修饰庆大霉素寡糖基因的研究
摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
英文缩写词及注解 | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-27页 |
·氨基寡糖类抗生素简介 | 第10-13页 |
·氨基寡糖生物合成基因研究进展 | 第13-19页 |
·2-脱氧链霉胺生物合成途径及其催化酶 | 第15-17页 |
·合成新霉素的相关基因 | 第17-18页 |
·合成卡那霉素的相关基因 | 第18页 |
·合成福提霉素的相关基因 | 第18-19页 |
·庆大霉素及其生物合成基因 | 第19-26页 |
·庆大霉素结构与组分 | 第19-20页 |
·庆大霉素抗菌作用机制 | 第20-21页 |
·庆大霉素钝化酶 | 第21页 |
·庆大霉素生物合成基因研究进展 | 第21-26页 |
·选题依据和研究内容 | 第26-27页 |
·选题依据 | 第26页 |
·研究内容 | 第26-27页 |
第二章 材料和方法 | 第27-42页 |
·实验材料 | 第27-32页 |
·菌株与质粒 | 第27-28页 |
·培养基 | 第28-29页 |
·试剂 | 第29-31页 |
·主要试剂和工具酶 | 第29页 |
·主要溶液与缓冲液 | 第29-31页 |
·抗生素 | 第31页 |
·仪器和设备 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-42页 |
·碱裂解法提取小量大肠杆菌质粒 | 第32页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第32-33页 |
·DNA酶切 | 第33页 |
·PCR扩增反应 | 第33-34页 |
·PCR反应体系 | 第33-34页 |
·PCR反应程序 | 第34页 |
·DNA片段胶回收 | 第34-35页 |
·单酶切DNA片段去磷酸化 | 第35-36页 |
·酶连 | 第36页 |
·绛红小单孢菌基因组DNA提取 | 第36-37页 |
·DNA琼脂糖胶电泳 | 第37页 |
·大肠杆菌与绛红小单孢菌的接合转移 | 第37-38页 |
·绛红小单孢菌摇瓶发酵 | 第38页 |
·庆大霉素生物效价测定 | 第38-39页 |
·代谢产物提取 | 第39页 |
·代谢产物分析 | 第39-40页 |
·TLC分析法 | 第39-40页 |
·质谱分析法 | 第40页 |
·HPLC分析法 | 第40页 |
·沙土管制备 | 第40-41页 |
·菌种保藏 | 第41-42页 |
第三章 genQ基因功能的研究 | 第42-51页 |
·重组质粒pQB303的构建 | 第42-46页 |
·绛红小单孢菌G1008基因组的提取 | 第43页 |
·基因genQ同源交换臂的PCR扩增 | 第43-44页 |
·质粒pQB303的构建及验证 | 第44-46页 |
·接合转移和单交换工程菌的验证 | 第46-47页 |
·genQ阻断突变株的筛选 | 第47-48页 |
·绛红小单孢菌GQ175的发酵及代谢产物分析 | 第48-49页 |
·结果与讨论 | 第49-51页 |
第四章 genB2基因功能的研究 | 第51-60页 |
·重组质粒pZB303的构建 | 第51-54页 |
·基因genB2的同源交换臂的扩增 | 第51-53页 |
·质粒pZB303的构建及验证 | 第53-54页 |
·基因genB2阻断工程菌构建 | 第54-56页 |
·单交换菌株的筛选 | 第54-55页 |
·genB2阻断突变的筛选 | 第55-56页 |
·绛红小单孢菌GB102的发酵及代谢产物分析 | 第56-58页 |
·GB102的代谢产物TLC和HPLC分析 | 第56-57页 |
·GB102的代谢产物MS分析 | 第57-58页 |
·结果与讨论 | 第58-60页 |
第五章 genD2基因功能的研究 | 第60-67页 |
·重组质粒pDB303的构建 | 第60-63页 |
·基因genD2同源交换臂的扩增 | 第60-61页 |
·质粒pDB303的构建和验证 | 第61-63页 |
·基因genD2阻断工程菌的构建 | 第63-64页 |
·基因genD2失活单交换工程菌的构建 | 第63-64页 |
·genD2阻断突变株的筛选 | 第64页 |
·GD238的发酵及代谢产物分析 | 第64-65页 |
·结果与讨论 | 第65-67页 |
第六章 庆大霉素A2e合成基因的研究 | 第67-72页 |
·敲除genK基因工程菌的构建 | 第67-70页 |
·同源重组质粒pFD308的验证 | 第67页 |
·单交换工程菌的构建 | 第67-69页 |
·敲除genK基因工程菌的筛选 | 第69-70页 |
·GDK3的发酵及其代谢产物分析 | 第70页 |
·结果与讨论 | 第70-72页 |
全文总结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
附录 | 第81-83页 |
个人简历 | 第83页 |