目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略表 | 第11-13页 |
1. 前言 | 第13-27页 |
·文献综述 | 第13-20页 |
·筛选特异表达基因的技术 | 第13-17页 |
·玉米纹枯病研究概述 | 第17-20页 |
·基因消除PCR技术 | 第20-25页 |
·R-PCR技术所涉及的背景技术 | 第20-21页 |
·R-PCR技术的原理和过程 | 第21-25页 |
·本研究的目的、意义和内容 | 第25-26页 |
·技术路线 | 第26-27页 |
2. 材料与方法 | 第27-37页 |
·试验材料 | 第27页 |
·仪器设备及试剂 | 第27-28页 |
·仪器设备 | 第27页 |
·试剂 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-37页 |
·单基因片段水平R-PCR的建立 | 第28-31页 |
·基因组水平R-PCR的建立 | 第31-32页 |
·纹枯病菌诱导玉米cDNA水平R-PCR的建立 | 第32-33页 |
·纹枯病菌诱导玉米上调表达基因的筛选 | 第33-34页 |
·荧光定量PCR验证 | 第34-37页 |
3 结果与分析 | 第37-66页 |
·单基因片段水平R-PCR的建立 | 第37-45页 |
·单基因片段的制备 | 第37-38页 |
·单基因片段R-PCR模板和引物的制备 | 第38-41页 |
·单基因片段R-PCR前期条件摸索 | 第41-42页 |
·R-PCR引物和模板不同比例下的R-PCR效果 | 第42-43页 |
·R-PCR引物的特异性验证 | 第43-45页 |
·基因组水平R-PCR的建立 | 第45-50页 |
·玉米GenomeDNA的提取 | 第45-46页 |
·R-PCR模板和引物的制备 | 第46-48页 |
·R-PCR | 第48-50页 |
·纹枯病菌诱导玉米cDNA水平R-PCR的建立 | 第50-57页 |
·纹枯病菌的培养和玉米材料的准备 | 第50-51页 |
·玉米总RNA的提取及cDNA的合成 | 第51-53页 |
·R-PCR模板和引物的制备 | 第53-54页 |
·R-PCR | 第54-57页 |
·纹枯病菌诱导玉米上调表达基因的筛选 | 第57-61页 |
·待克隆目标基因群体的获得 | 第57-58页 |
·R-PCR产物的T-A克隆,测序和生物信息学功能比对分析 | 第58-61页 |
·荧光定量PCR验证 | 第61-66页 |
4 讨论 | 第66-73页 |
·R-PCR技术的建立 | 第66页 |
·R-PCR技术在筛选差异表达基因中的应用 | 第66-67页 |
·R-PCR技术在筛选差异表达基因中的优势与不足 | 第67-68页 |
·本研究今后的研究方向 | 第68-69页 |
·结论 | 第69-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
附录 | 第83-107页 |
附录Ⅰ 主要分子生物学试剂和培养基的配制 | 第83-85页 |
附录Ⅱ 实验方法 | 第85-91页 |
附录Ⅲ 荧光定量引物 | 第91-93页 |
附录Ⅳ 实验结果 | 第93-107页 |
致谢 | 第107-108页 |