修饰庆大霉素寡糖基因的研究

摘要	第1-4页
Abstract	第4-9页
英文缩写词及注解	第9-10页
第一章 引言	第10-27页
·氨基寡糖类抗生素简介	第10-13页
·氨基寡糖生物合成基因研究进展	第13-19页
·2-脱氧链霉胺生物合成途径及其催化酶	第15-17页
·合成新霉素的相关基因	第17-18页
·合成卡那霉素的相关基因	第18页
·合成福提霉素的相关基因	第18-19页
·庆大霉素及其生物合成基因	第19-26页
·庆大霉素结构与组分	第19-20页
·庆大霉素抗菌作用机制	第20-21页
·庆大霉素钝化酶	第21页
·庆大霉素生物合成基因研究进展	第21-26页
·选题依据和研究内容	第26-27页
·选题依据	第26页
·研究内容	第26-27页
第二章 材料和方法	第27-42页
·实验材料	第27-32页
·菌株与质粒	第27-28页
·培养基	第28-29页
·试剂	第29-31页
·主要试剂和工具酶	第29页
·主要溶液与缓冲液	第29-31页
·抗生素	第31页
·仪器和设备	第31-32页
·实验方法	第32-42页
·碱裂解法提取小量大肠杆菌质粒	第32页
·大肠杆菌感受态细胞制备及转化	第32-33页
·DNA酶切	第33页
·PCR扩增反应	第33-34页
·PCR反应体系	第33-34页
·PCR反应程序	第34页
·DNA片段胶回收	第34-35页
·单酶切DNA片段去磷酸化	第35-36页
·酶连	第36页
·绛红小单孢菌基因组DNA提取	第36-37页
·DNA琼脂糖胶电泳	第37页
·大肠杆菌与绛红小单孢菌的接合转移	第37-38页
·绛红小单孢菌摇瓶发酵	第38页
·庆大霉素生物效价测定	第38-39页
·代谢产物提取	第39页
·代谢产物分析	第39-40页
·TLC分析法	第39-40页
·质谱分析法	第40页
·HPLC分析法	第40页
·沙土管制备	第40-41页
·菌种保藏	第41-42页
第三章 genQ基因功能的研究	第42-51页
·重组质粒pQB303的构建	第42-46页
·绛红小单孢菌G1008基因组的提取	第43页
·基因genQ同源交换臂的PCR扩增	第43-44页
·质粒pQB303的构建及验证	第44-46页
·接合转移和单交换工程菌的验证	第46-47页
·genQ阻断突变株的筛选	第47-48页
·绛红小单孢菌GQ175的发酵及代谢产物分析	第48-49页
·结果与讨论	第49-51页
第四章 genB2基因功能的研究	第51-60页
·重组质粒pZB303的构建	第51-54页
·基因genB2的同源交换臂的扩增	第51-53页
·质粒pZB303的构建及验证	第53-54页
·基因genB2阻断工程菌构建	第54-56页
·单交换菌株的筛选	第54-55页
·genB2阻断突变的筛选	第55-56页
·绛红小单孢菌GB102的发酵及代谢产物分析	第56-58页
·GB102的代谢产物TLC和HPLC分析	第56-57页
·GB102的代谢产物MS分析	第57-58页
·结果与讨论	第58-60页
第五章 genD2基因功能的研究	第60-67页
·重组质粒pDB303的构建	第60-63页
·基因genD2同源交换臂的扩增	第60-61页
·质粒pDB303的构建和验证	第61-63页
·基因genD2阻断工程菌的构建	第63-64页
·基因genD2失活单交换工程菌的构建	第63-64页
·genD2阻断突变株的筛选	第64页
·GD238的发酵及代谢产物分析	第64-65页
·结果与讨论	第65-67页
第六章 庆大霉素A2e合成基因的研究	第67-72页
·敲除genK基因工程菌的构建	第67-70页
·同源重组质粒pFD308的验证	第67页
·单交换工程菌的构建	第67-69页
·敲除genK基因工程菌的筛选	第69-70页
·GDK3的发酵及其代谢产物分析	第70页
·结果与讨论	第70-72页
全文总结	第72-74页
参考文献	第74-80页
致谢	第80-81页
附录	第81-83页
个人简历	第83页