| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-22页 |
| ·肠致病性大肠杆菌和肠出血性大肠杆菌的研究进展 | 第11-12页 |
| ·病原性大肠杆菌概述 | 第11-12页 |
| ·肠致病性大肠杆菌和肠出血性大肠杆菌的研究进展 | 第12页 |
| ·三型分泌系统和效应蛋白 | 第12-14页 |
| ·肠致病性大肠杆菌的非LEE效应蛋白 | 第14页 |
| ·病原菌和宿主细胞之间的相互作用 | 第14-19页 |
| ·细菌效应蛋白对宿主细胞骨架系统的影响 | 第17-18页 |
| ·细菌效应蛋白对宿主泛素化系统的影响 | 第18页 |
| ·细菌效应蛋白对宿主NF-κB和MAPK信号通路的影响 | 第18-19页 |
| ·死亡受体信号通路 | 第19-22页 |
| ·死亡受体家族的成员 | 第20页 |
| ·死亡受体信号的传导 | 第20-22页 |
| 第二章 材料方法 | 第22-38页 |
| ·分子生物学操作 | 第22-26页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第22-23页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第23-24页 |
| ·连接和转化 | 第24页 |
| ·定点突变 | 第24-25页 |
| ·质粒大提 | 第25页 |
| ·本论文中构建的基因和质粒总结 | 第25-26页 |
| ·细胞培养及转染 | 第26-27页 |
| ·细胞来源以及培养条件 | 第26页 |
| ·细胞转染 | 第26-27页 |
| ·稳定细胞系的建立 | 第27页 |
| ·SiRNA转染 | 第27页 |
| ·双荧光素酶报告实验 | 第27-28页 |
| ·免疫印迹、免疫共沉淀 | 第28-31页 |
| ·常用试剂配方 | 第28-29页 |
| ·免疫印迹 | 第29-30页 |
| ·免疫共沉淀 | 第30页 |
| ·本论文中使用的抗体总结 | 第30-31页 |
| ·p65蛋白的免疫荧光染色 | 第31页 |
| ·原核表达纯化重组蛋白 | 第31-32页 |
| ·常用试剂配方 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白His-Sumo-NleB及其突变体的纯化 | 第32页 |
| ·重组蛋白GST-TRADD DD以及GST-FADD的纯化 | 第32页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第32-36页 |
| ·实验中用到的培养基 | 第32-33页 |
| ·LiAc-介导的酵母转化 | 第33-35页 |
| ·酵母双杂交 | 第35页 |
| ·酵母DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·肠致病性大肠杆菌的实验操作 | 第36-37页 |
| ·肠致病性大肠杆菌的培养 | 第36页 |
| ·肠致病性大肠杆菌的活化和感染 | 第36-37页 |
| ·细胞死亡的检测 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第38-95页 |
| ·NleB抑制宿主细胞NF-κB信号通路的激活具有选择性 | 第38-42页 |
| ·NleB抑制多种TNF受体复合物下游的信号通路 | 第42-44页 |
| ·TRADD是NleB的结合蛋白 | 第44-48页 |
| ·NleB抑制TRADD DD寡聚进而抑制TNF受体复合物的组装 | 第48-53页 |
| ·NleB抑制TRADD过表达所激活的NF-κB和细胞死亡信号通路 | 第48-49页 |
| ·NleB抑制TRADD过表达所引起的自体或异体寡聚 | 第49-52页 |
| ·NleB抑制刺激条件下TNF受体复合物的组装 | 第52-53页 |
| ·极少量NleB即可以抑制TRADD DD自身寡聚以及与其他死亡受体结构域之间的结合 | 第53-55页 |
| ·NleB是一个细菌效应蛋白家族的成员 | 第55-58页 |
| ·NleB在体外是一个N-乙酰葡萄糖胺单糖转移酶 | 第58-62页 |
| ·NleB在体内是一个N-乙酰葡萄糖胺单糖转移酶 | 第62-64页 |
| ·NleB不是一个O-连接的N-乙酰葡萄糖胺单糖转移酶 | 第64-71页 |
| ·TRADD DD中第235位的精氨酸是NleB的修饰位点 | 第71-77页 |
| ·TRADD DD中第235位的精氨酸对TRADD功能很重要 | 第77-79页 |
| ·NleB能修饰多个含保守修饰位点的死亡受体或其接头蛋白 | 第79-83页 |
| ·NleB抑制多种死亡受体介导的细胞死亡 | 第83-84页 |
| ·细菌感染条件下NleB对死亡结构域蛋白糖基化的分析 | 第84-86页 |
| ·细菌感染条件下NleB对死亡受体信号通路的抑制作用 | 第86-92页 |
| ·细菌感染条件下NleB对TNF受体信号通路的抑制作用 | 第86-90页 |
| ·细菌感染条件下NleB对其他受体信号通路的抑制作用 | 第90-92页 |
| ·NleB糖基转移酶活性在动物感染模型中的研究 | 第92-95页 |
| ·鼠类柠檬酸杆菌中NleBc的生物学活性 | 第92-93页 |
| ·小鼠感染肠道定殖模型中NleB家族酶活功能的研究 | 第93-95页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第95-100页 |
| ·实验结论 | 第95页 |
| ·讨论和展望 | 第95-100页 |
| ·关于精氨酸修饰的讨论 | 第95-98页 |
| ·关于课题意义的讨论和展望 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 个人简历 | 第106-109页 |
