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分枝硫醇合成相关糖基转移酶和磷酸酶的研究及肽连接酶Butelasel的异源表达

摘要第13-18页
Abstract第18-23页
缩写词表第24-27页
第一章 前言第27-48页
    1.1 糖类合成及其结构解析第27-30页
        1.1.1 糖类合成第27-28页
        1.1.2 糖类化合物的核磁共振结构解析第28-30页
    1.2 糖基转移酶第30-35页
        1.2.1 糖基转移酶第30-34页
        1.2.2 糖基转移酶在合成糖类化合物中的应用第34-35页
    1.3 Mycothiol合成研究现状第35-45页
        1.3.1 Mycothiol的结构、功能及其分布第35-37页
        1.3.2 MSH生物合成第37-43页
        1.3.3 MSH的化学合成第43页
        1.3.4 靶向MSH生物合成的抑制剂第43-45页
    1.4 肽连接酶Butelasel第45-46页
    1.5 本论文的研究内容及意义第46-48页
第二章 糖基转移酶CdMshA酶学性质研究第48-73页
    2.1 材料与方法第49-57页
        2.1.1 主要试剂与仪器第49-50页
        2.1.2 菌株和质粒第50页
        2.1.3 培养基和培养条件第50-51页
        2.1.4 DNA操作技术第51页
        2.1.5 C.diphtheriae 31A来源的CdMshA表达第51-53页
        2.1.6 糖基转移酶CdMshA活性分析第53-57页
    2.2 结果第57-70页
        2.2.1 C.diphtheriae 31A来源的CdMshA表达第57-60页
        2.2.2 糖基转移酶CdMshA活性分析第60-70页
    2.3 讨论第70-71页
    2.4 本章小结第71-73页
第三章 C. glutaimicum来源的磷酸酶的筛选第73-93页
    3.1 材料和方法第74-78页
        3.1.1 主要试剂和仪器第74页
        3.1.2 菌种和质粒第74页
        3.1.3 培养基和培养条件第74页
        3.1.4 DNA操作技术第74页
        3.1.5 C.glutamicum来源的肌醇单磷酸酶Imp的克隆和表达第74-78页
    3.2 结果第78-91页
        3.2.1 C.glutamicum来源的Imp基因的克隆第78-80页
        3.2.2 C.glutamicum来源的肌醇单磷酸酶的表达和纯化第80-89页
        3.2.3 具有GlcNAc-Ins-3-P磷酸酶活性的重组酶筛选第89-91页
    3.3 讨论第91-92页
    3.4 本章小结第92-93页
第四章 磷酸酶ImpC酶活性研究第93-103页
    4.1 材料和方法第93-96页
        4.1.1 主要仪器和试剂第93页
        4.1.2 菌株和质粒第93页
        4.1.3 磷酸酶ImpC的酶学性质第93-95页
        4.1.4 ImpC的定点突变第95-96页
    4.2 结果第96-101页
        4.2.1 ImpC的酶学性质第96-99页
        4.2.2 ImpC的定点突变第99-101页
    4.3 讨论第101-102页
    4.4 本章小结第102-103页
第五章 Butelase 1表达和纯化第103-116页
    5.1 材料和方法第104-108页
        5.1.1 仪器和试剂第104页
        5.1.2 菌株和培养条件第104页
        5.1.3 btl1大肠杆菌重组表达载体的构建和诱导表达第104-107页
        5.1.4 Btl1毕赤酵母表达载体的构建及蛋白表达纯化第107-108页
        5.1.5 重组Btl1酶活性检测第108页
    5.2 结果第108-115页
        5.2.1 重组Btl1在大肠杆菌内的表达第108-113页
        5.2.2 重组Btl1毕赤酵母细胞表达第113-115页
        5.2.3 重组Btl1酶活检测第115页
    5.3 讨论第115页
    5.4 本章小结第115-116页
全文总结与展望第116-118页
参考文献第118-128页
攻读博士学位期间取得的学术成果第128-129页
致谢第129-130页
学位论文评阅及答辩情况表第130页

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