调GSIS中胰岛素的分泌第33-34页
        3.3.2 抑制CDC42活性导致MIN6细胞胰岛素分泌减少第34-36页
    3.4 抑制CDC42活性导致MIN6分泌功能障碍第36-38页
    3.5 CDC42影响胰岛β 细胞内钙离子稳态第38-41页
        3.5.1 在GSIS中敲除CDC42下调胰岛细胞[Ca2+]c第38-39页
        3.5.2 抑制CDC42减弱MIN6对刺激后[Ca2+]c响应第39-41页
    3.6 CDC42协同Foxa2调节胰岛 β 细胞的正常功能第41-42页
    3.7 结论第42-43页
第4章 讨论第43-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-50页
综述第50-57页
    参考文献第54-57页

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