摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1. 前言 | 第8-14页 |
1.1 蜻蜓凤梨 | 第8页 |
1.2 植物开花 | 第8-9页 |
1.3 DELLAs蛋白研究进展 | 第9-11页 |
1.4 DELLAs蛋白在调控植物开花中的作用 | 第11-12页 |
1.5 研究的目的及意义 | 第12-13页 |
1.6 研究的技术路线 | 第13-14页 |
2 材料与方法 | 第14-28页 |
2.1 材料 | 第14页 |
2.1.1 植物材料与菌种 | 第14页 |
2.1.2 药品与试剂 | 第14页 |
2.2 方法 | 第14-28页 |
2.2.1 目的基因AfGAI基因的克隆 | 第14-19页 |
2.2.2 AfGAI生物信息学分析 | 第19-20页 |
2.2.3 蜻蜓凤梨AfGAI的表达特性分析 | 第20-21页 |
2.2.4 乙烯处理蜻蜓凤梨后AfGAI蛋白含量变化 | 第21-23页 |
2.2.5 构建CaMV35S-AfGAI过表达载体 | 第23-26页 |
2.2.6 拟南芥遗传转化 | 第26-28页 |
3 结果与分析 | 第28-40页 |
3.1 AfGAI基因的克隆 | 第28-29页 |
3.1.1 蜻蜓凤梨总RNA的提取 | 第28页 |
3.1.2 RACE技术获取GAI同源基因全长 | 第28-29页 |
3.2 GAI同源基因的生物信息学分析 | 第29-33页 |
3.2.1 CDS序列和理化性质分析 | 第29-31页 |
3.2.2 同源性比对、结构域、系统进化树的分析 | 第31-33页 |
3.3 荧光定量分析乙烯处理蜻蜓凤梨后AfGAI基因的表达特性 | 第33-35页 |
3.3.1 蜻蜓凤梨AfGAI荧光定量引物溶解曲线及标准曲线 | 第33-34页 |
3.3.2 蜻蜓凤梨成株及幼株中AfGAI对乙烯的响应 | 第34-35页 |
3.4 Western Blot分析乙烯处理蜻蜓凤梨后AfGAI蛋白含量的变化 | 第35-36页 |
3.5 AfGAI基因功能分析 | 第36-40页 |
3.5.1 CaMV35S-AfGAI过表达载体的构建 | 第36-37页 |
3.5.2 转AfGAI基因拟南芥植株鉴定 | 第37-38页 |
3.5.3 35S::AfGAI表型分析 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
4.1 AfGAI基因的全长及生物信息学分析 | 第40-41页 |
4.2 蜻蜓凤梨AfGAI基因的表达特性 | 第41页 |
4.3 乙烯对蜻蜓凤梨AfGAI蛋白含量的影响 | 第41-42页 |
4.4 蜻蜓凤梨AfGAI功能鉴定 | 第42-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
6 下一步工作计划 | 第44-45页 |
7 参考文献 | 第45-48页 |
8 中英文缩略语 | 第48-49页 |
9 附录 | 第49-54页 |
附录1:引物序列 | 第49-50页 |
附录2:实验中常用的培养基及药瓶配方 | 第50-51页 |
附录3: 实验中所用到的实验设备 | 第51-52页 |
附录4:乙烯处理0h、1h、6h、24h蜻蜓凤梨幼株和成株心叶中AfGAI的相对表达量原始数据 | 第52-53页 |
附录5:资助项目 | 第53-54页 |
10 致谢 | 第54页 |