目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-26页 |
·砷与砷污染 | 第12-13页 |
·砷及其化合物 | 第12页 |
·砷的毒性与砷污染 | 第12-13页 |
·微生物砷抗性机制研究进展 | 第13-16页 |
·微生物砷氧化 | 第13-15页 |
·As(Ⅲ)氧化分子机制 | 第13-15页 |
·As(Ⅲ)氧化和反硝化偶联供能 | 第15页 |
·细胞质As(Ⅴ)还原 | 第15页 |
·呼吸性As(Ⅴ)还原 | 第15-16页 |
·As(Ⅲ)甲基化 | 第16页 |
·砷与磷代谢 | 第16-18页 |
·微生物磷运输系统 | 第16-17页 |
·微生物砷与磷代谢的关系 | 第17-18页 |
·土壤杆菌属(Agrobacterium)研究概况 | 第18页 |
·蛋白质组学研究进展 | 第18-25页 |
·基因组、转录组和蛋白质组之间的关系 | 第18-20页 |
·蛋白质组学 | 第18-19页 |
·转录组和蛋白质组学 | 第19页 |
·代谢组和蛋白质组学 | 第19-20页 |
·蛋白质组学的研究范畴 | 第20页 |
·蛋白质组学的研究策略 | 第20-21页 |
·蛋白质组分析技术 | 第21-24页 |
·依赖于分离的方法 | 第21-23页 |
·不依赖于分离的方法 | 第23-24页 |
·微生物蛋白质组学 | 第24-25页 |
·加砷条件下的微生物蛋白质组学研究 | 第24-25页 |
·课题的立题背景及研究目的 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-39页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·菌株的来源 | 第26页 |
·培养基配制及主要的成分 | 第26页 |
·抗生素及砷氧化曲线测定所用试剂 | 第26-27页 |
·引物 | 第27页 |
·试剂和仪器 | 第27-30页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要试剂的配制 | 第28-29页 |
·双向电泳试剂配方 | 第28-29页 |
·SDS-PAGE所用溶液 | 第29页 |
·常用仪器 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-39页 |
·DNA操作的方法 | 第30页 |
·细菌总DNA的提取 | 第30页 |
·PCR扩增 | 第30页 |
·TAS-990原子吸收分光光度计及操作规程 | 第30-32页 |
·生长曲线的测定 | 第32页 |
·砷氧化曲线的测定 | 第32页 |
·双向电泳实验操作 | 第32-35页 |
·双向电泳样品制备 | 第32页 |
·蛋白定量(Bradford法) | 第32-33页 |
·等电聚焦 | 第33-34页 |
·SDS-PAGE | 第34页 |
·硝酸银染色(质谱兼容) | 第34-35页 |
·考马斯亮蓝染色(改良版Neuhoff CCB) | 第35页 |
·图像扫描及分析 | 第35页 |
·A. tumefaciens GW4总RNA的提取 | 第35-36页 |
·实时荧光定量PCR(real-time PCR) | 第36-39页 |
·RNA的定量及质量检测 | 第36页 |
·RNA样品中DNA的消化 | 第36页 |
·RNA的反转录PCR | 第36-37页 |
·实时荧光定量PCR反应 | 第37-39页 |
3 结果与讨论 | 第39-58页 |
·A.tumefaciens GW4菌株的蛋白质组学研究 | 第39-41页 |
·双向电泳材料的选取 | 第39页 |
·生长曲线及砷氧化曲线的建立 | 第39-41页 |
·理论蛋白质图谱分析 | 第41-42页 |
·双向电泳图谱建立 | 第42-46页 |
·差异蛋白的质谱鉴定 | 第46-47页 |
·差异蛋白功能分析 | 第47-48页 |
·碳水化合物代谢相关蛋白变化分析 | 第48-50页 |
·TCA循环 | 第49-50页 |
·丙酮酸的去向 | 第50页 |
·氨基酸代谢相关蛋白变化分析 | 第50-51页 |
·砷磷相关蛋白变化分析 | 第51-58页 |
·As(Ⅴ)还原酶ArsC | 第53页 |
·钼喋呤生物合成蛋白MoeA | 第53-54页 |
·FAD依赖的嘧啶核苷酸二硫化物氧化还原酶 | 第54-55页 |
·硫酸盐ABC转运子底物结合蛋白Sbp | 第55-56页 |
·砷和磷运输相关蛋白 | 第56-58页 |
4 总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
附录 | 第67-68页 |