| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 部分缩略词表 | 第8-13页 |
| 1 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 1.2 国内外研究动态 | 第14-25页 |
| 1.2.1 纤维素 | 第14-16页 |
| 1.2.2 蔗糖合酶 | 第16-18页 |
| 1.2.3 蔗糖合酶基因研究进展 | 第18-25页 |
| 1.3 主要研究内容与技术路线 | 第25-27页 |
| 1.3.1 主要研究内容 | 第25-26页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第26-27页 |
| 2 慈竹BeSUS6与BeSUS7基因的克隆与BeSUSs基因生物信息学分析 | 第27-48页 |
| 2.1 试验材料、试剂和仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第27页 |
| 2.1.2 试验用主要试剂和菌种 | 第27页 |
| 2.1.3 试验用主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 慈竹叶总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.2 慈竹叶cDNA的合成 | 第28-29页 |
| 2.2.3 慈竹BeSUS6、BeSUS7基因全长克隆 | 第29-32页 |
| 2.2.4 慈竹BeSUS6、BeSUS7基因的生物信息学分析 | 第32-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-46页 |
| 2.3.1 慈竹叶总RNA提取 | 第34页 |
| 2.3.2 慈竹BeSUS6、BeSUS7基因PCR扩增 | 第34-35页 |
| 2.3.3 慈竹BeSUS6、BeSUS7基因挑斑摇菌及菌液质粒PCR | 第35页 |
| 2.3.4 慈竹BeSUS6和BeSUS7基因全长序列 | 第35-37页 |
| 2.3.5 慈竹BeSUSs基因生物信息学分析 | 第37-46页 |
| 2.4 讨论与结论 | 第46-48页 |
| 3 慈竹BeSUSs基因表达模式分析 | 第48-67页 |
| 3.1 试验材料、试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第48页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第48页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第48-49页 |
| 3.2 试验方法 | 第49-54页 |
| 3.2.1 慈竹BeSUSs基因组织表达分析 | 第49-50页 |
| 3.2.2 170cm慈竹笋不同发育部位BeSUSs基因表达分析 | 第50-53页 |
| 3.2.3 慈竹ABA、MEJA、干旱和2,6-DCB胁迫表达分析 | 第53页 |
| 3.2.4 数据处理 | 第53-54页 |
| 3.3 结果与分析 | 第54-64页 |
| 3.3.1 慈竹BeSUSs基因组织表达分析 | 第54-58页 |
| 3.3.2 170cm慈竹笋不同部位BeSUSs基因表达分析 | 第58-60页 |
| 3.3.3 慈竹ABA、MEJA、干旱和2,6-DCB胁迫表达分析 | 第60-64页 |
| 3.4 讨论与结论 | 第64-67页 |
| 4 慈竹BeSUSs基因亚细胞定位 | 第67-75页 |
| 4.1 试验材料、试剂及仪器 | 第67页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第67页 |
| 4.1.2 试验试剂、菌种及载体 | 第67页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第67页 |
| 4.2 试验方法 | 第67-71页 |
| 4.2.1 用于亚细胞定位的BeSUSs基因引物设计 | 第67-68页 |
| 4.2.2 用于亚细胞定位的BeSUSs基因PCR扩增 | 第68页 |
| 4.2.3 BeSUSs基因PCR产物的纯化回收 | 第68页 |
| 4.2.4 BeSUSs基因回收产物与pTEX-GFP载体双酶切与纯化 | 第68-69页 |
| 4.2.5 BeSUSs基因回收产物与pTEX-GFP载体双酶切产物的连接 | 第69页 |
| 4.2.6 pTEX-BeSUSs-GFP连接产物转化大肠杆菌 | 第69-70页 |
| 4.2.7 pTEX-BeSUSs-GFP大肠杆菌摇菌、菌液PCR、双酶切 | 第70页 |
| 4.2.8 pTEX-BeSUSs7-GFP质粒转化GV3101农杆菌 | 第70页 |
| 4.2.9 GV3101(pTEX-BeSUSs-GFP)农杆菌注射本生烟草 | 第70-71页 |
| 4.3 结果与分析 | 第71-73页 |
| 4.3.1 用于亚细胞定位的BeSUSs基因PCR扩增 | 第71-72页 |
| 4.3.2 pTEX-BeSUSs-GFP质粒双酶切 | 第72页 |
| 4.3.3 GV3101农杆菌侵染本氏烟草 | 第72-73页 |
| 4.4 讨论与结论 | 第73-75页 |
| 5 慈竹BeSUSs基因过表达载体构建 | 第75-80页 |
| 5.1 试验材料、试剂及仪器 | 第75-76页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第75页 |
| 5.1.2 试验试剂 | 第75页 |
| 5.1.3 试验仪器 | 第75-76页 |
| 5.2 试验方法 | 第76-77页 |
| 5.2.1 用于过表达载体构建的BeSUSs基因引物设计 | 第76-77页 |
| 5.2.2 用于过表达载体构建的BeSUSs基因PCR扩增 | 第77页 |
| 5.2.3 BeSUSs基因过表达PCR产物的回收 | 第77页 |
| 5.2.4 BeSUSs PCR产物和pCAMBIA 1303-N质粒双酶切与回收 | 第77页 |
| 5.2.5 过表达载体pCAMBIA1303N- BeSUSs的连接与转化 | 第77页 |
| 5.2.6 过表达载体pCAMBIA1303N- BeSUSs阳性鉴定 | 第77页 |
| 5.3 结果与分析 | 第77-80页 |
| 5.3.1 用于过表达载体构建的BeSUSs基因PCR扩增 | 第77-78页 |
| 5.3.2 pCAMBIA1303N- BeSUSs双酶切 | 第78-80页 |
| 6 慈竹BeSUSs基因遗传转化毛白杨 | 第80-87页 |
| 6.1 试验材料及仪器 | 第80页 |
| 6.1.1 试验用菌种和质粒 | 第80页 |
| 6.1.2 试验试剂 | 第80页 |
| 6.1.3 试验仪器 | 第80页 |
| 6.2 试验方法 | 第80-82页 |
| 6.2.1 pCAMBIA 1303N- BeSUSs质粒转化农AGL1杆菌 | 第80页 |
| 6.2.2 叶盘法转化毛白杨 | 第80-81页 |
| 6.2.3 转基因毛白杨的鉴定 | 第81-82页 |
| 6.3 结果与分析 | 第82-86页 |
| 6.3.1 叶盘法转化毛白杨与转基因植株的获得 | 第82-84页 |
| 6.3.2 转基因毛白杨的半定量分析 | 第84页 |
| 6.3.3 BeSUS2转基因毛白杨苗期分析 | 第84-86页 |
| 6.4 讨论与结论 | 第86-87页 |
| 7 结论 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-101页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第101页 |
