| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 综述 | 第9-24页 |
| 1.1 植物多倍体的研究进展 | 第9-14页 |
| 1.1.1 多倍化现象概述 | 第9页 |
| 1.1.2 植物多倍体的起源 | 第9-10页 |
| 1.1.3 多倍体的分类 | 第10页 |
| 1.1.4 油菜的多倍化研究 | 第10-11页 |
| 1.1.5 多倍化对植物性状改良的意义 | 第11-13页 |
| 1.1.6 多倍化与表观遗传 | 第13-14页 |
| 1.2 植物非生物胁迫概述 | 第14-16页 |
| 1.2.1 植物的耐旱机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 油菜的耐旱性研究 | 第15-16页 |
| 1.3 DNA甲基化的研究进展 | 第16-23页 |
| 1.3.1 植物DNA甲基化的建立和保持 | 第16-17页 |
| 1.3.2 植物甲基化的特点 | 第17-18页 |
| 1.3.3 DNA甲基化的生物学功能 | 第18-20页 |
| 1.3.4 油菜的甲基化研究 | 第20页 |
| 1.3.5 测定甲基化的方法 | 第20-22页 |
| 1.3.6 非生物胁迫与表观遗传 | 第22-23页 |
| 1.4 研究目的 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.2 生理指标测定 | 第24-26页 |
| 2.2.1 相对含水量测定 | 第24页 |
| 2.2.2 相对保水力测定 | 第24页 |
| 2.2.3 超氧化物歧化酶(SOD)测定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 过氧化物酶(POD)测定 | 第25页 |
| 2.2.5 丙二醛(MDA)含量测定 | 第25-26页 |
| 2.2.6 可溶性蛋白含量测定 | 第26页 |
| 2.3 叶片气孔结构观察 | 第26-27页 |
| 2.3.1 环境扫描电镜(ESEM)观察叶片气孔特征 | 第26-27页 |
| 2.3.2 使用Image-Pro Plus图像软件统计气孔数据 | 第27页 |
| 2.4 高效液相色谱法测定总甲基化水平 | 第27-28页 |
| 2.4.1 植物基因组DNA提取与纯化 | 第27-28页 |
| 2.4.2 高效液相色谱法测定总甲基化 | 第28页 |
| 2.5 甲基化敏感扩增多态性分析 | 第28-34页 |
| 2.5.1 植物基因组DNA提取与纯化 | 第28-29页 |
| 2.5.2 接头和引物 | 第29页 |
| 2.5.3 DNA酶切 | 第29-30页 |
| 2.5.4 片段的接头 | 第30-31页 |
| 2.5.5 DNA片段的预扩增 | 第31页 |
| 2.5.6 DNA片段的选择性扩增 | 第31页 |
| 2.5.7 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-34页 |
| 2.6 特异性片段的回收和克隆 | 第34-36页 |
| 2.6.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳的割胶回收 | 第34页 |
| 2.6.2 琼脂糖凝胶回收再次扩增产物 | 第34-35页 |
| 2.6.3 连接与转化 | 第35页 |
| 2.6.4 菌落PCR与测序 | 第35-36页 |
| 2.7 反转录PCR和Real-Time PCR | 第36-39页 |
| 2.7.1 植物RNA提取与纯化 | 第36页 |
| 2.7.2 反转录PCR | 第36-37页 |
| 2.7.3 定量PCR扩增 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-55页 |
| 3.1 人工合成甘蓝型油菜F1及其二倍体亲本苗期干旱胁迫下形态结构及生理差异比较 | 第39-43页 |
| 3.1.1 干旱胁迫下F1与亲本表型差异比较 | 第39页 |
| 3.1.2 苗期F1与二倍体亲本干旱胁迫下相对含水量和相对保水力差异 | 第39-40页 |
| 3.1.3 胁迫处理与正常条件下F1与亲本气孔特征比较 | 第40-42页 |
| 3.1.4 人工合成甘蓝型油菜F1与亲本苗期对干旱胁迫的生理响应 | 第42-43页 |
| 3.1.4.1 苗期F1与二倍体亲本干旱胁迫下生理指标差异 | 第42-43页 |
| 3.2 人工合成甘蓝型油菜F1及亲本苗期干旱胁迫下表观遗传变异 | 第43-53页 |
| 3.2.1 F1及亲本苗期总甲基化水平分析 | 第44页 |
| 3.2.2 MSAP分析F1及亲本苗期甲基化模式变化 | 第44-49页 |
| 3.2.3 差异甲基化片段的克隆和测序 | 第49页 |
| 3.2.4 差异甲基化片段比对 | 第49-50页 |
| 3.2.5 定量PCR分析 | 第50-53页 |
| 3.3 人工合成甘蓝型油菜后代(F1-F4)DNA甲基化分析 | 第53-55页 |
| 3.3.1 不断自交过程中甲基化水平变化 | 第53页 |
| 3.3.2 不断自交过程中甲基化模式变化 | 第53-54页 |
| 3.3.3 DNA甲基化酶MET1、CMT的表达分析 | 第54-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-60页 |
| 4.1 人工合成甘蓝型油菜F1与亲本苗期干旱胁迫下表型及生理差异 | 第55-56页 |
| 4.2 人工合成甘蓝型油菜F1与亲本苗期DNA甲基化差异分析 | 第56-58页 |
| 4.2.1 人工合成甘蓝型油菜的全基因组甲基化变化 | 第56-57页 |
| 4.2.2 人工合成的甘蓝型油菜及其亲本的MSAP分析 | 第57-58页 |
| 4.3 人工合成甘蓝型油菜早期世代DNA甲基化分析 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 硕士期间发表论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
