| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第1章 miR-185对肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响 | 第15-29页 |
| 1.1 实验材料和仪器 | 第15-16页 |
| 1.1.1 实验细胞系和质粒 | 第15页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第15-16页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第16页 |
| 1.2 实验方法 | 第16-20页 |
| 1.2.1 qRT-PCR检测miR-185 mRNA的表达水平 | 第16-18页 |
| 1.2.2 CCK-8 实验检测肝癌细胞的增殖能力 | 第18-19页 |
| 1.2.3 集落形成实验检测肝癌细胞的集落形成能力 | 第19-20页 |
| 1.2.4 Transwell实验检测肝癌细胞的侵袭和迁移能力 | 第20页 |
| 1.2.5 统计学处理 | 第20页 |
| 1.3 结果 | 第20-25页 |
| 1.3.1 过表达或封闭细胞中内源性miR-185后肝癌细胞中miR-185的表达水平 | 第20-22页 |
| 1.3.2 miR-185对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721增殖能力的影响 | 第22-23页 |
| 1.3.3 miR-185对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721集落形成能力的影响 | 第23页 |
| 1.3.4 miR-185对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721侵袭能力的影响 | 第23-24页 |
| 1.3.5 miR-185对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721迁移能力的影响 | 第24-25页 |
| 1.4 讨论 | 第25-27页 |
| 1.5 小结 | 第27-29页 |
| 第2章 确定miR-185在肝癌细胞中的靶基因 | 第29-51页 |
| 2.1 实验试剂和仪器 | 第29-31页 |
| 2.1.1 实验细胞系 | 第29页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-41页 |
| 2.2.1 qRT-PCR检测细胞中miR-185和NR1D1 mRNA的表达水平 | 第31-33页 |
| 2.2.2 Western blotting检测细胞中NR1D1蛋白的表达水平 | 第33-34页 |
| 2.2.3 miR-185候选靶基因的筛选 | 第34-35页 |
| 2.2.4 荧光报告载体的构建 | 第35-39页 |
| 2.2.5 荧光报告载体实验 | 第39-40页 |
| 2.2.6 qRT-PCR检测miR-185对肝癌细胞中NR1D1 mRNA表达水平的影响 | 第40页 |
| 2.2.7 Western blotting检测miR-185对肝癌细胞中NR1D1蛋白表达水平的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.8 统计学处理 | 第41页 |
| 2.3 结果 | 第41-48页 |
| 2.3.1 LO2、HepG2和SMMC-7721细胞中miR-185和NR1D1 mRNA的表达水平 | 第41-42页 |
| 2.3.2 LO2、HepG2和SMMC-7721细胞中NR1D1蛋白的表达水平 | 第42-43页 |
| 2.3.3 miR-185候选靶基因的筛选 | 第43页 |
| 2.3.4 荧光报告载体的构建 | 第43-45页 |
| 2.3.5 荧光报告载体实验验证NR1D1是miR-185的直接靶基因 | 第45页 |
| 2.3.6 miR-185对肝癌细胞中NR1D1 mRNA表达水平的影响 | 第45-48页 |
| 2.3.7 miR-185对肝癌细胞中NR1D1蛋白表达水平的影响 | 第48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 2.5 小结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 第3章 综述microRNA与肝癌关系的研究进展 | 第55-68页 |
| 3.1 肝癌的研究现状 | 第55页 |
| 3.2 miRNA与肿瘤的关系 | 第55-56页 |
| 3.3 miRNA的生物合成 | 第56-57页 |
| 3.4 miRNA与肝细胞癌 | 第57-58页 |
| 3.5 具有癌基因作用的miRNA | 第58-59页 |
| 3.5.1 miR-21 | 第58页 |
| 3.5.2 miR-25 | 第58页 |
| 3.5.3 miR-221和miR-222 | 第58-59页 |
| 3.5.4 miR-224 | 第59页 |
| 3.6 具有抑癌基因作用的miRNA | 第59-62页 |
| 3.6.1 miR-1 | 第59-60页 |
| 3.6.2 miR-26 | 第60-61页 |
| 3.6.3 miR-122 | 第61-62页 |
| 3.6.4 miR-375 | 第62页 |
| 3.7 小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 导师简介一 | 第70-71页 |
| 导师简介二 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72-73页 |
| 学位论文数据集 | 第73页 |
