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共表达PRRSV shRNA及GP5和M蛋白的重组腺相关病毒的制备及鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 引言第12-23页
   ·研究目的及意义第12页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)结构生物学研究进展第12-15页
     ·非结构蛋白第13页
     ·主要的囊膜蛋白-M 和 GP5 蛋白第13页
     ·次要的囊膜蛋白第13-14页
     ·病毒的入侵第14页
     ·核衣壳蛋白第14-15页
     ·展望第15页
   ·PRRS 疫苗学研究进展第15-20页
     ·PRRSV 的免疫原性第15-16页
     ·阻碍 PRRS 疫苗开发的因素第16-17页
     ·载体疫苗第17-19页
     ·展望第19-20页
   ·重组腺相关病毒载体(rAAV)的研究进展第20-23页
     ·AAV 的生物学基础第20-21页
     ·rAAV 载体的研究第21-22页
     ·AAV 载体质粒在基因质粒中的应用第22页
     ·AAV 的发展前景第22-23页
第二章 重组腺相关病毒的制备及鉴定第23-46页
   ·材料第23页
     ·毒株、质粒及细胞第23页
     ·试剂第23页
     ·主要的仪器第23页
   ·试验方法第23-35页
     ·表达 shRNA 的 pAAV-U6-IERS-hrGFP-shRNA 的构建第23-25页
     ·pAAV-U6-IRES-hrGFP-shRNA-ORF5-ORF6 的构建第25-28页
     ·重组腺相关病毒的制备第28-30页
     ·重组腺相关病毒的纯化及纯度鉴定第30页
     ·测定重组腺相关病毒物理滴度第30-32页
     ·检测 shRNA 的干扰效果第32-33页
     ·检测目的蛋白的表达第33-35页
     ·重组腺相关病毒的制备及纯化第35页
   ·结果第35-45页
     ·ORF5、ORF6 基因的获得第35-37页
     ·重组载体鉴定结果第37-38页
     ·rAAV-shRNA-ORF5-ORF6 的制备第38-39页
     ·病毒分离纯化结果第39页
     ·重组腺相关病毒物理滴度的测定结果第39-40页
     ·shRNA 的干扰效果检测结果第40-43页
     ·GP5、M 蛋白检测结果第43-44页
     ·重组腺相关病毒的制备第44-45页
   ·讨论第45-46页
第三章 结论第46-47页
参考文献第47-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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