| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| ·硒及其生物学作用 | 第12页 |
| ·DNA甲基化 | 第12-14页 |
| ·DNA甲基化修饰 | 第13页 |
| ·DNA去甲基化 | 第13-14页 |
| ·DNA甲基化对基因表达的调控 | 第14页 |
| ·DNA异常甲基化与疾病 | 第14-16页 |
| ·DNA甲基化与肿瘤 | 第14-15页 |
| ·DNA甲基化与非肿瘤性疾病 | 第15-16页 |
| ·DNA甲基化与营养 | 第16-17页 |
| ·研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-24页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要化学与生物试剂 | 第18-19页 |
| ·主要试剂的配置 | 第19页 |
| ·实验动物饲养与处理 | 第19页 |
| ·组织DNA总甲基化水平检测 | 第19-21页 |
| ·组织DNA提取(酚-氯仿法) | 第20页 |
| ·DNA的水解 | 第20页 |
| ·高效液相色谱条件优化 | 第20页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第20页 |
| ·回收率与精密度试验 | 第20-21页 |
| ·高效液相色谱法检测样品的DNA总甲基化水平 | 第21页 |
| ·鸡DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2基因mRNA表达的检测 | 第21-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第21-22页 |
| ·组织总RNA的抽提 | 第22页 |
| ·反转录反应 | 第22页 |
| ·实时PCR扩增 | 第22-23页 |
| ·试验数据的分析与统计 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-41页 |
| ·HPLC检测基因组DNA甲基化方法的建立 | 第24-26页 |
| ·实验条件的选择和优化结果 | 第24页 |
| ·标准曲线和二元一次方程的建立 | 第24-25页 |
| ·回收率与精密度的测定结果 | 第25-26页 |
| ·HPLC检测样品基因组DNA甲基化结果 | 第26-29页 |
| ·组织DNA提取结果 | 第26页 |
| ·样品色谱图 | 第26-27页 |
| ·样品DNA甲基化检测结果 | 第27-29页 |
| ·目的基因实时定量PCR检测方法的建立 | 第29-31页 |
| ·组织RNA提取结果的鉴定 | 第29页 |
| ·DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2、GAPDH基因实时检测方法的建立 | 第29-31页 |
| ·硒缺乏对鸡组织中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2mRNA表达影响的检测结果 | 第31-41页 |
| ·硒缺乏对鸡肌肉组织中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2 mRNA表达影响的检测结果 | 第31-34页 |
| ·硒缺乏对鸡脑组织中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2mRNA表达影响的检测结果 | 第34-37页 |
| ·硒缺乏对鸡免疫系统中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2mRNA表达影响的检测结果 | 第37-40页 |
| ·硒缺乏对鸡肝脏DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2 mRNA表达影响的检测结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-46页 |
| ·HPLC检测DNA总甲基化水平方法的建立 | 第41页 |
| ·硒缺乏对鸡组织DNA总甲基化水平的影响 | 第41-44页 |
| ·硒缺乏对鸡肌肉组织DNA总甲基化水平的影响 | 第41-42页 |
| ·硒缺乏对鸡脑组织DNA总甲基化水平的影响 | 第42页 |
| ·硒缺乏对鸡免疫系统DNA总甲基化水平的影响 | 第42-43页 |
| ·硒缺乏对肝脏DNA总甲基化水平的影响 | 第43-44页 |
| ·硒缺乏对鸡肌肉、神经、免疫组织及肝脏中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2基因mRNA表达的影响 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
