| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 兴安落叶松 | 第11-12页 |
| 1.1.1 形态特征 | 第11页 |
| 1.1.2 生长环境与分布范围 | 第11页 |
| 1.1.3 研究现状 | 第11-12页 |
| 1.2 几丁质酶 | 第12-17页 |
| 1.2.1 几丁质酶参与植物体内的新陈代谢 | 第12-13页 |
| 1.2.2 几丁质酶研究进展 | 第13-17页 |
| 1.3 低温胁迫与植物耐寒机制 | 第17-18页 |
| 1.3.1 低温对植物的伤害 | 第17页 |
| 1.3.2 植物的抗冻性 | 第17-18页 |
| 1.3.3 冷害机制与植物抗冻性的生理指标 | 第18页 |
| 1.4 研究意义及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第18-19页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 几丁质酶基因cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第20-31页 |
| 2.1 材料和方法 | 第20-23页 |
| 2.1.1 植物材料及培养 | 第20页 |
| 2.1.2 实验试剂及其配制 | 第20-21页 |
| 2.1.3 利用RT-PCR技术克隆兴安落叶松LgChi基因片段 | 第21-23页 |
| 2.1.4 兴安落叶松几丁质酶基因的生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.1.5 兴安落叶松几丁质酶的系统进化分析 | 第23页 |
| 2.1.6 兴安落叶松几丁质酶基因DNA全长的克隆 | 第23页 |
| 2.2 结果和分析 | 第23-29页 |
| 2.2.1 LgChi2基因cDNA全长的克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.2 LgChi2基因DNA全长的克隆 | 第24页 |
| 2.2.3 兴安落叶松几丁质酶基因LgChi1/2的序列分析 | 第24-26页 |
| 2.2.4 兴安落叶松几丁质酶基因的生物信息学分析 | 第26-28页 |
| 2.2.5 LgChi1/2系统进化分析 | 第28-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 兴安落叶松几丁质酶基因的表达特性分析 | 第31-41页 |
| 3.1 材料和方法 | 第31-35页 |
| 3.1.1 半定量RT-PCR分析 | 第31页 |
| 3.1.2 低温胁迫兴安落叶松几丁质酶活性测定 | 第31-32页 |
| 3.1.3 兴安落叶松几丁质酶的亚细胞定位分析 | 第32-35页 |
| 3.2 结果和分析 | 第35-39页 |
| 3.2.1 LgChi表达特性分析 | 第35-36页 |
| 3.2.2 低温处理对兴安落叶松几丁质酶活性影响 | 第36-37页 |
| 3.2.3 兴安落叶松几丁质酶基因的亚细胞定位分析 | 第37-39页 |
| 3.3 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 兴安落叶松几丁质酶基因LgChi1/2的原核表达分析 | 第41-48页 |
| 4.1 材料和方法 | 第41-44页 |
| 4.1.1 菌种和质粒 | 第41页 |
| 4.1.2 实验试剂及配制 | 第41-42页 |
| 4.1.3 原核表达载体构建 | 第42-43页 |
| 4.1.4 融合蛋白诱导表达 | 第43-44页 |
| 4.1.5 低温胁迫转基因大肠杆菌 | 第44页 |
| 4.2 结果和分析 | 第44-47页 |
| 4.2.1 兴安落叶松几丁质酶基因LgChi1/2原核表达载体构建 | 第44-46页 |
| 4.2.2 LgChi1和LgChi2融合蛋白的诱导 | 第46页 |
| 4.2.3 LgChi基因表达影响大肠杆菌在低温胁迫下的存活率 | 第46-47页 |
| 4.3 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 兴安落叶松几丁质酶基因LgChi1/2在拟南芥中的异源表达 | 第48-61页 |
| 5.1 材料和方法 | 第48-54页 |
| 5.1.1 pBI101-LgChi重组表达载体的构建 | 第48-51页 |
| 5.1.2 拟南芥的遗传转化、筛选、鉴定 | 第51-52页 |
| 5.1.3 转基因拟南芥的表型分析及抗氧化物酶酶活性测定 | 第52-54页 |
| 5.2 结果和分析 | 第54-59页 |
| 5.2.1 pBI101-LgChi1/2重组表达载体的构建 | 第54-56页 |
| 5.2.2 拟南芥的遗传转化、筛选、鉴定 | 第56-57页 |
| 5.2.3 转基因拟南芥的表型分析和抗氧化物酶活性测定 | 第57-59页 |
| 5.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
