中文摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
缩略简表 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-30页 |
1 前言 | 第16-17页 |
2 昆虫信息素研究进展 | 第17-26页 |
2.1 鳞翅目昆虫信息素的研究进展 | 第17-23页 |
2.2 鞘翅目昆虫信息素的研究进展 | 第23-24页 |
2.3 双翅目昆虫信息素的研究进展 | 第24-25页 |
2.4 半翅目昆虫信息素的研究进展 | 第25-26页 |
3 中黑盲蝽及其信息素研究进展 | 第26-27页 |
4. 研究目的及意义 | 第27-28页 |
5 研究内容与技术路线 | 第28-30页 |
5.1 研究内容 | 第28-29页 |
5.2 技术路线 | 第29-30页 |
第二章 中黑盲蝽后胸臭腺转录组Unigene数据库构建 | 第30-45页 |
1 前言 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-34页 |
2.1 供试昆虫 | 第31页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第31-32页 |
2.3 中黑盲蝽后胸臭腺形态结构观察 | 第32页 |
2.4 样品收集 | 第32页 |
2.5 Illumina测序 | 第32-33页 |
2.6 序列组装 | 第33页 |
2.7 Unigene功能注释和分类 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-43页 |
3.1 中黑盲蝽后胸臭腺形态结构 | 第34-35页 |
3.2 Illumina测序和de novo组装 | 第35-37页 |
3.3 蛋白注释 | 第37页 |
3.4 同源性比较分析 | 第37-38页 |
3.5 Pfam蛋白结构域分析 | 第38-39页 |
3.6 基因聚类分析 | 第39-41页 |
3.7 信息素合成相关基因 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
第三章 中黑盲蝽实时定量PCR内参基因的筛选 | 第45-61页 |
1 前言 | 第45-46页 |
2 材料与方法 | 第46-51页 |
2.1 供试昆虫 | 第46页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第46-47页 |
2.3 样品收集 | 第47页 |
2.4 候选内参基因选择和引物设计 | 第47页 |
2.5 总RNA提取和cDNA合成 | 第47-48页 |
2.6 实时荧光定量PCR分析 | 第48页 |
2.7 候选内参基因表达稳定性分析 | 第48-51页 |
3 结果与分析 | 第51-59页 |
3.1 候选内参基因序列的获得 | 第51页 |
3.2. 候选内参基因RT-qPCR引物性能评估 | 第51-52页 |
3.3 候选内参基因的表达水平分析 | 第52-54页 |
3.4 候选内参基因的稳定性分析 | 第54-59页 |
4 讨论 | 第59-61页 |
第四章 RNA-Seq和RNAi筛选中黑盲蝽信息素合成相关基因 | 第61-79页 |
1 前言 | 第61-62页 |
2 材料与方法 | 第62-70页 |
2.1 供试昆虫 | 第62页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第62-63页 |
2.3 样品的收集 | 第63页 |
2.4 RNA-Seq文库制备和Illumina测序 | 第63-64页 |
2.5 差异表达基因的功能聚类分析 | 第64页 |
2.6 实时荧光定量PCR分析 | 第64-65页 |
2.7 dsRNA合成 | 第65-67页 |
2.8 RNA干扰 | 第67-70页 |
3 结果与分析 | 第70-77页 |
3.1 RNA-Seq文库数据分析 | 第70-72页 |
3.2 中黑盲蝽后胸臭腺在不同发育阶段以及性别的差异表达基因分析 | 第72-73页 |
3.3 差异表达基因的聚类分析 | 第73-74页 |
3.4 RT-qPCR验证信息素合成相关候选基因的表达差异 | 第74页 |
3.5 RNAi初步筛选中黑盲蝽信息素合成相关基因 | 第74-77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
第五章 基于RNAi的DesB基因功能验证 | 第79-94页 |
1 前言 | 第79-80页 |
2 材料与方法 | 第80-84页 |
2.1 供试昆虫 | 第80页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第80-81页 |
2.3 序列克隆和分析 | 第81页 |
2.4 Southern blot | 第81页 |
2.5 DesB空间表达模式分析 | 第81-83页 |
2.6 RNA干扰 | 第83页 |
2.7 Y型嗅觉仪室内生测实验 | 第83-84页 |
2.8 田间诱捕实验 | 第84页 |
2.9 信息素的萃取和GC-MS分析 | 第84页 |
3 结果与分析 | 第84-92页 |
3.1 序列克隆和分析 | 第84-85页 |
3.2 空间转录模式分析 | 第85-88页 |
3.3 沉默DesB显著抑制了雌虫对雄虫的引诱能力 | 第88-90页 |
3.4 沉默DesB改变了中黑盲蝽信息素的滴度 | 第90-92页 |
4 讨论 | 第92-94页 |
第六章 中黑盲蝽的卵巢发育及繁殖能力的必须基因——FAR | 第94-106页 |
1 前言 | 第94页 |
2 材料与方法 | 第94-98页 |
3 结果与分析 | 第98-104页 |
4 讨论 | 第104-106页 |
第七章 总结与展望 | 第106-109页 |
1 总结 | 第106-107页 |
2 创新点 | 第107-108页 |
3 展望 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-125页 |
附录Ⅰ | 第125-132页 |
附录Ⅱ | 第132-135页 |
附录Ⅲ | 第135-137页 |
致谢 | 第137-139页 |