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猪源肠外致病性大肠杆菌比较基因组学和亚单位疫苗的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩略语表第12-14页
1 前言第14-43页
   ·大肠杆菌研究背景第14-15页
   ·大肠杆菌的群系分布和血清型分型第15-16页
   ·肠外致病性大肠杆菌的致病机制第16-31页
     ·大肠杆菌毒力因子第16-25页
     ·肠外致病性大肠杆菌在宿主体内的致病过程第25-29页
     ·关于肠外致病性大肠杆菌毒力的假说第29-31页
   ·基因组基本元件第31-33页
     ·基因岛第31-32页
     ·插入元件第32页
     ·间隔集簇短回文重复区域第32-33页
     ·假基因第33页
   ·大肠杆菌基因组特点第33-35页
   ·大肠杆菌的进化分析研究第35页
   ·不同宿主ExPEC之间的关系第35-36页
   ·大肠杆菌的质粒第36-40页
     ·肠外致病性大肠杆菌的毒力质粒第36-38页
     ·质粒的复制子类型第38-39页
     ·大肠杆菌质粒的系统进化第39-40页
   ·肠外致病性大肠杆菌疫苗的研究现状第40-42页
   ·大肠杆菌的外膜蛋白第42页
   ·基因的适应性进化分析第42-43页
2 猪源肠外致病性大肠杆菌PCN033和PCN061菌株全基因组测序、注释及比较基因组学分析第43-100页
   ·研究目的与意义第43页
   ·实验材料第43-44页
     ·菌株及来源第43页
     ·主要培养基第43-44页
     ·试剂,溶液和试剂盒第44页
   ·实验方法第44-52页
     ·细菌基因组的提取第44页
     ·基因组序列的拼接和验证第44-45页
     ·基因组的注释与基本分析第45-50页
     ·进化分析第50页
     ·比较基因组学分析第50-51页
     ·生物学特性的分析第51-52页
   ·结果与分析第52-94页
     ·PCN033和PCN061菌株基因组测序结果第52-54页
     ·PCN033和PCN061菌株基因组基本特点第54-56页
     ·基因组基本元件的分析第56-60页
     ·进化分析第60-63页
     ·PCN033和PCN061菌株比较基因组学和相应生物表型的鉴定分析第63-91页
     ·质粒分析第91-94页
   ·讨论第94-99页
     ·基因组测序,注释以及比较分析中应注意的问题第95-96页
     ·猪源ExPEC强毒株PCN033和弱毒株PCN061基因组和生物表型的比较分析第96-97页
     ·猪源ExPEC强毒株PCN033中毒力相关序列的分析和展望第97-99页
   ·结论第99-100页
3 猪源肠外致病性大肠杆菌候选亚单位疫苗OmpC和OmpF的研究第100-118页
   ·研究目的与意义第100页
   ·材料与方法第100-109页
     ·菌株及其活化和培养、质粒第100-101页
     ·猪源肠外大肠杆菌ompC和ompF基因的扩增以及PCR产物的回收第101-102页
     ·连接pMD18-T载体进行测序第102-103页
     ·原核表达载体的构建第103-105页
     ·融合蛋白的诱导表达和纯化第105-106页
     ·Western-blot检测第106-107页
     ·小鼠免疫及攻毒实验第107页
     ·酶联免疫吸附实验ELISA检测抗体效价第107-108页
     ·调理吞噬实验第108-109页
     ·基因ompC和ompF的适应性进化分析第109页
   ·结果与分析第109-115页
     ·重组质粒PCR和酶切鉴定第109页
     ·重组蛋白的鉴定第109-112页
     ·重组蛋白特异性IgG抗体水平第112-113页
     ·小鼠感染实验第113-114页
     ·调理吞噬实验第114页
     ·基因ompC和ompF的重组和选择压力分析第114-115页
   ·讨论第115-117页
   ·结论第117-118页
参考文献第118-140页
附表第140-181页
发表文章第181-182页
致谢第182-183页

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