| 摘要 | 第1-8页 |
| 方法 | 第6页 |
| 结果 | 第6-7页 |
| 结论 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-16页 |
| 1 前言 | 第11-12页 |
| 2 EGFR 过表达恶性肿瘤靶向治疗现状及靶向策略缺陷 | 第12-13页 |
| 3 抗 EGFR 单克隆抗体研发现状 | 第13-14页 |
| 4 EGFR 二聚体界面靶向策略 | 第14-15页 |
| 5 本课题的研究基础及内容 | 第15-16页 |
| 第二章 EGFR_267-297免疫抗原与检测抗原的制备与鉴定 | 第16-29页 |
| 1 前言 | 第16-17页 |
| 2 材料 | 第17-20页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·溶液的配制 | 第18-20页 |
| 3 方法 | 第20-23页 |
| ·抗原肽制备 | 第20-21页 |
| ·抗原肽非变性 SDS-PAGE 鉴定 | 第21页 |
| ·小鼠免疫及抗原肽免疫原性分析 | 第21-22页 |
| ·间接 ELISA 法优化 | 第22-23页 |
| 4 实验结果 | 第23-26页 |
| ·EGFR_267-297抗原肽构建 | 第23-24页 |
| ·EGFR_267-297抗原肽免疫原性 | 第24-25页 |
| ·间接 ELISA 法优化 | 第25-26页 |
| 5 讨论 | 第26-28页 |
| 6 小结 | 第28-29页 |
| 第三章 EGFR_267-297二聚化界面靶向单克隆抗体制备 | 第29-51页 |
| 1 前言 | 第29页 |
| 2 实验材料 | 第29-32页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要耗材及仪器 | 第30页 |
| ·溶液的配置 | 第30-32页 |
| ·细胞和动物 | 第32页 |
| 3 实验方法 | 第32-40页 |
| ·免疫小鼠及小鼠血清效价测定 | 第32-37页 |
| ·单克隆抗体的制备与纯化 | 第37-39页 |
| ·ELISA 法检测单抗的效价 | 第39-40页 |
| ·单抗亚类及轻链的鉴定 | 第40页 |
| ·亲和力常数的测定 | 第40页 |
| 4 结果 | 第40-49页 |
| ·小鼠抗 EGFR_267-297 血清效价 | 第40-41页 |
| ·建立单克隆杂交瘤细胞株 | 第41-44页 |
| ·EGFR_267-297mAb 制备与纯化 | 第44-46页 |
| ·间接 ELISA 法检测 EGFR_267-297mAb 的效价 | 第46-47页 |
| ·EGFR_267-297mAb 亲和力常数的测定 | 第47-48页 |
| ·EGFR_267-297mAb 单抗亚类及轻链的鉴定 | 第48-49页 |
| 5 讨论 | 第49-50页 |
| 6 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 EGFR 二聚体界面靶向单克隆抗体生物特性分析 | 第51-63页 |
| 1 前言 | 第51页 |
| 2 实验材料 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要耗材及仪器 | 第52页 |
| ·试剂的配制 | 第52页 |
| ·细胞株 | 第52页 |
| 3 实验方法 | 第52-55页 |
| ·EGFR_267-297mAb 对 EGFR 过表达及正常表达细胞的生长状况的影响 | 第52-53页 |
| ·流式细胞术及激光共聚集分析 EGFR_267-297mAb 诱导 EGFR 过表达细胞凋亡 | 第53-54页 |
| ·激光共聚集法观察 EGFR_267-297mAb 与 EGFR 过表达细胞的结合与内化 | 第54-55页 |
| 4 结果 | 第55-61页 |
| ·EGFR_267-297mAb 对 EGFR 过表达 MDAMB231 细胞的生长影响 | 第55-57页 |
| ·激光共聚集分析 EGFR_267-297mAb 诱导 MDAMB231 细胞凋亡 | 第57-58页 |
| ·激光共聚集法观察 EGFR_267-297mAb 与 MDAMB231 细胞及 LLC 结合与内化 | 第58-61页 |
| ·EGFR_267-297mAb 与 MM231 细胞及 LLC 细胞的结合 | 第58-59页 |
| ·EGFR_267-297mAb 与 MM-231 细胞及 LLC 细胞结合后的内化 | 第59-61页 |
| 5 讨论 | 第61-62页 |
| 6 结论 | 第62-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 附录一 英文缩写词表 | 第67-68页 |
| 附录二 攻读学位期间发表的论文专利及参加科研情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
