摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第11-21页 |
1.1 姜黄的主要化学成分及其药理作用 | 第11-14页 |
1.1.1 化学成分 | 第11页 |
1.1.2 药理作用 | 第11-14页 |
1.1.2.1 抗炎作用 | 第11-12页 |
1.1.2.2 抗肿瘤活性 | 第12页 |
1.1.2.3 抗氧化活性 | 第12-13页 |
1.1.2.4 对心血管系统的作用 | 第13页 |
1.1.2.5 抗肝、肾损伤和纤维化作用 | 第13页 |
1.1.2.6 代谢疾病中的作用 | 第13-14页 |
1.2 姜黄素生物合成途径研究进展 | 第14-16页 |
1.3 姜黄素生物合成途径中一些酶基因研究进展 | 第16-19页 |
1.3.1 苯丙氨酸解氨酶(PAL) | 第16页 |
1.3.2 4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL) | 第16-17页 |
1.3.3 肉桂酸4羟化酶(C4H) | 第17-18页 |
1.3.3.1 C4H基因组织表达特异性研究 | 第17页 |
1.3.3.2 基因胁迫条件下的表达模式研究 | 第17-18页 |
1.3.4 氧甲基转移酶(咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶CCOMT和咖啡酸氧甲基转移酶COMT) | 第18页 |
1.3.5 二酮辅酶A合成酶(DCS) | 第18页 |
1.3.6 姜黄素合成酶(Curcumin synthase, CURS) | 第18-19页 |
1.4 本实验的研究目的和技术路线 | 第19-21页 |
第2章 姜黄DCS基因的克隆与功能分析 | 第21-44页 |
2.1 实验材料与设计 | 第21-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 实验设计 | 第21-22页 |
2.1.3 实验药品和仪器 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.2 姜黄RNA的纯化 | 第24页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第24页 |
2.2.4 DCS基因保守区片段的扩增和检测 | 第24-26页 |
2.2.5 DCS基因CDS片段回收 | 第26页 |
2.2.6 DCS基因CDS片段重组入质粒载体 | 第26页 |
2.2.7 阳性克隆的筛选 | 第26-27页 |
2.2.8 基因序列测定及结果分析 | 第27页 |
2.2.9 DCS基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
2.2.10 DCS基因不同组织部位表达模式分析 | 第28-29页 |
2.2.11 DCS基因在NaCl胁迫、SNP作用下表达模式分析 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-43页 |
2.3.1 DCS基因的CDS区的获得 | 第29-31页 |
2.3.2 姜黄DCS基因CDS区的生物信息学分析 | 第31-36页 |
2.3.2.1 DCS蛋白的结构特征 | 第31页 |
2.3.2.2 DCS蛋白的理化性质 | 第31-34页 |
2.3.2.3 DCS蛋白的结构预测 | 第34-36页 |
2.3.3 DCS基因表达模式分析 | 第36-43页 |
2.3.3.1 姜黄DCS基因不同组织部位表达模式 | 第36-39页 |
2.3.3.2 NaCl胁迫下DCS基因表达模式分析 | 第39-41页 |
2.3.3.3 SNP作用下DCS基因表达模式分析 | 第41-43页 |
2.4 讨论 | 第43-44页 |
第3章 姜黄C4H基因的克隆与功能分析 | 第44-64页 |
3.1 实验材料与设计 | 第44-45页 |
3.1.1 植物材料 | 第44页 |
3.1.2 实验设计 | 第44页 |
3.1.3 实验药品和仪器 | 第44-45页 |
3.2 方法 | 第45-51页 |
3.2.1 RNA的提取 | 第45页 |
3.2.2 姜黄RNA的纯化 | 第45页 |
3.2.3 cDNA第一链的合成 | 第45页 |
3.2.4 C4H基因保守区片序列的获得 | 第45-46页 |
3.2.5 C4H基因 3’端获得 | 第46-48页 |
3.2.6 C4H基因 5’端获得 | 第48-50页 |
3.2.7 C4H基因不同组织部位表达模式分析 | 第50页 |
3.2.8 C4H基因在NaCl胁迫、SNP作用下的表达模式分析 | 第50-51页 |
3.3 结果与分析 | 第51-62页 |
3.3.1 姜黄C4H保守区片段的克隆 | 第51-53页 |
3.3.1.2 姜黄C4H基因 3’端的克隆 | 第51-52页 |
3.3.1.3 姜黄C4H基因 5’端的克隆 | 第52-53页 |
3.3.2 姜黄C4H基因的生物信息学分析 | 第53-59页 |
3.3.2.1 C4H蛋白的结构特征 | 第53-54页 |
3.3.2.2 C4H蛋白的理化性质 | 第54-56页 |
3.3.2.3 C4H蛋白质结构的预测 | 第56-57页 |
3.3.2.4 C4H蛋白进化树分析 | 第57-59页 |
3.3.3 姜黄C4H基因表达模式分析 | 第59-62页 |
3.3.3.1 不同组织部位C4H基因表达模式 | 第59-60页 |
3.3.3.2 姜黄C4H基因在NaCl胁迫下的表达模式分析 | 第60-61页 |
3.3.3.3 姜黄C4H基因在SNP作用下的表达模式分析 | 第61-62页 |
3.4 讨论 | 第62-64页 |
3.4.1 姜黄C4H基因的克隆与生物信息学分析 | 第62页 |
3.4.2 姜黄C4H基因表达模式分析 | 第62-64页 |
第4章 姜黄CURS基因的遗传转化 | 第64-69页 |
4.1 实验材料 | 第64-65页 |
4.1.1 植物材料 | 第64页 |
4.1.2 实验药品和仪器 | 第64-65页 |
4.2 实验方法 | 第65-67页 |
4.2.1 农杆菌的活化 | 第65页 |
4.2.2 农杆菌介导CURS转化烟草 | 第65-66页 |
4.2.3 转基因烟草的RT-PCR检测 | 第66-67页 |
4.2.3.1 烟草组培苗总RNA的提取 | 第66页 |
4.2.3.2 总RNA的纯化 | 第66页 |
4.2.3.3 烟草cDNA第一条链的合成 | 第66页 |
4.2.3.4 PCR扩增 | 第66-67页 |
4.3 结果与分析 | 第67-68页 |
4.3.1 转CURS基因烟草抗性植株 | 第67-68页 |
4.3.2 转CURS基因烟草抗性植株RT-PCR分析 | 第68页 |
4.4 讨论 | 第68-69页 |
第5章 结论与展望 | 第69-72页 |
5.1 主要的研究结论 | 第69-70页 |
5.2 展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
个人简历、在校期间发表的学术论文和研究成果 | 第77页 |