| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第17-39页 |
| 1.1 胰腺癌简介 | 第17-20页 |
| 1.1.1 癌基因的RAS激活途径 | 第17-19页 |
| 1.1.2 致癌的RAS蛋白与巨胞饮的关系 | 第19-20页 |
| 1.2 纳米给药载体简介 | 第20-23页 |
| 1.2.1 介孔二氧化硅纳米颗粒 | 第21-22页 |
| 1.2.2 碳纳米管 | 第22-23页 |
| 1.3 细胞内吞的研究现状 | 第23-28页 |
| 1.3.1 细胞内吞的分类 | 第24页 |
| 1.3.2 经典的网格蛋白依赖的内吞 | 第24-25页 |
| 1.3.3 非网格蛋白依赖的内吞 | 第25-26页 |
| 1.3.4 非网格蛋白非小窝介导的内吞 | 第26-27页 |
| 1.3.5 巨胞饮介导的内吞 | 第27-28页 |
| 1.4 巨胞饮体形成的机理 | 第28-31页 |
| 1.5 细胞成像的研究现状 | 第31-37页 |
| 1.5.1 转运和信号转导的细胞成像 | 第31-32页 |
| 1.5.2 单分子追踪技术 | 第32-33页 |
| 1.5.3 荧光相关光谱 | 第33页 |
| 1.5.4 纳米成像技术 | 第33-37页 |
| 1.6 本论文的主要研究目标及研究内容 | 第37-39页 |
| 第二章 rHSA蛋白的构建及表达纯化 | 第39-57页 |
| 2.1 实验仪器、实验试剂及试剂配制 | 第39-45页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第40-41页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第41-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-53页 |
| 2.2.1 表达载体构建 | 第45-52页 |
| 2.2.2 r HSA的荧光标记 | 第52-53页 |
| 2.3 实验结果 | 第53-55页 |
| 2.3.1 PCR产物的胶回收纯化鉴定 | 第53页 |
| 2.3.2 重组质粒鉴定结果 | 第53-54页 |
| 2.3.3 摇瓶培养甲醇诱导阶段SDS-PAGE检测结果 | 第54页 |
| 2.3.4 摇瓶培养甲醇诱导阶段Western blotting鉴定结果 | 第54-55页 |
| 2.3.5 r HSA与红色荧光蛋白连接结果 | 第55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-57页 |
| 第三章 巨胞饮结构的确定以及产生的位置和结构特点 | 第57-71页 |
| 3.1 实验仪器、实验试剂及试剂配制 | 第57-60页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第57-58页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第58-59页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第59-60页 |
| 3.2 实验方法 | 第60-61页 |
| 3.2.1 细胞培养及处理 | 第60页 |
| 3.2.2 巨胞饮的验证 | 第60-61页 |
| 3.2.3 对于“杯”状结构的统计分析 | 第61页 |
| 3.3 实验结果 | 第61-69页 |
| 3.3.1 超高分辨率显微镜观察细胞表面变化 | 第61-64页 |
| 3.3.2“杯”状结构与巨胞饮标志物的共定位 | 第64-66页 |
| 3.3.3 巨胞饮在细胞表面的分布 | 第66页 |
| 3.3.4 巨胞饮结构的直径和深度分布 | 第66-67页 |
| 3.3.5 完整巨胞饮结构的观察 | 第67-68页 |
| 3.3.6 不同巨胞饮结构在膜内外分布的比例 | 第68页 |
| 3.3.7 细胞表面巨胞饮“杯”状结构观察 | 第68-69页 |
| 3.4 讨论 | 第69-71页 |
| 第四章 巨胞饮组成的分析以及细胞骨架的变化 | 第71-87页 |
| 4.1 实验仪器和试剂配制 | 第71-75页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第71-72页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第72-73页 |
| 4.1.3 试剂配制 | 第73-75页 |
| 4.2 实验方法 | 第75-79页 |
| 4.2.1 细胞培养及处理 | 第75页 |
| 4.2.2 质粒的扩增 | 第75-76页 |
| 4.2.3 细胞瞬时转染 | 第76-77页 |
| 4.2.4 对已转染的细胞做染膜处理 | 第77页 |
| 4.2.5 3D-SIM超高分辨率显微镜拍摄以及i Maris软件对细胞的分析 | 第77页 |
| 4.2.6 电镜样品准备 | 第77-78页 |
| 4.2.7 免疫荧光 | 第78页 |
| 4.2.8 细胞表面“杯”状结构的动态观察 | 第78-79页 |
| 4.3 实验结果 | 第79-85页 |
| 4.3.1 通过对板状伪足的观察分析微丝与膜的位置关系 | 第79-80页 |
| 4.3.2 膜皱褶中的微丝和膜成分 | 第80-81页 |
| 4.3.3 巨胞饮“杯”状结构中微丝和膜成分的位置关系 | 第81-82页 |
| 4.3.4 i Maris软件的拟合后的巨胞饮“杯”状结构 | 第82-83页 |
| 4.3.5 初步观察巨胞饮产生时微丝的变化 | 第83-84页 |
| 4.3.6 r HSA刺激产生巨胞饮的动态变化 | 第84页 |
| 4.3.7 r HSA作用后细胞微丝随时间的变化 | 第84-85页 |
| 4.3.8 微管的动态变化 | 第85页 |
| 4.4 讨论 | 第85-87页 |
| 第五章 介孔二氧化硅抗肿瘤药物载体入胞特征分析 | 第87-101页 |
| 5.1 实验仪器、实验试剂和试剂配制 | 第87-90页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第87-88页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第88-89页 |
| 5.1.3 试剂配制 | 第89-90页 |
| 5.2 实验方法 | 第90-91页 |
| 5.2.1 细胞培养及处理 | 第90页 |
| 5.2.2 纳米颗粒入胞 | 第90-91页 |
| 5.2.3 3D-SIM超高分辨率显微镜拍摄 | 第91页 |
| 5.3 实验结果 | 第91-97页 |
| 5.3.1 碳纳米管入胞 | 第91-93页 |
| 5.3.2 介孔二氧化硅入胞 | 第93-97页 |
| 5.4 讨论 | 第97-99页 |
| 第六章 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 攻读博士期间所取得的科研成果 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
