摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 综述 | 第13-26页 |
1.1 脂氧合酶的基本特性 | 第13-16页 |
1.1.1 植物脂氧合酶的结构与分布 | 第13-14页 |
1.1.2 植物脂氧合酶的代谢途径 | 第14-15页 |
1.1.3 植物脂氧合酶基因家族成员的分类 | 第15-16页 |
1.2 脂氧合酶参与茉莉酸的生物合成 | 第16-17页 |
1.3 脂氧合酶与脱落酸的合成 | 第17-18页 |
1.4 脂氧合酶与果实成熟衰老的关系 | 第18-20页 |
1.4.1 脂氧合酶与乙烯 | 第18页 |
1.4.2 脂氧合酶与果实的软化 | 第18-19页 |
1.4.3 脂氧合酶与果实香气物质的形成 | 第19-20页 |
1.5 脂氧合酶与植物的逆境胁迫 | 第20-21页 |
1.5.1 脂氧合酶参与植物的低温应答 | 第20页 |
1.5.2 脂氧合酶参与植物的盐胁迫 | 第20页 |
1.5.3 脂氧合酶参与植物抵抗病虫害的防御反应 | 第20-21页 |
1.6 脂氧合酶各基因家族成员功能的多样性及研究进展 | 第21-24页 |
1.6.1 脂氧合酶基因家族成员在植物生长发育和果实成熟衰老进程中的不同功能 | 第21-23页 |
1.6.2 脂氧合酶基因家族成员在植物抗逆反应过程中的不同功能 | 第23-24页 |
1.7 目前需要研究明确的问题 | 第24页 |
1.8 研究的目的意义以及技术路线 | 第24-26页 |
1.8.1 研究的目的意义 | 第24-25页 |
1.8.2 研究的技术路线 | 第25-26页 |
第二章 柿果实脂氧合酶基因的克隆以及原核表达 | 第26-47页 |
2.1 试验材料与方法 | 第26-33页 |
2.1.1 试验材料 | 第26页 |
2.1.2 柿果实总 RNA 的提取及检测 | 第26-27页 |
2.1.3 cDNA 第一链的合成 | 第27-28页 |
2.1.4 脂氧合酶保守序列的扩增 | 第28页 |
2.1.5 PCR 扩增产物的检验及回收纯化 | 第28页 |
2.1.6 序列测定 | 第28-29页 |
2.1.7 脂氧合酶全长序列的扩增 | 第29-30页 |
2.1.8 原核表达载体的构建 | 第30-33页 |
2.1.9 融合蛋白的诱导表达 | 第33页 |
2.1.10 序列分析 | 第33页 |
2.2 结果与分析 | 第33-46页 |
2.2.1 脂氧合酶基因 cDNA 全长的扩增 | 第33-34页 |
2.2.2 序列分析 | 第34-45页 |
2.2.3 原核表达载体的构建及 IPTG 诱导表达 | 第45-46页 |
2.3 讨论 | 第46页 |
2.4 小结 | 第46-47页 |
第三章 GA_3和 ABA 处理对柿果实采后生理及成熟软化过程中 LOX 基因表达的影响 | 第47-56页 |
3.1 试验材料与方法 | 第47-50页 |
3.1.1 试验材料与处理方法 | 第47页 |
3.1.2 果实硬度和乙烯释放量的测定 | 第47-48页 |
3.1.3 丙二醛含量的测定 | 第48页 |
3.1.4 脂氧合酶活性的测定 | 第48页 |
3.1.5 柿果实总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第48页 |
3.1.6 实时荧光定量 PCR 的检测 | 第48-49页 |
3.1.7 数据处理 | 第49-50页 |
3.2 结果与分析 | 第50-53页 |
3.2.1 不同处理对采后柿果实硬度的影响 | 第50页 |
3.2.2 不同处理对采后柿果实丙二醛含量的影响 | 第50-51页 |
3.2.3 不同处理对采后柿果实脂氧合酶活性的影响 | 第51-52页 |
3.2.4 不同处理对采后柿果实乙烯释放量的影响 | 第52页 |
3.2.5 不同处理对采后柿果实 DkLOX1 和 DkLOX3 相对表达量的影响 | 第52-53页 |
3.3 讨论 | 第53-55页 |
3.4 小结 | 第55-56页 |
第四章 脂氧合酶及其参与的茉莉酸合成途径与苹果果实成熟关系研究 | 第56-73页 |
4.1 试验材料与方法 | 第56-60页 |
4.1.1 试验材料 | 第56页 |
4.1.2 生理指标的测定 | 第56-57页 |
4.1.3 苹果 RNA 的提取及检测 | 第57-58页 |
4.1.4 DNase I 处理及 RNA 的纯化 | 第58页 |
4.1.5 基因的初步筛选及特异引物的设计 | 第58-59页 |
4.1.6 苹果果实上表达的基因成员的筛选 | 第59页 |
4.1.7 实时荧光定量 PCR 的检测 | 第59-60页 |
4.1.8 数据处理及基因序列的分析 | 第60页 |
4.2 结果与分析 | 第60-70页 |
4.2.1 生理指标的分析 | 第60页 |
4.2.2 LOX 及其他 JA 合成途径相关基因成员的筛选和序列分析 | 第60-63页 |
4.2.3 苹果果肉(含果皮)LOX 基因的表达情况 | 第63-64页 |
4.2.4 苹果果肉(含果皮)与 JA 合成途径相关的其他基因成员的表达情况 | 第64-66页 |
4.2.5 苹果果肉(含果皮)ACS 基因和 ERF 基因的表达情况 | 第66-68页 |
4.2.6 苹果果心 LOX 基因和 AOS 基因的表达情况 | 第68-70页 |
4.3 讨论 | 第70-72页 |
4.4 小结 | 第72-73页 |
第五章 采前苹果果实 LOX 基因和 AOS 基因对外源茉莉酸甲酯(MeJA)处理的应答 | 第73-82页 |
5.1 试验材料与方法 | 第73-74页 |
5.1.1 试验材料 | 第73页 |
5.1.2 生理指标的测定 | 第73页 |
5.1.3 RNA 的提取和纯化 | 第73页 |
5.1.4 实时荧光定量 PCR 的检测 | 第73页 |
5.1.5 数据处理 | 第73-74页 |
5.2 结果与分析 | 第74-80页 |
5.2.1 外源 MeJA 处理对苹果果实相关生理的影响 | 第74-75页 |
5.2.2 外源 MeJA 处理对 LOX 基因和 AOS 基因表达的影响 | 第75-80页 |
5.3 讨论 | 第80-81页 |
5.4 小结 | 第81-82页 |
第六章 结论与创新点 | 第82-84页 |
6.1 结论 | 第82-83页 |
6.2 本研究的创新点 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-97页 |
附录 | 第97-98页 |
缩略词 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
作者简介 | 第100页 |