摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
主要符号对照表 | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第11-18页 |
1.1 石油污染物 | 第11-12页 |
1.1.1 石油的组成 | 第11页 |
1.1.2 石油污染物的危害 | 第11-12页 |
1.2 石油污染的微生物修复 | 第12-13页 |
1.2.1 石油烃降解菌的种类 | 第12-13页 |
1.2.2 微生物降解石油烃的代谢途径和机理 | 第13页 |
1.2.3 环境条件对微生物修复的影响 | 第13页 |
1.3 烷烃羟化酶研究进展 | 第13-16页 |
1.4 烷烃羟化酶的应用 | 第16-17页 |
1.5 本研究的内容、目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 不同金属离子对解烃菌TY22烷烃降解的影响 | 第18-28页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 菌株 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
2.1.3 培养基 | 第18页 |
2.1.4 常用溶液 | 第18-19页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-20页 |
2.2.1 菌种的活化与纯化 | 第19页 |
2.2.2 降解实验 | 第19页 |
2.2.3 菌体生物量的测定 | 第19-20页 |
2.3 结果与分析 | 第20-27页 |
2.3.1 轻金属离子对解烃菌TY22烷烃降解的影响 | 第20-23页 |
2.3.2 重金属离子对解烃菌TY22烷烃降解的影响 | 第23-27页 |
2.4 本章小结 | 第27-28页 |
第三章 烷烃羟化酶基因alkB的克隆及序列分析 | 第28-47页 |
3.1 实验材料 | 第28-29页 |
3.1.1 菌株与载体 | 第28页 |
3.1.2 主要试剂 | 第28页 |
3.1.3 培养基 | 第28页 |
3.1.4 常用溶液 | 第28-29页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第29页 |
3.2 烷烃羟化酶基因alkB片段的克隆 | 第29-38页 |
3.2.1 引物 | 第29-30页 |
3.2.2 实验方法 | 第30-33页 |
3.2.3 结果与分析 | 第33-38页 |
3.3 染色体步移技术测定烷烃羟化酶基因alkB全序列 | 第38-41页 |
3.3.1 实验方法 | 第38-40页 |
3.3.2 结果与分析 | 第40-41页 |
3.4 序列分析 | 第41-45页 |
3.4.1 DNA序列BLAST分析 | 第41-42页 |
3.4.2 氨基酸序列BLAST分析 | 第42-43页 |
3.4.3 蛋白理化性质分析 | 第43页 |
3.4.4 蛋白二级结构、三级结构的预测 | 第43-45页 |
3.5 本章小结 | 第45-47页 |
第四章 烷烃羟化酶基因alkB在大肠杆菌中诱导表达 | 第47-57页 |
4.1 实验材料 | 第47-48页 |
4.1.1 菌株与质粒 | 第47页 |
4.1.2 主要试剂 | 第47页 |
4.1.3 培养基 | 第47页 |
4.1.4 常用溶液 | 第47-48页 |
4.1.5 主要仪器设备 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-52页 |
4.2.1 聚合酶链式反应(PCR) | 第48-49页 |
4.2.2 重组菌的构建 | 第49-51页 |
4.2.3 重组菌的诱导表达 | 第51-52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-56页 |
4.3.1 alkB基因的PCR扩增 | 第52-53页 |
4.3.2 阳性克隆的鉴定 | 第53-54页 |
4.3.3 重组菌的诱导表达 | 第54-56页 |
4.4 本章小结 | 第56-57页 |
第五章 烷烃羟化酶基因alkB的缺失与互补功能验证 | 第57-66页 |
5.1 实验材料 | 第57-59页 |
5.1.1 菌株 | 第57页 |
5.1.2 质粒 | 第57页 |
5.1.3 主要试剂 | 第57-58页 |
5.1.4 培养基及常用溶液 | 第58页 |
5.1.5 主要仪器设备 | 第58-59页 |
5.2 实验方法 | 第59-62页 |
5.2.1 聚合酶链式反应(PCR) | 第59页 |
5.2.2 重组菌的构建 | 第59-62页 |
5.2.3 重组菌的功能互补实验 | 第62页 |
5.3 结果与分析 | 第62-65页 |
5.3.1 alkB基因的PCR扩增 | 第62-63页 |
5.3.2 阳性克隆的鉴定 | 第63-64页 |
5.3.3 重组菌的功能互补实验 | 第64-65页 |
5.4 本章小结 | 第65-66页 |
第六章 结论与展望 | 第66-68页 |
6.1 结论 | 第66-67页 |
6.2 展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
附录 A pet21 系列载体图谱及相关序列位点 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-78页 |
在学期间的科研情况 | 第78页 |