HepG2细胞中p53的保护性调节机理研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-19页 |
| ·p53研究进展 | 第8-11页 |
| ·p53基因概述 | 第8页 |
| ·p53蛋白作用的分子机制 | 第8-9页 |
| ·p53-MDM2环路 | 第9-10页 |
| ·p53与肿瘤治疗及预后 | 第10-11页 |
| ·细胞自噬研究进展 | 第11-13页 |
| ·自噬的分类 | 第11页 |
| ·自噬对肿瘤生长的影响 | 第11-12页 |
| ·p53蛋白对自噬的调节作用 | 第12-13页 |
| ·细胞凋亡研究进展 | 第13-16页 |
| ·细胞凋亡的主要途径 | 第13-15页 |
| ·p53蛋白对凋亡的调控 | 第15-16页 |
| ·线粒体研究进展 | 第16-18页 |
| ·线粒体基因组 | 第16-17页 |
| ·线粒体膜电位与细胞凋亡 | 第17-18页 |
| ·本课题主要研究内容及创新之处 | 第18-19页 |
| ·主要研究内容 | 第18页 |
| ·课题创新之处 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-36页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| ·常用溶液配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-36页 |
| ·重组质粒构建 | 第22-27页 |
| ·细胞培养 | 第27-28页 |
| ·稳定转染细胞株构建 | 第28-29页 |
| ·细胞免疫荧光、DAB染色 | 第29-30页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第30页 |
| ·实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第30-31页 |
| ·蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第31-34页 |
| ·软琼脂克隆形成实验 | 第34-35页 |
| ·WST-8细胞活力检测 | 第35页 |
| ·线粒体膜电位染色 | 第35-36页 |
| 第三章 结果分析 | 第36-58页 |
| ·pcDNA-GFP-p53重组质粒构建 | 第36-38页 |
| ·获取p53基因片段与质粒构建 | 第36-37页 |
| ·重组质粒转化及验证 | 第37-38页 |
| ·p53过表达细胞株构建 | 第38-39页 |
| ·环境压力引起细胞质中p53蛋白水平增加 | 第39-41页 |
| ·环境压力下p53蛋白对HepG2细胞的保护作用 | 第41-49页 |
| ·调节细胞凋亡 | 第41-45页 |
| ·调节自噬诱导水平 | 第45-47页 |
| ·影响细胞增殖活力 | 第47-49页 |
| ·p53蛋白对线粒体基因mtND1的调控作用 | 第49-53页 |
| ·p53可结合线粒体基因mtND1 | 第49-51页 |
| ·p53对mtND1的调控作用 | 第51-53页 |
| ·mtND1过表达细胞株构建 | 第53-55页 |
| ·pcDNA-ND1重组质粒构建 | 第53-54页 |
| ·细胞株构建 | 第54-55页 |
| ·mtND1过表达对细胞的影响 | 第55-58页 |
| ·mtND1过表达引起细胞凋亡 | 第55页 |
| ·mtND1过表达抑制自噬基因转录 | 第55-56页 |
| ·mtND1过表达导致线粒体膜电位下降 | 第56-58页 |
| 第四章 结论与展望 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |
