| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第11-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-35页 |
| 1 间质干细胞与肾组织损伤修复 | 第20-23页 |
| ·MSCs的生物学特性 | 第20-21页 |
| ·MSCs对组织损伤的修复作用 | 第21页 |
| ·MSCs促进肾缺血再灌注损伤修复及其机制进展 | 第21-23页 |
| 2 MSCs与免疫 | 第23-25页 |
| ·MSCs的炎症趋向性 | 第23页 |
| ·MSCs调节免疫细胞的增殖与功能 | 第23-25页 |
| ·MSCs对T淋巴细胞的作用 | 第23-24页 |
| ·MSCs对树突状细胞的作用 | 第24页 |
| ·MSCs对B淋巴细胞的作用 | 第24页 |
| ·MSCs对自然杀伤细胞的作用 | 第24-25页 |
| 3 巨噬细胞与组织损伤 | 第25-29页 |
| ·巨噬细胞的免疫学分型 | 第25-26页 |
| ·巨噬细胞对不同组织损伤的作用 | 第26-29页 |
| ·巨噬细胞在急性肺损伤中的作用 | 第26-27页 |
| ·巨噬细胞在急性心肌梗塞中的作用 | 第27-28页 |
| ·巨噬细胞在表皮创伤愈合中的作用 | 第28页 |
| ·巨噬细胞在急性肾损伤中的作用 | 第28-29页 |
| 4 MSCs与巨噬细胞 | 第29-31页 |
| ·MSCs对巨噬细胞的作用 | 第30页 |
| ·巨噬细胞对MSCs的作用 | 第30-31页 |
| 5 本论文研究目的、方法、技术路线及意义 | 第31-35页 |
| ·研究目的 | 第31页 |
| ·研究方法 | 第31-32页 |
| ·技术路线 | 第32-34页 |
| ·研究意义 | 第34-35页 |
| 第二章 小鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立及hucMSCs治疗评价 | 第35-51页 |
| ·材料 | 第35-37页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第35-36页 |
| ·主要试剂与器材 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| ·小鼠肾缺血再灌注模型建立 | 第37页 |
| ·标本处理 | 第37-38页 |
| ·人脐带MSCs的分离扩增 | 第38页 |
| ·人脐带MSCs移植治疗肾损伤小鼠及体内示踪 | 第38页 |
| ·细胞移植 | 第38页 |
| ·CM-Dil标记人脐带MSCs及其体内示踪 | 第38页 |
| ·流式细胞分析 | 第38-39页 |
| ·血清学分析 | 第39页 |
| ·病理学分析 | 第39页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第39-40页 |
| ·TUNEL | 第40页 |
| ·总RNA提取 | 第40页 |
| ·逆转录反应 | 第40-41页 |
| ·定量RT-PCR | 第41页 |
| ·统计学方法 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-48页 |
| ·小鼠肾缺血再灌注模型的确定 | 第42页 |
| ·hucMSCs的形态与表型鉴定 | 第42-43页 |
| ·hucMSCs移植后的肾内定位 | 第43页 |
| ·hucMSCs移植对肾功能的保护作用 | 第43-44页 |
| ·hucMSCs移植促进肾组织损伤的修复 | 第44-46页 |
| ·hucMSCs移植加速肾小管上皮细胞再生 | 第46-47页 |
| ·hucMSCs移植减少肾小管上皮细胞凋亡 | 第47-48页 |
| ·hucMSCs移植促进损伤局部炎症的消退 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第三章 hucMSCs移植对肾损伤小鼠体内巨噬细胞的影响 | 第51-62页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第51页 |
| ·主要试剂与器材 | 第51-52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-55页 |
| ·组织标本收集与处理 | 第52页 |
| ·免疫荧光细胞化学染色检测巨噬细胞表面F4/80抗原的表达 | 第52-53页 |
| ·免疫组织化学染色分析肾组织中巨噬细胞的浸润情况 | 第53页 |
| ·免疫组织化学染色分析肾组织中单核细胞趋化蛋白的表达 | 第53-54页 |
| ·流式细胞术检测缺血再灌注晚期肾组织中巨噬细胞的亚型 | 第54页 |
| ·统计学方法 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-59页 |
| ·RAW264.7细胞表面表达F4/80抗原标记 | 第55页 |
| ·巨噬细胞在损伤肾组织中的浸润及定位 | 第55-57页 |
| ·hucMSCs移植减少巨噬细胞在肾组织中的浸润 | 第57页 |
| ·MCP-1在损伤肾组织中的表达及定位 | 第57页 |
| ·hucMSCs移植降低肾组织中MCP-1的表达 | 第57-59页 |
| ·hucMSCs移植促进损伤晚期肾组织中巨噬细胞向M2亚型极化 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第四章 体内清除巨噬细胞对hucMSCs治疗肾损伤作用的影响 | 第62-71页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·实验动物及细胞 | 第62页 |
| ·主要试剂与器材 | 第62页 |
| ·主要仪器设备 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-65页 |
| ·氯膦酸盐脂质体的制备 | 第63页 |
| ·氯膦酸盐脂质体的处理与输注 | 第63-64页 |
| ·组织标本收集与处理 | 第64页 |
| ·免疫组织化学法验证小鼠体内巨噬细胞的清除效果 | 第64页 |
| ·病理学分析 | 第64页 |
| ·总RNA提取 | 第64页 |
| ·逆转录反应 | 第64-65页 |
| ·定量PCR | 第65页 |
| ·统计学方法 | 第65页 |
| ·结果 | 第65-69页 |
| ·lipo-Cl_2MBP有效清除小鼠脾脏及肾脏中的巨噬细胞 | 第65-66页 |
| ·损伤早期巨噬细胞缺失对hucMSCs发挥肾修复作用的影响 | 第66页 |
| ·损伤晚期巨噬细胞缺失对hucMSCs发挥肾修复作用的影响 | 第66-68页 |
| ·巨噬细胞清除影响hucMSCs对肾组织炎症因子分泌的调节 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第五章 体外共培养实验评价hucMSCs对巨噬细胞的调节作用 | 第71-82页 |
| ·材料 | 第71-72页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第71页 |
| ·主要试剂与器材 | 第71-72页 |
| ·主要仪器设备 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-75页 |
| ·hucMSCs与RAW264.7细胞共培养 | 第72-73页 |
| ·总RNA提取 | 第73页 |
| ·逆转录反应 | 第73页 |
| ·RT-PCR | 第73页 |
| ·ELISA检测细胞培养上清中IL-10的浓度 | 第73-74页 |
| ·流式细胞术检测RAW264.7细胞中M2亚型的比例 | 第74页 |
| ·Transwell迁移试验检测hucMSCs对RAW264.7细胞的募集 | 第74页 |
| ·小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养 | 第74页 |
| ·MTT细胞增殖试验 | 第74-75页 |
| ·统计学方法 | 第75页 |
| ·结果 | 第75-79页 |
| ·hucMSCs调节RAW264.7细胞炎症因子的表达 | 第75-76页 |
| ·hucMSCs促进RAW264.7细胞分泌IL-10增多 | 第76-77页 |
| ·hucMSCs促进RAW264.7细胞向M2亚型极化 | 第77-78页 |
| ·hucMSCs对RAW264.7细胞具有趋化作用 | 第78-79页 |
| ·hucMSCs促进小鼠腹腔巨噬细胞的增殖 | 第79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 第六章 结论与展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 在学期间发表的论文及成果 | 第93页 |
