| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-48页 |
| 1.1 干扰素的发现及命名 | 第10页 |
| 1.2 干扰素的分类 | 第10-13页 |
| 1.2.1 Ⅰ型干扰素 | 第10-12页 |
| 1.2.2 Ⅱ型干扰素 | 第12-13页 |
| 1.2.3 Ⅲ型干扰素 | 第13页 |
| 1.3 干扰素的空间结构 | 第13-16页 |
| 1.4 干扰素的受体 | 第16-18页 |
| 1.5 干扰素的产生途径 | 第18-24页 |
| 1.5.1 TLR受体介导的干扰素产生途径 | 第19-22页 |
| 1.5.2 RLR介导的干扰素产生途径 | 第22-24页 |
| 1.6 干扰素的下游信号通路 | 第24-26页 |
| 1.7 干扰素诱导基因 | 第26-31页 |
| 1.7.1 ISG15 | 第26-28页 |
| 1.7.2 蛋白激酶PKR | 第28-29页 |
| 1.7.3 寡腺苷酸合成酶OAS | 第29-30页 |
| 1.7.4 Mx GTPase | 第30-31页 |
| 1.8 干扰素的表达调控 | 第31-32页 |
| 1.9 犬干扰素研究进展 | 第32-33页 |
| 1.10 流感病毒的研究进展 | 第33-38页 |
| 1.10.1 流感病毒的结构组成 | 第34-35页 |
| 1.10.2 流感病毒的复制周期 | 第35-36页 |
| 1.10.3 流感病毒的入侵 | 第36页 |
| 1.10.4 vRNP的入核 | 第36页 |
| 1.10.5 病毒基因组的转录和复制 | 第36-37页 |
| 1.10.6 病毒vRNP的出核 | 第37页 |
| 1.10.7 流感病毒的包装和出芽 | 第37-38页 |
| 1.11 蛋白质的核质转运 | 第38-42页 |
| 1.11.1 Ran依赖性的蛋白质核质转运 | 第38-41页 |
| 1.11.2 CRM1依赖性的蛋白出核 | 第41-42页 |
| 1.12 流感病毒蛋白的核质运输 | 第42-43页 |
| 1.12.1 流感病毒vRNP及新合成的蛋白的入核 | 第42-43页 |
| 1.12.2 新组装的vRNP的出核 | 第43页 |
| 1.13 流感病毒NEP蛋白的研究进展 | 第43-48页 |
| 1.13.1 NEP蛋白的结构组成 | 第44-45页 |
| 1.13.2 NEP蛋白在流感病毒vRNP出核过程中的作用 | 第45-46页 |
| 1.13.3 NEP蛋白在流感病毒转录及复制过程中的作用 | 第46-48页 |
| 第二章 犬Ⅲ型干扰素的分子特征及功能研究 | 第48-76页 |
| 2.1 引言 | 第48页 |
| 2.2 材料与方法 | 第48-51页 |
| 2.2.1 主要化学试剂及实验材料 | 第48-49页 |
| 2.2.2 工具酶和试剂盒 | 第49页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第49-50页 |
| 2.2.4 菌株 | 第50页 |
| 2.2.5 质粒 | 第50页 |
| 2.2.6 毒株和细胞 | 第50页 |
| 2.2.7 引物序列 | 第50-51页 |
| 2.3 实验方法 | 第51-61页 |
| 2.3.1 质粒的构建 | 第51-53页 |
| 2.3.2 蛋白质的表达与纯化 | 第53-54页 |
| 2.3.3 测定蛋白质浓度 | 第54-55页 |
| 2.3.4 western blot免疫印迹分析 | 第55页 |
| 2.3.5 干扰素活性测定 | 第55-57页 |
| 2.3.6 病毒感染实验 | 第57页 |
| 2.3.7 RNA的提取 | 第57-58页 |
| 2.3.8 mRNA的反转录 | 第58页 |
| 2.3.9 Real-time PCR | 第58-59页 |
| 2.3.10 ELISA | 第59页 |
| 2.3.11 Luciferase实验 | 第59-60页 |
| 2.3.12 噬班实验 | 第60页 |
| 2.3.13 抗增殖实验 | 第60-61页 |
| 2.4 实验结果 | 第61-73页 |
| 2.4.1 系统进化分析揭示本研究中发现的犬IFN-λ为IFN-λ1 | 第61-64页 |
| 2.4.2 犬的IFN-λ、IFN-α7和IFN-λR1-EC的表达及纯化 | 第64-65页 |
| 2.4.3 犬IFN-λ,与犬IFN-α7的抗病毒活性比较 | 第65-66页 |
| 2.4.4 犬IFN-λ激活JAK-STAT信号通路 | 第66-67页 |
| 2.4.5 犬IFN-λ具有抗犬肿瘤细胞A72和MDCK细胞增殖的作用 | 第67-68页 |
| 2.4.6 不同病毒感染MDCK细胞后引起的干扰素的mRNA的变化 | 第68-70页 |
| 2.4.7 犬IFN-λ和IFN-α7刺激MDCK细胞对干扰素诱导基因的影响 | 第70-72页 |
| 2.4.8 干扰素诱导基因表达对犬IFN-λ和IFN-α7具有剂量依赖性 | 第72页 |
| 2.4.9 犬IFN-λ与其IFN-λR1受体胞外部分(IFN-λR1-EC)的结合能力测定 | 第72-73页 |
| 2.5 讨论 | 第73-76页 |
| 第三章 流感病毒感染及CypA对Ⅰ型和Ⅲ型干扰素的转录水平影响的研究 | 第76-87页 |
| 3.1 引言 | 第76-77页 |
| 3.2 材料与方法 | 第77-80页 |
| 3.2.1 细胞 | 第77页 |
| 3.2.2 病毒 | 第77页 |
| 3.2.3 病毒感染实验 | 第77-78页 |
| 3.2.4 RNA的提取 | 第78页 |
| 3.2.5 反转录 | 第78页 |
| 3.2.6 Real-time PCR | 第78-79页 |
| 3.2.7 Western blot免疫印迹分析 | 第79-80页 |
| 3.3 实验结果 | 第80-86页 |
| 3.3.1 敲低CypA基因细胞系的验证 | 第80-81页 |
| 3.3.2 H1N1-WSN感染不同细胞系对干扰素的影响 | 第81-82页 |
| 3.3.3 H1N1-PR8感染不同细胞系的干扰素变化情况 | 第82-83页 |
| 3.3.4 H1N1-CA04感染不同细胞系的干扰素变化情况 | 第83-85页 |
| 3.3.5 3株流感病毒感染不同细胞系后单一种类干扰素表达的比较 | 第85-86页 |
| 3.4 讨论 | 第86-87页 |
| 第四章 B型流感病毒NEP蛋白上NES的研究 | 第87-99页 |
| 4.1 引言 | 第87页 |
| 4.2 材料与方法 | 第87-90页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第87-88页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第88-90页 |
| 4.3 实验结果 | 第90-97页 |
| 4.3.1 对BNEP上NES的序列分析 | 第90-91页 |
| 4.3.2 对BNEP上可能的NES的功能鉴定 | 第91-92页 |
| 4.3.3 LMB抑制出核实验鉴定BNEP上三个NES的CRM1依赖性 | 第92-93页 |
| 4.3.4 BNEP上三个NES与CRM1的体内结合研究 | 第93-94页 |
| 4.3.5 NES中疏水性氨基酸对NES出核功能的影响 | 第94-96页 |
| 4.3.6 BNEP蛋白的3个NES对定位的影响 | 第96-97页 |
| 4.3.7 BNEP蛋白上的3个NES对B型流感病毒复制的影响 | 第97页 |
| 4.4 讨论 | 第97-99页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 博士期间发表文章及专利 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
