中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
前言 | 第12-15页 |
第一章 Lumican在胃腺癌组织样本中的表达 | 第15-35页 |
1 材料 | 第16-21页 |
1.1 组织标本 | 第16-18页 |
1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
1.3 抗体 | 第19页 |
1.4 常用试剂及配方 | 第19-20页 |
1.5 设备仪器 | 第20-21页 |
2 方法 | 第21-26页 |
2.1 新鲜冻存胃腺癌组织总RNA抽提 | 第21-22页 |
2.2 总RNA逆转录 | 第22页 |
2.3 实时定量PCR检测 | 第22-24页 |
2.4 胃腺癌组织芯片构建及免疫组织化学染色 | 第24-25页 |
2.5 新鲜胃腺癌组织蛋白提取及免疫印迹分析 | 第25-26页 |
3 实验结果 | 第26-33页 |
3.1 Lumican mRNA在胃腺癌组织中的表达分析 | 第26-27页 |
3.2 免疫组化分析Lumican在胃腺癌组织中的表达变化 | 第27-32页 |
3.3 免疫印迹检测Lumican在胃腺癌组织中的表达变化 | 第32-33页 |
4 小结 | 第33-35页 |
第二章 Lumican对胃腺癌细胞功能的影响及分子机制 | 第35-88页 |
1 材料 | 第36-40页 |
1.1 细胞、菌株、质粒 | 第36-37页 |
1.2 主要试剂 | 第37页 |
1.3 抗体 | 第37-38页 |
1.4 设备仪器 | 第38-39页 |
1.5 常用试剂、培养基的配制 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-64页 |
2.1 Lumican在胃腺癌细胞中的表达 | 第40-43页 |
2.2 Lumican过表达载体的构建 | 第43-52页 |
2.3 Lumican干扰载体的构建 | 第52-59页 |
2.4 Lumican对胃腺癌细胞生物学功能的影响 | 第59-63页 |
2.5 Lumican过表达及干扰胃腺癌细胞在裸鼠体内成瘤实验 | 第63页 |
2.6 Lumican对胃腺癌细胞内TGF-β信号通路的影响 | 第63-64页 |
3 实验结果 | 第64-87页 |
3.1 Lumican在胃腺癌细胞系中的表达分析 | 第64-65页 |
3.2 Lumican过表达及干扰慢病毒载体的构建 | 第65-67页 |
3.3 Lumican过表达植株及干扰植株的建立 | 第67-69页 |
3.4 Lumican过表达及干扰单克隆植株的筛选和建立 | 第69-71页 |
3.5 Lumican过表达对胃腺癌细胞生物学功能的影响 | 第71-77页 |
3.6 Lumican干扰对胃腺癌细胞生物学功能的影响 | 第77-79页 |
3.7 Lumican对胃腺癌细胞失巢凋亡的影响 | 第79-81页 |
3.8 Lumican对胃腺癌细胞骨架的影响 | 第81页 |
3.9 Lumican对胃腺癌细胞在裸鼠体内成瘤能力的影响 | 第81-82页 |
3.10 Lumican对胃腺癌细胞内TGF-β信号通路的影响 | 第82-87页 |
4 小结 | 第87-88页 |
第三章 Lumican重组蛋白对胃腺癌细胞生物学影响 | 第88-113页 |
1 材料 | 第89-90页 |
1.1 细胞、菌株、质粒 | 第89页 |
1.2 主要试剂 | 第89-90页 |
1.3 抗体 | 第90页 |
1.4 设备仪器 | 第90页 |
1.5 常用试剂、培养基的配制 | 第90页 |
2 方法 | 第90-103页 |
2.1 Lumican真核表达重组蛋白载体V152-HLum构建 | 第90-97页 |
2.2 Lumican原核表达重组蛋白载体pQE30-HLum的构建 | 第97-101页 |
2.3 Lumican重组蛋白对胃腺癌细胞生物学功能的影响 | 第101-103页 |
3 实验结果 | 第103-111页 |
3.1 Lumican原核系统蛋白表达载体及真核系统蛋白表达的构建 | 第103-105页 |
3.2 V152-HLumican及pQE30-HLumican重组蛋白结果验证 | 第105-106页 |
3.3 Lumican重组蛋白对胃腺癌细胞生物学功能的影响 | 第106-111页 |
4 小结 | 第111-113页 |
讨论 | 第113-117页 |
结论 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-122页 |
综述 | 第122-136页 |
参考文献 | 第130-136页 |
英文縮略词表 | 第136-138页 |
发表论文 | 第138-139页 |
致谢 | 第139-140页 |