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H5和H9亚型禽流感病毒遗传特性分析及细胞培养候选疫苗株的拯救

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 引言第15-28页
   ·流感病毒的分子生物学第16-19页
     ·流感病毒的结构第16-17页
     ·流感病毒的编码蛋白第17-18页
     ·流感病毒的复制第18页
     ·流感病毒的遗传和变异第18-19页
   ·禽流感的流行现状第19-20页
     ·H5N1 亚型禽流感第19-20页
     ·H9N2 亚型禽流感第20页
   ·禽流感疫苗的研究进展第20-22页
     ·全病毒灭活疫苗第20-21页
     ·重组活载体疫苗第21页
     ·DNA 疫苗第21页
     ·亚单位疫苗第21-22页
   ·流感病毒反向遗传学操作技术的发展历史第22-25页
     ·借助辅助病毒拯救流感病毒第22-23页
     ·借助质粒系统拯救流感病毒第23-25页
   ·反向遗传学操作技术在流感病毒研究中的应用第25-27页
     ·反向遗传学操作技术与流感病毒生物学研究第25-26页
     ·反向遗传学操作技术与流感疫苗研究第26页
     ·反向遗传学操作技术与流感病毒载体研究第26-27页
   ·本研究的目的和意义第27-28页
第二章 H5N1 亚型 AIV 遗传特性分析第28-42页
   ·材料与方法第28-30页
     ·病毒株第28页
     ·实验动物第28页
     ·主要试剂和仪器第28页
     ·病毒基因组 RNA 的提取及 cDNA 的合成第28-29页
     ·引物设计与合成第29页
     ·目的基因的 PCR 扩增第29-30页
     ·序列测定与分析比较第30页
     ·病毒的致病性研究第30页
   ·结果第30-39页
     ·病毒基因组序列遗传特性分析第30-39页
     ·病毒的致病性分析第39页
   ·讨论第39-42页
第三章 H9N2 亚型 AIV HA 基因的遗传特性分析第42-50页
   ·材料与方法第42-43页
     ·病毒株第42页
     ·实验试剂和方法第42页
     ·H9N2 亚型流感病毒 HA 基因的序列分析第42页
     ·动物感染实验第42-43页
   ·结果第43-48页
     ·PCR 扩增结果第43页
     ·H9N2 亚型 AIV HA 基因遗传进化分析第43-44页
     ·HA 基因核苷酸及氨基酸的同源性分析第44-46页
     ·HA 基因关键位点的氨基酸序列分析第46页
     ·动物感染实验结果第46-48页
   ·讨论第48-50页
第四章 H9N2 亚型 AIV 细胞培养候选疫苗株的拯救第50-61页
   ·材料与方法第50-55页
     ·病毒株与质粒第50页
     ·细胞及载体第50页
     ·实验动物第50页
     ·主要试剂和仪器第50-51页
     ·EID50和 TCID50的测定第51页
     ·pHW2000 双向转录载体的工作原理第51-52页
     ·rSH11 拯救的技术路线第52-53页
     ·rSH11 毒株的拯救第53-54页
     ·rSH11 的鉴定第54页
     ·动物免疫保护实验第54页
     ·HA 和 NA 基因替换重组流感病毒的拯救第54-55页
   ·结果第55-59页
     ·H9N2 亚型 AIV 的生长特性第55页
     ·重组质粒的 PCR 鉴定第55-56页
     ·聚合酶基因和核蛋白基因重组质粒表达活性的荧光鉴定第56页
     ·重组病毒的血凝活性检测第56-57页
     ·rSH11 的拯救第57页
     ·rSH11 的鉴定第57页
     ·rSH11 的免疫原性研究结果第57-58页
     ·HA 和 NA 基因替换重组流感病毒的拯救第58-59页
   ·讨论第59-61页
第五章 全文结论第61-62页
参考文献第62-68页
附录第68-73页
致谢第73-74页
作者简历第74页

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