缩略词表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第11-14页 |
材料与方法 | 第14-26页 |
1 材料 | 第14-18页 |
1.1 主要药品与试剂 | 第14-15页 |
1.2 主要实验仪器和设备 | 第15-16页 |
1.3 主要溶液配制 | 第16-18页 |
2 方法 | 第18-26页 |
2.1 南瓜蛋白2的分离纯化 | 第18页 |
2.2 纯化蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第18-20页 |
2.3 蛋白质样品浓度测定 | 第20页 |
2.4 细胞培养 | 第20-21页 |
2.5 SRB法检测CUS2体外对HepG2细胞增殖的影响 | 第21-22页 |
2.6 CUS2作用后HepG2细胞经Hoechst 33258 荧光染色分析 | 第22页 |
2.7 电镜观察经CUS2作用后HepG2细胞的超微结构变化 | 第22页 |
2.8 PI流式细胞法检测CUS2对HepG2细胞增殖周期的影响 | 第22-23页 |
2.9 ELISA方法检测Caspase 3、Caspase 9 的活性 | 第23页 |
2.10 Western blot法检测CUS2对HepG2细胞GOLPH3、mTOR、Akt、Raf、Ras、Caspase 3 蛋白表达水平的影响 | 第23-25页 |
2.11 统计学方法 | 第25-26页 |
结果 | 第26-35页 |
1 南瓜蛋白2的制备 | 第26-27页 |
1.1 南瓜蛋白2的分离纯化 | 第26页 |
1.2 纯化蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-27页 |
1.3 纯化蛋白的分子量测定 | 第27页 |
2 南瓜蛋白2抗肝癌活性 | 第27-32页 |
2.1 CUS2对人肝癌HepG2细胞增殖的影响(同CUS1作对比) | 第27-28页 |
2.2 SRB法检测CUS2体外对HepG2细胞增殖的影响(时效关系) | 第28页 |
2.3 SRB法检测CUS2体外对人胚肝细胞系L02细胞和HepG2细胞增殖的影响 | 第28-29页 |
2.4 HepG2细胞荧光染色分析 | 第29-30页 |
2.5 电子显微镜观察CUS2对人肝癌HepG2细胞形态的影响 | 第30页 |
2.6 PI流式细胞法检测CUS2对HepG2细胞增殖周期的影响 | 第30-32页 |
3 南瓜蛋白2诱导HepG2细胞凋亡的信号通路 | 第32-35页 |
3.1 CUS2对HepG2细胞GOLPH3、mTOR、Akt、Raf、Ras、caspase 3 蛋白表达水平的影响 | 第32-34页 |
3.2 CUS2对HepG2细胞Caspase 3、Caspase 9 酶活性的影响 | 第34-35页 |
讨论 | 第35-41页 |
1 南瓜蛋白2的制备 | 第35-36页 |
2 南瓜蛋白2抗肝癌活性 | 第36-38页 |
3 南瓜蛋白2诱导HepG2细胞凋亡的信号通路 | 第38-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
综述 | 第46-54页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54页 |