| 附表 | 第3-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-28页 |
| 1.1 20世纪人类历史上5次流感病毒的大流行 | 第14-15页 |
| 1.1.1“西班牙”H1N1流感大流行 | 第14页 |
| 1.1.2 亚洲H2N2流感大流行 | 第14页 |
| 1.1.3“香港”H3N2流感大流行 | 第14-15页 |
| 1.1.4 H1N1的再次出现 | 第15页 |
| 1.1.52009甲型H1N1流感大流行 | 第15页 |
| 1.2 H5、H7和H9亚型AIVs在哺乳动物模型中水平传播研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 H5N1亚型禽流感病毒 | 第15-16页 |
| 1.2.2 H9N2亚型禽流感病毒 | 第16-17页 |
| 1.2.3 H7N9亚型禽流感病毒 | 第17页 |
| 1.3 流感病毒从动物到人的传播屏障 | 第17-20页 |
| 1.3.1 野禽到人传播的障碍 | 第18-19页 |
| 1.3.2 流感病毒跨种传播的途径 | 第19-20页 |
| 1.3.3 传染路径的屏障 | 第20页 |
| 1.4 病毒和细胞间相互作用的屏障 | 第20-24页 |
| 1.4.1 病毒与宿主细胞的吸附 | 第21-22页 |
| 1.4.2 病毒和细胞融合 | 第22-23页 |
| 1.4.3 病毒的复制 | 第23-24页 |
| 1.4.4 病毒的释放 | 第24页 |
| 1.5 流感病毒在人群中适应的分子机制和进化途径 | 第24-26页 |
| 1.5.1 病毒复制过程中的基因突变 | 第24-26页 |
| 1.5.2 不同亚型病毒基因重组 | 第26页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第26-28页 |
| 第二章 H9N2 AIV在豚鼠中传播的分子机制初步研究 | 第28-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第28-34页 |
| 2.1.1 病毒株与实验动物 | 第28-29页 |
| 2.1.2 细胞、菌株与载体 | 第29页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第29页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第29页 |
| 2.1.5 病毒RNA的提取、反转录和PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.1.6 PCR胶回收方法及质粒提取方法 | 第30-31页 |
| 2.1.7 点突变方法及突变引物的设计 | 第31页 |
| 2.1.8 流感病毒受体检测方法 | 第31-32页 |
| 2.1.9 流感病毒聚合酶复合体活性的测定 | 第32页 |
| 2.1.10 流感病毒HA蛋白热稳定性和酸稳定性检测 | 第32页 |
| 2.1.11 SD2/H9N2病毒株及突变病毒株的拯救 | 第32-33页 |
| 2.1.12 H9N2亚型AIV对小鼠致病力评估 | 第33页 |
| 2.1.13 H9N2亚型AIV在豚鼠模型中接触传播能力的评估 | 第33页 |
| 2.1.14 SD2豚鼠适应病毒株在豚鼠模型和雪貂模型间的气源性传播能力评估 | 第33页 |
| 2.1.15血清抗体检测 | 第33-34页 |
| 2.2 结果 | 第34-45页 |
| 2.2.1 3株H9N2亚型AIVs对小鼠致病力及HA受体结合能力的评估 | 第34-35页 |
| 2.2.2 3株H9N2亚型AIVs在豚鼠模型中接触传播能力的评估 | 第35-36页 |
| 2.2.3 SD2病毒株通过在豚鼠体内适应性传代而获得接触传播能力 | 第36-37页 |
| 2.2.4 SD2/H9N2豚鼠传代病毒株与母本病毒株全基因序列的比较分析 | 第37-38页 |
| 2.2.5 影响豚鼠适应病毒株在豚鼠模型中接触传播的关键氨基酸位点的确定 | 第38-39页 |
| 2.2.6 HA1-Q227P和HA2-D46E氨基酸突变改变病毒受体结合能力 | 第39-40页 |
| 2.2.7 HA2-D46E增加病毒HA蛋白的热稳定性 | 第40-41页 |
| 2.2.8 HA1-Q227P能够降低病毒HA蛋白的酸稳定性 | 第41-42页 |
| 2.2.9 NP-E434K能增显著增加在 33℃条件下的病毒聚合酶活性 | 第42-43页 |
| 2.2.10 P15代豚鼠适应病毒株在豚鼠模型和雪貂模型中气源传播的效率较低 | 第43-45页 |
| 2.2.11豚鼠适应传代病毒株对小鼠致病力评估及抗原性分析 | 第45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 SD2小鼠适应病毒株在豚鼠模型中的传播能力评估 | 第47-58页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 3.1.1 病毒株与实验动物 | 第47页 |
| 3.1.2 细胞、菌株与载体 | 第47-48页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第48页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第48页 |
| 3.1.5 病毒RNA的提取、反转录和PCR扩增 | 第48-49页 |
| 3.1.6 PCR胶回收方法及质粒提取方法 | 第49页 |
| 3.1.7 点突变引物的设计 | 第49-50页 |
| 3.1.8 SD2病毒株及突变病毒株的拯救 | 第50页 |
| 3.1.9 SD2病毒株在小鼠体内的适应性传代 | 第50页 |
| 3.1.10 小鼠致病力评估实验 | 第50-51页 |
| 3.1.11 SD2小鼠适应病毒株在豚鼠模型中的传播能力评估 | 第51页 |
| 3.1.12 SD2小鼠适应病毒株受体结合能力检测 | 第51页 |
| 3.1.13 SD2小鼠适应株病毒株体外聚合酶活性检测 | 第51-52页 |
| 3.1.14 血清抗体的检测 | 第52页 |
| 3.2 结果 | 第52-56页 |
| 3.2.1 P5小鼠适应病毒株对小鼠的致病力增加 | 第52-53页 |
| 3.2.2 P5小鼠适应病毒株对 α2,6-糖苷键SA结合能力增强 | 第53-54页 |
| 3.2.3 PB2-E627K显著增加病毒的体外聚合酶活性 | 第54-55页 |
| 3.2.4 P5小鼠适应病毒株不能在豚鼠模型中发生传播 | 第55-56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 PB2-D195N和PB2-E627K有助于SD2病毒株在豚鼠中的传播 | 第58-68页 |
| 4.1 材料与方法 | 第58-62页 |
| 4.1.1 病毒株与实验动物 | 第58页 |
| 4.1.2 细胞、菌株与载体 | 第58页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第59页 |
| 4.1.5 病毒RNA的提取、反转录和PCR扩增 | 第59-60页 |
| 4.1.6 PCR胶回收方法及质粒提取方法 | 第60页 |
| 4.1.7 点突变引物的设计及突变病毒株的拯救 | 第60页 |
| 4.1.8 流感病毒聚合酶复合体活性的测定 | 第60-61页 |
| 4.1.9 小鼠致病力评估实验 | 第61页 |
| 4.1.10豚鼠模型间传播能力评估 | 第61页 |
| 4.1.11血清抗体的检测 | 第61-62页 |
| 4.2 结果 | 第62-66页 |
| 4.2.1 PB2-D195N不能协同增强PB2-E627K对SD2病毒体外聚合酶活性 | 第62-63页 |
| 4.2.2 PB2-D195N和PB2-E627K能够增加SD2病毒株在小鼠体内的组织嗜性 | 第63-65页 |
| 4.2.3 PB2-D195N和PB2-E627K有助于SD2病毒株在豚鼠中发生接触传播 | 第65-66页 |
| 4.3 讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 全文结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简历 | 第78页 |
