| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 附录 | 第7-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 间变性大细胞淋巴瘤简介 | 第11-12页 |
| 1.1.1 ALK~- ALCL | 第11页 |
| 1.1.2 ALK~+ ALCL | 第11页 |
| 1.1.3 原发性皮肤ALCL(pcALCL) | 第11-12页 |
| 1.2 NPM-ALK蛋白简介 | 第12-14页 |
| 1.2.1 ALK蛋白 | 第12页 |
| 1.2.2 NPM-ALK融合蛋白 | 第12-14页 |
| 1.3 NPM-ALK下游相关分子 | 第14-18页 |
| 1.3.1 Ras/Erk途径 | 第14-16页 |
| 1.3.2 PI3K途径 | 第16页 |
| 1.3.3 Jak/STAT途径 | 第16-18页 |
| 1.3.4 IGF-1R途径 | 第18页 |
| 1.4 ALK~+ ALCL的研究现状 | 第18-20页 |
| 1.5 细胞周期与相关调控分子 | 第20-21页 |
| 1.6 三氟拉嗪(Trifluoperazine,TFP) | 第21-24页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第24-40页 |
| 2.1 主要试剂的配制 | 第24-26页 |
| 2.1.1 细胞培养相关试剂的配制 | 第24页 |
| 2.1.2 RT-PCR相关试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.1.3 Western Blot相关试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.1.4 三氟拉嗪(TFP)溶液的配制 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.2.2 人外周血单核细胞(PBMCs)的分离 | 第27-28页 |
| 2.2.3 细胞毒性的测定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第29-30页 |
| 2.2.5 细胞周期的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第31页 |
| 2.2.7 罗丹明123检测细胞线粒体膜电位 | 第31页 |
| 2.2.8 反转录PCR(RT-PCR)与实时荧光定量PCR(Real-Time PCR) | 第31-35页 |
| 2.2.9 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第35-40页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第40-55页 |
| 3.1 NPM-ALK的Tyr 644和664双点突变引起细胞S期阻滞 | 第40-41页 |
| 3.1.1 荧光检测与转染效率评估 | 第40页 |
| 3.1.2 双点突变的NPM-ALK引起293T和Jurkat细胞S期阻滞 | 第40-41页 |
| 3.2 三氟拉嗪(TFP)对稳定细胞系的杀伤作用 | 第41-42页 |
| 3.3 TFP对ALK~+ ALCL细胞以及正常淋巴细胞的影响 | 第42-43页 |
| 3.4 TFP对ALK~+ ALCL细胞的杀伤机制 | 第43-51页 |
| 3.4.1 TFP引起ALK~+ ALCL细胞凋亡和G_0/G_1期阻滞 | 第43-44页 |
| 3.4.2 TFP对NPM-ALK蛋白的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.3 TFP对ALK~+ ALCL细胞线粒体膜电位的影响 | 第45页 |
| 3.4.4 RT-PCR检测周期相关基因的表达水平 | 第45-47页 |
| 3.4.5 Real-Time PCR检测周期相关基因的表达水平 | 第47-48页 |
| 3.4.6 Western Blot检测相关蛋白的表达量变化 | 第48-51页 |
| 3.5 讨论 | 第51-55页 |
| 第4章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-69页 |
| 硕士研究生阶段发表的论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
