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单萜合酶AtTPS03基因在湘油15中的过表达研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 文献综述第11-23页
 1 国内外研究进展第11-15页
   ·植物通讯的研究现状第11-14页
     ·植物间通讯信号的传递第11-12页
     ·植食性昆虫诱导的挥发性有机成份与植物通讯第12页
     ·挥发性物质的相关防御反应第12-14页
   ·萜类化合物与植物通讯的联系第14-15页
 2 萜类化合物的生化合成第15-17页
   ·甲羟戊酸途径(MVA pathway)第15-16页
   ·5-磷酸脱氧木酮糖/4-磷酸-2-甲基赤藓糖醇途径(DXP/MEP pathway)第16-17页
 3 单萜合酶的研究现状第17-20页
   ·罗勒烯(ocimene)与植物通讯第17-18页
   ·单萜合酶基因表达的调控第18-20页
     ·时间与空间的表达规律第18-19页
     ·信号传递与调控第19-20页
 4 植物启动子第20-22页
   ·植物启动子的含义第20页
   ·启动子的类型与其应用第20-22页
     ·组成型启动子第20-21页
     ·组织特异性的启动子第21页
     ·诱导型启动子第21-22页
 5 本研究的目的与意义第22-23页
第二章 克隆AtTPS03基因全长CDNA与构建过表达载体PHB-O第23-37页
 1 材料与方法第23-30页
   ·材料第23页
     ·供试材料第23页
     ·菌株第23页
     ·载体与质粒第23页
     ·分子生物学常用试剂第23页
   ·方法第23-27页
     ·拟南芥cDNA的获得第23-24页
     ·AtTPS03全长cDNA片段的PCR扩增第24-25页
     ·PCR产物回收(参照北京新长江凝胶回收试剂盒说明)第25页
     ·对PCR扩增产物的测序和比对第25-27页
   ·pHB-O的过表达载体构建第27-29页
     ·特异性引物的设计第27-28页
     ·PCR产物(目的片段)与过表达载体pHB的连接第28-29页
   ·工程菌的转化第29-30页
     ·大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备第29页
     ·热激法转化大肠杆菌第29页
     ·冻熔法转化根癌农杆菌LBA4404第29-30页
 2 结果与分析第30-37页
   ·拟南芥cDNA的制备第30页
   ·目的片段的克隆与检测结果第30-37页
     ·质粒酶切验证第31-32页
     ·序列分析第32-35页
     ·过表达载体PCR验证结果第35-37页
第三章 农杆菌介导转湘油15的方法与转化体的筛选第37-43页
 1 材料与方法第37-40页
   ·材料第37-38页
     ·供试材料第37页
     ·供试菌株与相关载体第37页
     ·各类培养基第37-38页
     ·所用抗生素第38页
   ·方法第38-40页
     ·PPT工作浓度的探索第38-39页
     ·甘蓝型油菜的遗传转化第39-40页
     ·转化体的筛选第40页
 2 结果与分析第40-43页
   ·抗性植株的PCR检测第40-41页
   ·甘蓝型油菜子叶柄的转化效率第41-43页
第四章 指示基因在转基因植株与湘油15中的表达第43-45页
 1 材料与方法第43-44页
   ·材料第43页
     ·供试材料第43页
     ·分子生物学试剂第43页
   ·方法第43-44页
     ·材料的准备第43页
     ·RT-PCR第43页
     ·指示基因BnPR1,BnPDF1.2的引物设计第43-44页
 2 结果与分析第44-45页
第五章 讨论第45-48页
 1 植物RNA的提取第45页
 2 过表达载体PHB-O的构建第45页
 3 农杆菌介导的遗传转化湘油15第45-46页
 4 转基因植株的表型观察第46页
 5 结论及创新点第46-47页
 6 下一步工作计划第47-48页
参考文献第48-53页
附录 技术路线图第53-54页
缩略词表(Abbreviation)第54-55页
致谢第55-56页
作者简介第56页

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