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利用BiFC技术研究拟南芥GPX3和RRTF1与DOS1体内相互作用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
缩写词第12-14页
1 前言第14-24页
   ·逆境胁迫对植物生长的影响第14-15页
   ·ROS 的产生以及对植物生长的影响第15-16页
   ·植物清除ROS 的机制第16-18页
   ·ROS 在植物信号传递中的作用第18-20页
   ·ROS 介导的信号传导通路第20-22页
     ·植物对ROS 的感知与传导第20-21页
     ·ROS 信号通路中相关基因的表达第21-22页
   ·立题依据第22-24页
2 材料和方法第24-36页
   ·实验材料第24页
   ·实验试剂第24页
   ·实验溶液第24-26页
     ·常用溶液第24-25页
     ·分离拟南芥叶片原生质体所用溶液第25页
     ·拟南芥原生质体瞬时转化所用溶液第25-26页
   ·实验所用引物第26-27页
     ·构建载体所用引物第26页
     ·纯合体鉴定所用引物第26页
     ·RT-PCR 所用引物第26-27页
   ·实验方法第27-36页
     ·拟南芥的种植第27页
     ·拟南芥总的RNA 提取第27页
     ·反转录制备拟南芥cDNA第27-28页
     ·半定量RT-PCR 检测相关基因表达第28页
     ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳第28页
     ·基因扩增与酶切反应第28-29页
     ·凝胶电泳产物的回收和纯化第29页
     ·重组质粒载体的构建第29-30页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第30页
     ·质粒DNA 的提取第30-31页
     ·重组质粒的鉴定第31页
     ·拟南芥原生质体的分离第31-32页
     ·PEG 转化第32页
     ·原生质体细胞的DAPI 染色第32页
     ·杂交实验第32-33页
     ·拟南芥基因组DNA 的提取第33页
     ·T-DNA 插入纯合体筛选方法第33-36页
3 结果与分析第36-52页
   ·D0S1 与GPX3 的体内相互作用研究(BiFC)第36-38页
     ·pSPYCE-D0S1; pSPYNE-GPX3 重组载体的构建第36-37页
     ·D0S1 与GPX3 体内相互作用第37-38页
   ·D0S1 与RRTF1 的体内相互作用研究(BiFC)第38-42页
     ·pSPYNE-RRTF1 重组载体的构建第38-39页
     ·D0S1 与RRTF1 体内相互作用第39-41页
     ·在缺失GPX3 情况下的D0S1 与RRTF1 体内相互作用第41-42页
   ·GPX3 对于D0S1 在氧化胁迫下跨膜运动的影响第42-47页
     ·gpx3-D0S1::GFP 植株的构建和筛选第42-43页
     ·gpx3-D0S1::GFP 与WT-D0S1::GFP 在H202 处理下的D0S1 跨膜运动对比分析第43-45页
     ·gpx3-D0S1::GFP 与WT-D0S1::GFP 在ABA 处理下的D0S1 跨膜运动对比分析第45-47页
   ·RRTF1 对于 DOS1 在氧化胁迫下跨膜运动的影响第47-52页
     ·rrtf1-D0S1::GFP 植株的构建和筛选第47-48页
     ·rrtf1-D0S1::GFP 与WT-D0S1::GFP 在H202 和ABA 处理下的DOS1跨膜运动对比分析第48-52页
4 讨论第52-56页
   ·D0S1 与GPX3 的相互作用第52页
   ·D0S1 与RRTF1 的相互作用第52页
   ·GPX3 与氧化胁迫下D0S1 跨膜运动之间的关系第52-53页
   ·RRTF1 与氧化胁迫下D0S1 跨膜运动之间的关系第53-56页
5 结论第56-58页
6 参考文献第58-62页
致谢第62-64页

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