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脂氧合酶及其相关基因与柿和苹果果实成熟衰老关系研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 综述第13-26页
    1.1 脂氧合酶的基本特性第13-16页
        1.1.1 植物脂氧合酶的结构与分布第13-14页
        1.1.2 植物脂氧合酶的代谢途径第14-15页
        1.1.3 植物脂氧合酶基因家族成员的分类第15-16页
    1.2 脂氧合酶参与茉莉酸的生物合成第16-17页
    1.3 脂氧合酶与脱落酸的合成第17-18页
    1.4 脂氧合酶与果实成熟衰老的关系第18-20页
        1.4.1 脂氧合酶与乙烯第18页
        1.4.2 脂氧合酶与果实的软化第18-19页
        1.4.3 脂氧合酶与果实香气物质的形成第19-20页
    1.5 脂氧合酶与植物的逆境胁迫第20-21页
        1.5.1 脂氧合酶参与植物的低温应答第20页
        1.5.2 脂氧合酶参与植物的盐胁迫第20页
        1.5.3 脂氧合酶参与植物抵抗病虫害的防御反应第20-21页
    1.6 脂氧合酶各基因家族成员功能的多样性及研究进展第21-24页
        1.6.1 脂氧合酶基因家族成员在植物生长发育和果实成熟衰老进程中的不同功能第21-23页
        1.6.2 脂氧合酶基因家族成员在植物抗逆反应过程中的不同功能第23-24页
    1.7 目前需要研究明确的问题第24页
    1.8 研究的目的意义以及技术路线第24-26页
        1.8.1 研究的目的意义第24-25页
        1.8.2 研究的技术路线第25-26页
第二章 柿果实脂氧合酶基因的克隆以及原核表达第26-47页
    2.1 试验材料与方法第26-33页
        2.1.1 试验材料第26页
        2.1.2 柿果实总 RNA 的提取及检测第26-27页
        2.1.3 cDNA 第一链的合成第27-28页
        2.1.4 脂氧合酶保守序列的扩增第28页
        2.1.5 PCR 扩增产物的检验及回收纯化第28页
        2.1.6 序列测定第28-29页
        2.1.7 脂氧合酶全长序列的扩增第29-30页
        2.1.8 原核表达载体的构建第30-33页
        2.1.9 融合蛋白的诱导表达第33页
        2.1.10 序列分析第33页
    2.2 结果与分析第33-46页
        2.2.1 脂氧合酶基因 cDNA 全长的扩增第33-34页
        2.2.2 序列分析第34-45页
        2.2.3 原核表达载体的构建及 IPTG 诱导表达第45-46页
    2.3 讨论第46页
    2.4 小结第46-47页
第三章 GA_3和 ABA 处理对柿果实采后生理及成熟软化过程中 LOX 基因表达的影响第47-56页
    3.1 试验材料与方法第47-50页
        3.1.1 试验材料与处理方法第47页
        3.1.2 果实硬度和乙烯释放量的测定第47-48页
        3.1.3 丙二醛含量的测定第48页
        3.1.4 脂氧合酶活性的测定第48页
        3.1.5 柿果实总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成第48页
        3.1.6 实时荧光定量 PCR 的检测第48-49页
        3.1.7 数据处理第49-50页
    3.2 结果与分析第50-53页
        3.2.1 不同处理对采后柿果实硬度的影响第50页
        3.2.2 不同处理对采后柿果实丙二醛含量的影响第50-51页
        3.2.3 不同处理对采后柿果实脂氧合酶活性的影响第51-52页
        3.2.4 不同处理对采后柿果实乙烯释放量的影响第52页
        3.2.5 不同处理对采后柿果实 DkLOX1 和 DkLOX3 相对表达量的影响第52-53页
    3.3 讨论第53-55页
    3.4 小结第55-56页
第四章 脂氧合酶及其参与的茉莉酸合成途径与苹果果实成熟关系研究第56-73页
    4.1 试验材料与方法第56-60页
        4.1.1 试验材料第56页
        4.1.2 生理指标的测定第56-57页
        4.1.3 苹果 RNA 的提取及检测第57-58页
        4.1.4 DNase I 处理及 RNA 的纯化第58页
        4.1.5 基因的初步筛选及特异引物的设计第58-59页
        4.1.6 苹果果实上表达的基因成员的筛选第59页
        4.1.7 实时荧光定量 PCR 的检测第59-60页
        4.1.8 数据处理及基因序列的分析第60页
    4.2 结果与分析第60-70页
        4.2.1 生理指标的分析第60页
        4.2.2 LOX 及其他 JA 合成途径相关基因成员的筛选和序列分析第60-63页
        4.2.3 苹果果肉(含果皮)LOX 基因的表达情况第63-64页
        4.2.4 苹果果肉(含果皮)与 JA 合成途径相关的其他基因成员的表达情况第64-66页
        4.2.5 苹果果肉(含果皮)ACS 基因和 ERF 基因的表达情况第66-68页
        4.2.6 苹果果心 LOX 基因和 AOS 基因的表达情况第68-70页
    4.3 讨论第70-72页
    4.4 小结第72-73页
第五章 采前苹果果实 LOX 基因和 AOS 基因对外源茉莉酸甲酯(MeJA)处理的应答第73-82页
    5.1 试验材料与方法第73-74页
        5.1.1 试验材料第73页
        5.1.2 生理指标的测定第73页
        5.1.3 RNA 的提取和纯化第73页
        5.1.4 实时荧光定量 PCR 的检测第73页
        5.1.5 数据处理第73-74页
    5.2 结果与分析第74-80页
        5.2.1 外源 MeJA 处理对苹果果实相关生理的影响第74-75页
        5.2.2 外源 MeJA 处理对 LOX 基因和 AOS 基因表达的影响第75-80页
    5.3 讨论第80-81页
    5.4 小结第81-82页
第六章 结论与创新点第82-84页
    6.1 结论第82-83页
    6.2 本研究的创新点第83-84页
参考文献第84-97页
附录第97-98页
缩略词第98-99页
致谢第99-100页
作者简介第100页

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