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利用酵母双杂交方法筛选转录因子OsDREBA5-1的互作蛋白

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第11-20页
    1.1 DREB转录因子研究现状第11-12页
    1.2 水稻叶倾角调控分子机制的研究进展第12-17页
        1.2.1 BR调控途径第12-14页
        1.2.2 IAA调控途径第14-15页
        1.2.3 GA调控途径第15-16页
        1.2.4 其他调控途径第16-17页
    1.3 酵母双杂交技术第17-18页
        1.3.1 酵母双杂交系统的原理第17-18页
        1.3.2 酵母双杂交系统的优势与缺陷第18页
    1.4 研究的目的与意义第18-20页
第二章 研究材料和方法第20-30页
    2.1 实验材料第20-21页
        2.1.1 供试材料第20页
        2.1.2 主要试剂第20页
        2.1.3 实验仪器第20页
        2.1.4 主要试剂和培养基的配制第20-21页
    2.2 实验方法第21-30页
        2.2.1 转录因子OsDREBA5-1 CDS区PCR扩增第21-22页
        2.2.2 诱饵表达载体的构建第22-25页
        2.2.3 pGBKT7-OsDREBA5-1转化酵母及毒性、自激活检测第25-27页
        2.2.4 AbA~r抗性浓度的筛选第27页
        2.2.5 与诱饵蛋白相互作用猎物蛋白的杂交筛选第27页
        2.2.6 阳性克隆的筛选及X-α-gal显色反应第27-28页
        2.2.7 酵母质粒的提取第28页
        2.2.8 酵母质粒PCR第28页
        2.2.9 酵母质粒在感受态大肠杆菌DH5α中的转化第28-29页
        2.2.10 阳性克隆的回转验证第29页
        2.2.11 阳性克隆的生物信息学分析第29-30页
第三章 结果与讨论第30-49页
    3.1 结果第30-47页
        3.1.1 OsDREBA5-1 CDS区的扩增和诱饵载体pGBKT7-OsDREBA5-1的构建第30页
        3.1.2 融合表达载体pGBKT7-OsDREBA5-1、pGBKT7-f1、pGBKT7-f2、pGBKT7-f3、pGBKT7-f4、pGBKT7-f5、pGBKT7-f6的构建第30-31页
        3.1.3 重组诱饵质粒的毒性以及自激活检测第31-32页
        3.1.4 AbA~r抗性浓度的筛选第32-33页
        3.1.5 酵母双杂交镜检结果第33页
        3.1.6 筛选与诱饵蛋白pGBKT7-f2相互作用的蛋白第33-34页
        3.1.7 阳性克隆文库质粒PCR扩增第34-35页
        3.1.8 阳性克隆回转验证第35页
        3.1.9 阳性克隆的生物信息学分析第35-47页
    3.2 讨论第47-49页
第四章 全文总结及下一步计划第49-51页
    4.1 结论第49-50页
    4.2 下一步工作计划第50-51页
参考文献第51-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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