| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略表 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-41页 |
| 1.1.肺癌概述 | 第17-26页 |
| 1.1.1 肺癌的现状及发病机制 | 第17-18页 |
| 1.1.2 肺癌的分类与分期 | 第18-25页 |
| 1.1.3 肺癌的诊断与临床特征 | 第25-26页 |
| 1.2. COPD概述 | 第26-30页 |
| 1.2.1 COPD的现状与发病机制 | 第26-28页 |
| 1.2.2 COPD的分类与早期诊断 | 第28-30页 |
| 1.3. 表观遗传学和DNA甲基化 | 第30-33页 |
| 1.3.1. 表观遗传学 | 第30-31页 |
| 1.3.2. DNA甲基化 | 第31页 |
| 1.3.3. 组蛋白共价修饰 | 第31-33页 |
| 1.4. 肺癌和COPD及与DNA甲基化的关联 | 第33-35页 |
| 1.4.1. COPD与肺癌的流行病学研究 | 第33页 |
| 1.4.2. 共同的环境风险因素 | 第33页 |
| 1.4.3. 表观遗传修饰 | 第33-35页 |
| 1.5. DNA甲基化的检测方法 | 第35-38页 |
| 1.6. APC/PCDH20/RUNX3基因的筛选 | 第38-39页 |
| 1.6.1. APC | 第38页 |
| 1.6.2. PCDH20 | 第38页 |
| 1.6.3. RUNX3 | 第38-39页 |
| 1.7. 云南肺癌及COPD的概述 | 第39页 |
| 1.8. 本课题的研究目的及意义 | 第39-41页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第41-65页 |
| 2.1. 实验材料 | 第41-46页 |
| 2.1.1. 实验样本 | 第41页 |
| 2.1.2. 主要实验仪器及耗材 | 第41-43页 |
| 2.1.3. 实验主要试剂 | 第43-45页 |
| 2.1.4. 实验主要试剂的配置方法 | 第45-46页 |
| 2.2. 实验方法 | 第46-65页 |
| 2.2.1. 肺癌及COPD全血样本收集 | 第46-47页 |
| 2.2.2. A549细胞培养 | 第47-48页 |
| 2.2.3. 冻存 | 第48页 |
| 2.2.4. A549细胞DNA提取 | 第48-49页 |
| 2.2.5. 全血样本DNA提取 | 第49-51页 |
| 2.2.6. 核酸定量 | 第51页 |
| 2.2.7. 全血DNA中亚硫酸氢盐转化 | 第51-52页 |
| 2.2.8. 引物设计 | 第52-54页 |
| 2.2.9. 普通PCR | 第54-55页 |
| 2.2.10. 琼脂糖凝胶电泳 | 第55-56页 |
| 2.2.11. PCR产物纯化 | 第56页 |
| 2.2.12. 克隆转化 | 第56-58页 |
| 2.2.13. 阳性克隆鉴定 | 第58-59页 |
| 2.2.14. 质粒DNA的提取 | 第59-60页 |
| 2.2.15. 测序 | 第60页 |
| 2.2.16. 荧光定量PCR绝对定量进行甲基化检测 | 第60-61页 |
| 2.2.17. 统计学分析 | 第61-65页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第65-87页 |
| 3.1. 肺癌全血样本统计 | 第65-66页 |
| 3.2. COPD全血样本统计 | 第66-67页 |
| 3.3. A549细胞培养及DNA提取 | 第67-68页 |
| 3.4. 全血样本DNA提取 | 第68-69页 |
| 3.5. APC/PCDH20/RUNX3克隆及阳性鉴定结果 | 第69-72页 |
| 3.6. APC在肺癌和COPD样本中的检测 | 第72-75页 |
| 3.6.1 APC的甲基化水平 | 第72-74页 |
| 3.6.2 APC的非甲基化水平 | 第74-75页 |
| 3.6.3 APC的甲基化比值 | 第75页 |
| 3.7. PCDH20在肺癌和COPD样本中的检测 | 第75-78页 |
| 3.7.1. PCDH20的甲基化水平 | 第75-76页 |
| 3.7.2. PCDH20的非甲基化水平 | 第76-78页 |
| 3.7.3. PCDH20的甲基化比值 | 第78页 |
| 3.8. RUNX3在肺癌和COPD样本中的检测 | 第78-81页 |
| 3.8.1. RUNX3甲基化水平 | 第78-79页 |
| 3.8.2. RUNX3的非甲基化水平 | 第79-80页 |
| 3.8.3. RUNX3的甲基化比值 | 第80-81页 |
| 3.9. APC/PCDH20/RUNX3组间比较 | 第81-82页 |
| 3.10. APC/PCDH20/RUNX3间的相关性分析 | 第82页 |
| 3.11. COPD严重程度与APC/PCDH20/RUNX3 | 第82-84页 |
| 3.11.1. COPD的分级 | 第82-83页 |
| 3.11.2. FEV1与FEVUFVC | 第83-84页 |
| 3.12. 肺癌分期与APC/PCDH20/RUNX3 | 第84页 |
| 3.13. 吸烟与APC/PCDH20/RUNX3 | 第84-85页 |
| 3.14. 性别与APC/PCDH20/RUNX3 | 第85-87页 |
| 第四章 总结 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文 | 第99页 |
