| 英文缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 1 人 HPA 的生物学功能 | 第13-14页 |
| 2 人 HPA 基因及蛋白结构 | 第14-15页 |
| 3 乙酰肝素酶与乳腺癌的关系 | 第15页 |
| 4 乙酰肝素酶抑制剂研究近况 | 第15-18页 |
| 第一部分 抗乙酰肝素酶单克隆抗体的制备及鉴定 | 第18-53页 |
| 1 试验材料与器材 | 第18-20页 |
| ·试验动物 | 第18页 |
| ·试验试剂 | 第18-20页 |
| 2 溶液的配置 | 第20-23页 |
| ·培养基类 | 第20页 |
| ·ELISA 溶液 | 第20-21页 |
| ·western blot 溶液 | 第21-23页 |
| 3 试验方法 | 第23-36页 |
| ·BALB/c 小鼠的免疫 | 第23-24页 |
| ·免疫抗原的准备 | 第23页 |
| ·BALB/c 小鼠的免疫 | 第23-24页 |
| ·抗原最佳包被浓度的确定及血清效价的测定 | 第24-26页 |
| ·抗原最佳包被浓度的确定 | 第25页 |
| ·血清效价测定 | 第25-26页 |
| ·细胞融合 | 第26-30页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·SP2/0 细胞的准备 | 第27页 |
| ·小鼠脾细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·杂交瘤细胞的制备 | 第28页 |
| ·杂交瘤细胞的的筛选 | 第28-29页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化 | 第29-30页 |
| ·杂交瘤细胞株的扩大培养及冻存 | 第30页 |
| ·小鼠腹水的制备 | 第30-31页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第31-32页 |
| ·初步纯化（PEG6000 沉淀法） | 第31页 |
| ·分子筛柱层析纯化 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第32-34页 |
| ·ELISA 法检测单克隆抗体的特异性 | 第32页 |
| ·Western blot 法检测单克隆抗体的特异性 | 第32-34页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定 | 第34-35页 |
| ·捕获型 ELISA | 第34页 |
| ·试纸条检测 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体亲和常数测定 | 第35-36页 |
| 4 实验结果 | 第36-51页 |
| ·最佳抗原浓度的选择 | 第36-37页 |
| ·测定免疫小鼠血清效价 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第37-40页 |
| ·单抗亚类鉴定 | 第40-42页 |
| ·捕获型 ELISA | 第40-41页 |
| ·试纸条 | 第41-42页 |
| ·腹水效价测定 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第43-47页 |
| ·间接 ELISA | 第43-45页 |
| ·Western Blot 鉴定单克隆抗体特异性 | 第45-47页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第47-49页 |
| ·抗体浓度的测定 | 第49-50页 |
| ·单抗亲和力常数的测定 | 第50-51页 |
| 5 讨论 | 第51-53页 |
| 第二部分 抗乙酰肝素酶单克隆抗体与紫杉醇联用对乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力的影响 | 第53-82页 |
| 1 实验材料 | 第53-54页 |
| ·实验细胞 | 第53页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第53-54页 |
| 2 溶液配制 | 第54页 |
| 3 实验方法 | 第54-61页 |
| ·细胞的保存 | 第54-55页 |
| ·细胞常规培养 | 第55-56页 |
| ·细胞复苏 | 第55页 |
| ·细胞传代 | 第55-56页 |
| ·MTT 法检测药物对细胞增殖的抑制作用 | 第56-58页 |
| ·流式检测乳腺癌细胞周期变化（PI 染色） | 第58-59页 |
| ·细胞划痕试验检测药物对于细胞迁移能力的影响 | 第59-60页 |
| ·Transwell 试验检测药物对于细胞侵袭能力的影响 | 第60页 |
| ·统计学方法 | 第60-61页 |
| 4 实验结果 | 第61-79页 |
| ·单克隆抗体对乳腺癌细胞形态的影响 | 第61-62页 |
| ·单抗与紫杉醇联用对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第62-68页 |
| ·PI 染色法检测药物对细胞周期的影响 | 第68-73页 |
| ·细胞划痕试验检测药物对于细胞迁移能力的影响 | 第73-77页 |
| ·细胞迁移能力的对比 | 第73-75页 |
| ·紫杉醇与抗 HPA 单抗联用后对 MCF‐7/F5细胞迁移能力的影响 | 第75-77页 |
| ·Transwell 试验检测药物对于细胞侵袭能力的影响 | 第77-79页 |
| ·细胞侵袭能力的比较 | 第77页 |
| ·紫杉醇与抗 HPA 单抗联用后对 MCF‐7/F5细胞侵袭能力的影响 | 第77-79页 |
| 5 讨论 | 第79-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 发表论文 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
