| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 细菌视紫红质(BR) | 第10-14页 |
| 1.1.1 细菌视紫红质(BR)的结构特性 | 第10-12页 |
| 1.1.2 细菌视紫红质(BR)质子泵效应 | 第12页 |
| 1.1.3 细菌视紫红质(BR)的研究新进展 | 第12-14页 |
| 1.2 大肠杆菌膜蛋白表达系统的研究 | 第14-16页 |
| 1.3 大肠杆菌表达膜蛋白过程中包涵体的形成 | 第16-18页 |
| 1.3.1 包涵体(Inclusion Bodies,IB)的组成与成因 | 第16-17页 |
| 1.3.2 减少包涵体形成的策略 | 第17页 |
| 1.3.3 重组蛋白的复性 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 试验材料与方法 | 第20-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 感受态细胞 | 第20页 |
| 2.1.3 质粒 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要试剂与试剂盒 | 第21页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.6 引物 | 第22页 |
| 2.1.7 培养基 | 第22页 |
| 2.1.8 主要溶液 | 第22-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 嗜盐古菌总DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 DNA含量及浓度测定 | 第25页 |
| 2.2.3 克隆质粒pMD-19T-IM-1的构建 | 第25-29页 |
| 2.2.4 表达载体的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.5 诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第33页 |
| 2.2.7 生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.8 诱导条件的优化 | 第34页 |
| 2.2.9 包涵体的分离 | 第34-35页 |
| 2.2.10 蛋白质标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
| 2.2.11 蛋白含量的测定 | 第36页 |
| 2.2.12 BR蛋白的光反应和暗反应 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-49页 |
| 3.1 嗜盐古菌基因组DNA的电泳结果 | 第37页 |
| 3.2 嗜盐古菌基因组DNA含量的测定 | 第37页 |
| 3.3 bop基因全序列扩增产物的电泳检测 | 第37-38页 |
| 3.4 嗜盐古菌视紫红质bop基因全序列分析 | 第38-39页 |
| 3.5 嗜盐古菌视紫红质的氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
| 3.6 表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.6.1 pET-28a(+)与目的片段的连接 | 第40页 |
| 3.6.2 重组表达质粒转化BL21(DE3) | 第40-41页 |
| 3.6.3 重组质粒测序 | 第41页 |
| 3.7 BR的诱导表达 | 第41-49页 |
| 3.7.1 初步表达 | 第41-42页 |
| 3.7.2 工程菌生长曲线 | 第42-43页 |
| 3.7.3 诱导表达条件的优化 | 第43-45页 |
| 3.7.4 分离包涵体 | 第45-46页 |
| 3.7.5 包涵体蛋白的复性 | 第46页 |
| 3.7.6 纯化蛋白质的浓度测定 | 第46-48页 |
| 3.7.7 BR光反应和暗反应 | 第48-49页 |
| 4 结论与讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 结论 | 第49页 |
| 4.2 讨论 | 第49-53页 |
| 4.2.1 bop基因全序列分析 | 第49-50页 |
| 4.2.2 目的蛋白的诱导表达及表达条件的优化 | 第50-51页 |
| 4.2.3 重组蛋白的光谱吸收特性 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
