| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1. 引言 | 第12-26页 |
| 1.1 微管相关蛋白tau与tau蛋白相关疾病 | 第12-14页 |
| 1.1.1 tau蛋白及其生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.1.2 tau蛋白聚集体与tau蛋白相关疾病 | 第13-14页 |
| 1.2 蛋白质质量控制 | 第14-15页 |
| 1.3 泛素-蛋白酶体系统 | 第15-21页 |
| 1.3.1 泛素与泛素化酶 | 第15-16页 |
| 1.3.2 26S蛋白酶体结构与功能 | 第16-18页 |
| 1.3.3 去泛素化酶 | 第18-19页 |
| 1.3.4 蛋白酶体去泛素化酶Poh1 | 第19-21页 |
| 1.3.5 泛素-蛋白酶体系统与tau蛋白的降解 | 第21页 |
| 1.4 自噬途径 | 第21-24页 |
| 1.4.1 巨自噬 | 第22页 |
| 1.4.2 自噬-溶酶体途径与蛋白聚集体的选择性降解 | 第22-23页 |
| 1.4.3 Poh1和自噬-溶酶体通路的关系 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 2. 材料和方法 | 第26-33页 |
| 2.1 细胞 | 第26页 |
| 2.2 HEK293/tau441细胞培养 | 第26页 |
| 2.3 主要试剂和抗体 | 第26-27页 |
| 2.3.1 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.3.2 抗体 | 第27页 |
| 2.4 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.5 Poh1 siRNA转染 | 第28-29页 |
| 2.6 药物处理细胞 | 第29页 |
| 2.7 免疫荧光 | 第29-30页 |
| 2.8 免疫印迹 | 第30-32页 |
| 2.8.1 收取蛋白样品 | 第30页 |
| 2.8.2 BCA法测蛋白浓度 | 第30-31页 |
| 2.8.3 免疫印迹 | 第31-32页 |
| 2.9 统计学分析 | 第32-33页 |
| 3. 结果 | 第33-42页 |
| 3.1 Poh1 siRNA处理细胞对内源性Poh1表达水平的影响 | 第33-34页 |
| 3.2 抑制蛋白酶体活性诱导tau蛋白形成核周聚集体 | 第34-35页 |
| 3.3 抑制蛋白酶体活性诱导Poh1和tau蛋白在核周共定位 | 第35-36页 |
| 3.4 蛋白酶体活性抑制时,下调Poh1表达对总tau蛋白含量的影响 | 第36-37页 |
| 3.5 蛋白酶体活性抑制时,下调Poh1表达对自噬途径活性的影响 | 第37-38页 |
| 3.6 蛋白酶体活性抑制时,下调Poh1表达对K63连接的泛素链含量的影响 | 第38-39页 |
| 3.7 蛋白酶体活性抑制时,下调Poh1表达对HDAC6表达水平及去乙酰化酶活性的影响 | 第39-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-47页 |
| 4.1 MG132可诱导tau蛋白和Poh1参与形成核周聚集体 | 第43页 |
| 4.2 蛋白酶体活性抑制时,下调Poh1表达水平对tau蛋白清除的影响 | 第43-45页 |
| 4.3 蛋白酶体活性抑制时,下调Poh1表达水平对K63连接的泛素链表达水平的影响 | 第45页 |
| 4.4 蛋白酶体活性抑制时,下调Poh1表达水平对HDAC6表达及去乙酰化酶活性的影响 | 第45-47页 |
| 5. 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
