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一种基因消除PCR技术的建立及应用

目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略表第11-13页
1. 前言第13-27页
   ·文献综述第13-20页
     ·筛选特异表达基因的技术第13-17页
     ·玉米纹枯病研究概述第17-20页
   ·基因消除PCR技术第20-25页
     ·R-PCR技术所涉及的背景技术第20-21页
     ·R-PCR技术的原理和过程第21-25页
   ·本研究的目的、意义和内容第25-26页
   ·技术路线第26-27页
2. 材料与方法第27-37页
   ·试验材料第27页
   ·仪器设备及试剂第27-28页
     ·仪器设备第27页
     ·试剂第27-28页
   ·实验方法第28-37页
     ·单基因片段水平R-PCR的建立第28-31页
     ·基因组水平R-PCR的建立第31-32页
     ·纹枯病菌诱导玉米cDNA水平R-PCR的建立第32-33页
     ·纹枯病菌诱导玉米上调表达基因的筛选第33-34页
     ·荧光定量PCR验证第34-37页
3 结果与分析第37-66页
   ·单基因片段水平R-PCR的建立第37-45页
     ·单基因片段的制备第37-38页
     ·单基因片段R-PCR模板和引物的制备第38-41页
     ·单基因片段R-PCR前期条件摸索第41-42页
     ·R-PCR引物和模板不同比例下的R-PCR效果第42-43页
     ·R-PCR引物的特异性验证第43-45页
   ·基因组水平R-PCR的建立第45-50页
     ·玉米GenomeDNA的提取第45-46页
     ·R-PCR模板和引物的制备第46-48页
     ·R-PCR第48-50页
   ·纹枯病菌诱导玉米cDNA水平R-PCR的建立第50-57页
     ·纹枯病菌的培养和玉米材料的准备第50-51页
     ·玉米总RNA的提取及cDNA的合成第51-53页
     ·R-PCR模板和引物的制备第53-54页
     ·R-PCR第54-57页
   ·纹枯病菌诱导玉米上调表达基因的筛选第57-61页
     ·待克隆目标基因群体的获得第57-58页
     ·R-PCR产物的T-A克隆,测序和生物信息学功能比对分析第58-61页
   ·荧光定量PCR验证第61-66页
4 讨论第66-73页
   ·R-PCR技术的建立第66页
   ·R-PCR技术在筛选差异表达基因中的应用第66-67页
   ·R-PCR技术在筛选差异表达基因中的优势与不足第67-68页
   ·本研究今后的研究方向第68-69页
   ·结论第69-73页
参考文献第73-83页
附录第83-107页
 附录Ⅰ 主要分子生物学试剂和培养基的配制第83-85页
 附录Ⅱ 实验方法第85-91页
 附录Ⅲ 荧光定量引物第91-93页
 附录Ⅳ 实验结果第93-107页
致谢第107-108页

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