| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-39页 |
| 1.1 蛋白质糖基化修饰 | 第11-15页 |
| 1.1.1 蛋白质糖基化修饰的重要意义 | 第11-12页 |
| 1.1.2 蛋白质糖基化修饰的类型 | 第12-14页 |
| 1.1.3 糖基化修饰的特点 | 第14-15页 |
| 1.2 糖基化研究的技术与方法 | 第15-23页 |
| 1.2.1 生物质谱技术概述 | 第15-17页 |
| 1.2.2 糖基化研究的定性方法 | 第17页 |
| 1.2.3 糖蛋白/糖肽的分离与富集 | 第17-21页 |
| 1.2.3.1 凝集素亲和法 | 第17-18页 |
| 1.2.3.2 亲水相互作用法 | 第18-19页 |
| 1.2.3.3 肼腙化学法 | 第19-20页 |
| 1.2.3.4 硼酸富集法 | 第20-21页 |
| 1.2.4 糖基化位点的鉴定 | 第21-22页 |
| 1.2.5 糖蛋白质组学的技术挑战 | 第22-23页 |
| 1.3 纳米材料在糖蛋白/糖肽分离与富集技术中的应用 | 第23-25页 |
| 1.3.1 纳米材料的定义与特征 | 第23-24页 |
| 1.3.2 纳米复合材料在糖蛋白质组学中的应用 | 第24-25页 |
| 1.3.3 纳米聚合物材料在蛋白质组学中的应用 | 第25页 |
| 1.4 本论文的选题意义与创新性 | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-39页 |
| 第二章 基于两种不同表面功能化纳米材料协同作用富集N-糖基化肽的研究 | 第39-73页 |
| 2.1 引言 | 第39-40页 |
| 2.2 实验部分 | 第40-47页 |
| 2.2.1 试剂与原料 | 第40-41页 |
| 2.2.2 两种不同表面功能化纳米材料的合成与表征 | 第41-42页 |
| 2.2.2.1 硼酸修饰的磁性纳米材料Fe_3O_4@SiO_2-APB的合成 | 第41-42页 |
| 2.2.2.2 聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球的合成 | 第42页 |
| 2.2.2.3 两种不同纳米材料的表征 | 第42页 |
| 2.2.3 对于标准糖肽的选择性富集的研究 | 第42-45页 |
| 2.2.3.1 标准蛋白溶液酶解 | 第42页 |
| 2.2.3.2 两种材料协同作用富集糖肽的研究 | 第42-44页 |
| 2.2.3.3 ALDI质谱鉴定 | 第44-45页 |
| 2.2.4 复杂生物样本中糖蛋白/糖肽的富集与鉴定 | 第45-47页 |
| 2.2.4.1 正常人血清样本的预处理 | 第45页 |
| 2.2.4.2 对于N-糖基化肽段的富集 | 第45-46页 |
| 2.2.4.3 LC-MS/MS分析与鉴定 | 第46页 |
| 2.2.4.4 数据检索 | 第46-47页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第47-57页 |
| 2.3.1 两种不同表面功能化纳米材料的表征 | 第47-49页 |
| 2.3.2 两种不同材料协同作用于糖肽富集的条件的研究 | 第49-50页 |
| 2.3.3 糖肽富集灵敏度的研究 | 第50-51页 |
| 2.3.4 糖肽富集选择性的研究 | 第51-54页 |
| 2.3.5 糖肽富集回收率的研究 | 第54-56页 |
| 2.3.6 糖肽富集容量的研究 | 第56页 |
| 2.3.7 对复杂生物样品中N-糖基化肽的富集与鉴定 | 第56-57页 |
| 2.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附表 | 第62-73页 |
| 第三章 基于苯胺功能化磁性纳米材料富集糖肽的研究 | 第73-103页 |
| 3.1 引言 | 第73-75页 |
| 3.2 实验部分 | 第75-80页 |
| 3.2.1 试剂与原料 | 第75-76页 |
| 3.2.2 苯胺功能化纳米材料的合成 | 第76-77页 |
| 3.2.3 苯胺功能化磁性纳米材料用于糖肽选择性富集的研究 | 第77-78页 |
| 3.2.3.1 蛋白的溶液酶解 | 第77页 |
| 3.2.3.2 肽段的氧化 | 第77页 |
| 3.2.3.3 糖肽的富集 | 第77页 |
| 3.2.3.4 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS)分析 | 第77-78页 |
| 3.2.4 苯胺功能化磁性纳米材料用于正常人血清中N-糖基化肽富集与鉴定 | 第78-80页 |
| 3.2.4.1 正常人血清样本的处理 | 第78-79页 |
| 3.2.4.2 N-糖基化肽段的富集 | 第79页 |
| 3.2.4.3 LC-MS/MS分析 | 第79-80页 |
| 3.2.4.4 质谱数据检索 | 第80页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第80-91页 |
| 3.3.1 苯胺功能化磁性纳米材料的表征 | 第80-83页 |
| 3.3.2 糖肽富集条件的研究 | 第83-90页 |
| 3.3.2.1 孵育反应的缓冲液体系的选择 | 第84-86页 |
| 3.3.2.2 肽段初始反应浓度的考察 | 第86-87页 |
| 3.3.2.3 孵育反应温度对富集效果的影响 | 第87-88页 |
| 3.3.2.4 孵育反应时间对富集效果的影响 | 第88-89页 |
| 3.3.2.5 还原剂添加与否对富集效果的影响 | 第89-90页 |
| 3.3.3 糖肽富集选择性的研究 | 第90-91页 |
| 3.3.4 正常人血清中N-糖基化肽段的富集与鉴定 | 第91页 |
| 3.4 本章小结 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-95页 |
| 附表 | 第95-103页 |
| 第四章 总结与展望 | 第103-105页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
