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抗卵泡刺激素受体(FSHR)纳米抗体对于实验动物骨质疏松症作用效果的研究

摘要第3-6页
Abstract第6-9页
英文缩略词第10-15页
第一部分 文献综述第15-30页
    1 促性腺激素与骨质疏松症的关系第15-18页
        1.1 卵泡刺激素(Follicle Stimulating Hormone,FSH)及其生理作用第15页
        1.2 黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)及其生理作用第15-16页
        1.3 FSH与LH在卵泡成熟过程中存在的相互关系第16页
        1.4 亮丙瑞林(LE)简介第16-17页
        1.5 促性腺激素与骨质疏松之间的关系第17-18页
    2 纳米抗体的研究概况第18-20页
        2.1 纳米抗体的简介第18页
        2.2 纳米抗体在研究领域的应用第18-20页
    3 骨质疏松症的治疗第20-23页
        3.1 骨质疏松症简介第20-21页
        3.2 骨质疏松症研究进展第21页
        3.3 FSH对骨质疏松症的影响第21-22页
        3.4 骨质疏松症的治疗第22-23页
    参考文献第23-30页
第二部分 实验研究第30-76页
    第一章 利用噬菌体展示技术从骆驼抗体文库中筛选抗FSHR纳米抗体第30-51页
        1 材料与方法第31-36页
            1.1 材料第31-33页
                1.1.1 实验材料第31页
                1.1.2 试剂第31页
                1.1.3 仪器第31-32页
                1.1.4 培养基及溶液配制第32-33页
            1.2 方法第33-36页
                1.2.1 噬菌体的分离与扩增第33-34页
                1.2.2 抗FSHR纳米抗体的亲和筛选第34页
                1.2.3 多克隆Phage ELISA第34-35页
                1.2.4 原核表达载体pET22b-VHH-3F9的构建第35页
                1.2.5 VHH-3F9纳米抗体的制备第35页
                1.2.6 VHH-3F9纳米抗体的结合活性检测第35-36页
                1.2.7 竞争ELISA检测VHH-3F9的阻断能力第36页
        2 结果与分析第36-46页
            2.1 抗原FSHR234蛋白的获得第36-37页
            2.2 FSHR234蛋白对噬菌体免疫文库的筛选第37-39页
            2.3 FSHR234抗原筛选获得的VHH-X基因序列分析第39-40页
            2.4 pMECS-VHH-X重组质粒的提取及其酶切第40-42页
            2.5 BL21-pET22b-VHH-3F8、3F10、3F9、3F19及 3F20转化子的鉴定第42页
            2.6 纳米抗体VHH-3F9的诱导表达及其纯化第42-44页
            2.7 纳米抗体VHH-3F9的结合活性检测第44-45页
            2.8 竞争ELISA检测VHH-3F9的阻断功能第45-46页
        3 讨论第46-48页
        参考文献第48-51页
    第二章 抗FSHR骆驼多克隆抗体的制备第51-60页
        1 材料与方法第52-54页
            1.1 材料第52页
            1.2 方法第52-54页
                1.2.1 FSHR234蛋白免疫新疆双峰驼及其血清的采集第52页
                1.2.2 骆驼来源抗FSHR多克隆抗体的纯化第52-53页
                1.2.3 间接ELISA法检测抗FSHR多克隆抗体的最低结合浓度第53页
                1.2.4 Western Blot检测抗FSHR多克隆抗体结合特异性第53页
                1.2.5 细胞免疫化学检测抗FSHR抗体在caov-3 细胞表面的结合第53-54页
        2 结果第54-58页
            2.1 骆驼来源抗FSHR多克隆抗体的纯化第54-56页
            2.2 抗FSHR多克隆抗体的最低结合浓度测定第56页
            2.3 Western Blot检测骆驼抗FSHR多克隆抗体结合特异性第56页
            2.4 细胞免疫化学检测抗FSHR抗体在caov-3 细胞表面的结合第56-58页
        3 讨论第58页
        参考文献第58-60页
    第三章 SD大鼠骨质疏松症动物模型的建立第60-68页
        1 材料与方法第61-62页
            1.1 材料第61页
            1.2 方法第61-62页
                1.2.1 SD大鼠骨质疏松模型的建立第61页
                1.2.2 大鼠血生化指标及雌激素水平测定第61页
                1.2.3 大鼠骨密度(BMD)测定第61-62页
                1.2.4 数据处理及分析第62页
        2 结果第62-64页
            2.1 动物生长常规观察第62页
            2.2 大鼠血钙(S-Ca)、血磷(S-P)含量测定第62-63页
            2.3 大鼠血清E2、FSH、LH水平测定第63-64页
            2.4 大鼠骨密度(BMD)检测第64页
        3 讨论第64-65页
        参考文献第65-68页
    第四章 抗FSHR抗体对实验大鼠骨质疏松症的治疗第68-76页
        1 材料第69页
            1.1 实验动物及分组第69页
            1.2 试剂配置第69页
        2 方法第69-70页
            2.1 大鼠骨质疏松模型的治疗第69页
            2.2 抗FSHR抗体治疗SD大鼠雌激素及BMD检测第69-70页
            2.3 免疫组化观察SD大鼠骨组织病理学变化第70页
        3 结果第70-73页
            3.1 治疗过程中SD大鼠体重的变化第70页
            3.2 抗体治疗SD大鼠雌激素及BMD检测第70-72页
            3.3 抗体治疗SD大鼠组织病理学观察第72-73页
        4 讨论第73-74页
        参考文献第74-76页
第三部分 结论与展望第76-77页
    1 结论第76页
    2 展望第76-77页
致谢第77-79页
个人简历第79页
参与课题第79页
发表文章第79-80页

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