| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 缩略词表 | 第12-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-40页 |
| ·雄性生殖干细胞(male germ line stem cells) | 第16-26页 |
| ·雄性生殖细胞的起源 | 第18页 |
| ·调控雄性生殖细胞形成的信号分子 | 第18-24页 |
| ·调控生殖细胞形成的信号通路 | 第24-26页 |
| ·JAK-STAT信号通路 | 第26-29页 |
| ·JAK-STAT信号通路构成 | 第26-27页 |
| ·JAK-STAT信号通路功能 | 第27-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| ·参考文献 | 第31-40页 |
| 第二章 基于RNA-Seq结果的JAK-STAT信号通路筛选 | 第40-60页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·实验材料与试剂 | 第40-41页 |
| ·主要仪器和设备 | 第41页 |
| ·细胞分离、培养及鉴定 | 第41-42页 |
| ·流式细胞分选 | 第42-43页 |
| ·分选细胞的培养 | 第43页 |
| ·总RNA提取和纯化 | 第43页 |
| ·鸡全基因组表达谱芯片检测 | 第43页 |
| ·Quantitative Real Time PCR(qRT—PCR)验证 | 第43-44页 |
| ·数据分析 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-56页 |
| ·ESCs-male,PGCs-male与SSCs差异基因及信号通路的筛选 | 第45页 |
| ·JAK-STAT信号通路动态分析 | 第45-51页 |
| ·qRT-PCR验证JAK-STAT信号通路上关键基因的表达趋势 | 第51-53页 |
| ·JAK/STAT信号通路关联性分析 | 第53-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·参考文献 | 第58-60页 |
| 第三章 悬滴培养法促进鸡胚胎干细胞形成类胚体 | 第60-73页 |
| ·材料与方法 | 第60-63页 |
| ·试验材料与试剂 | 第60-61页 |
| ·主要仪器和设备 | 第61页 |
| ·鸡ESCs的分离培养及鉴定 | 第61页 |
| ·悬滴培养鸡ESCs | 第61页 |
| ·EB形态观察及数量统计 | 第61-62页 |
| ·qRT-PCR检测 | 第62页 |
| ·免疫细胞化学检测 | 第62页 |
| ·核型分析 | 第62页 |
| ·数据分析 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-69页 |
| ·鸡ESCs的特异性鉴定 | 第63页 |
| ·悬滴培养制备类胚体 | 第63-65页 |
| ·悬滴培养过程中相关干性性基因的qRT-PCR检测 | 第65-67页 |
| ·免疫细胞化学检测特异性标记物的表达 | 第67页 |
| ·类胚体自发分化验证 | 第67-68页 |
| ·类胚体细胞核型分析 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·结论 | 第70页 |
| ·参考文献 | 第70-73页 |
| 第四章 不同诱导剂对鸡ESCs诱导分化作用的比较 | 第73-87页 |
| ·材料和方法 | 第74-76页 |
| ·试验材料 | 第74页 |
| ·主要仪器和设备 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74-75页 |
| ·鸡ESCs的分离培养及性别鉴定 | 第75页 |
| ·鸡ESCs体外诱导分化 | 第75页 |
| ·Quantitative Real Time PCR(qRT-PCR)检测 | 第75页 |
| ·免疫细胞化学检测 | 第75页 |
| ·数据分析 | 第75-76页 |
| ·结果 | 第76-83页 |
| ·鸡ESCs的特异性鉴定 | 第76-77页 |
| ·不同诱导剂处理后细胞形态学变化 | 第77-78页 |
| ·荧光定量PCR检测不同诱导剂处理后基因变化 | 第78-80页 |
| ·细胞免疫化学检测 | 第80-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·结论 | 第84-85页 |
| ·参考文献 | 第85-87页 |
| 第五章 JAK-STAT信号通路在鸡雄性生殖细胞体内分化过程中的作用 | 第87-107页 |
| ·材料和方法 | 第87-90页 |
| ·试验材料 | 第87页 |
| ·主要仪器和设备 | 第87-88页 |
| ·主要试剂 | 第88页 |
| ·种蛋注射及试验分组 | 第88-89页 |
| ·信号通路关键基因检测 | 第89页 |
| ·鸡雄性生殖细胞体内分化检测 | 第89-90页 |
| ·数据分析 | 第90页 |
| ·结果 | 第90-101页 |
| ·JAK-STAT信号通路关键基因的动态表达 | 第91-92页 |
| ·生殖细胞标记基因的动态表达 | 第92-93页 |
| ·PAS染色检测PGCs形成 | 第93-96页 |
| ·免疫组化染色检测PGCs形成 | 第96-99页 |
| ·流式细胞分选检测生殖细胞标记率 | 第99-101页 |
| ·讨论 | 第101-103页 |
| ·结论 | 第103-104页 |
| ·参考文献 | 第104-107页 |
| 第六章 JAK-STAT信号通路在体外诱导鸡雄性生殖细胞形成过程的作用 | 第107-125页 |
| ·材料与方法 | 第108-110页 |
| ·实验材料 | 第108页 |
| ·主要仪器和设备 | 第108页 |
| ·主要试剂 | 第108-109页 |
| ·雄性鸡ESCs的分离培养、鉴定 | 第109页 |
| ·细胞增殖试验 | 第109页 |
| ·鸡ESCs体外诱导分化试验 | 第109-110页 |
| ·Quantitative Real Time PCR(qRT-PCR)检测 | 第110页 |
| ·免疫细胞化学检测 | 第110页 |
| ·数据分析 | 第110页 |
| ·结果 | 第110-120页 |
| ·鸡雄性ESCs的分离及培养 | 第110页 |
| ·不同浓度Cucurbitacin Ⅰ和IL6对ESCs增殖的影响 | 第110-112页 |
| ·不同诱导组诱导后细胞形态学变化 | 第112-114页 |
| ·不同诱导组JAK-STAT信号通路关键基因动态变化 | 第114-115页 |
| ·不同诱导组生殖标记基因动态变化 | 第115-117页 |
| ·免疫细胞化学检测 | 第117-120页 |
| ·讨论 | 第120-122页 |
| ·结论 | 第122-123页 |
| ·参考文献 | 第123-125页 |
| 第七章 结论和创新点 | 第125-127页 |
| 结论 | 第125-126页 |
| 创新点 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 博士期间发表的论文 | 第128-130页 |
