摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 国内外研究进展 | 第11-15页 |
·植物通讯的研究现状 | 第11-14页 |
·植物间通讯信号的传递 | 第11-12页 |
·植食性昆虫诱导的挥发性有机成份与植物通讯 | 第12页 |
·挥发性物质的相关防御反应 | 第12-14页 |
·萜类化合物与植物通讯的联系 | 第14-15页 |
2 萜类化合物的生化合成 | 第15-17页 |
·甲羟戊酸途径(MVA pathway) | 第15-16页 |
·5-磷酸脱氧木酮糖/4-磷酸-2-甲基赤藓糖醇途径(DXP/MEP pathway) | 第16-17页 |
3 单萜合酶的研究现状 | 第17-20页 |
·罗勒烯(ocimene)与植物通讯 | 第17-18页 |
·单萜合酶基因表达的调控 | 第18-20页 |
·时间与空间的表达规律 | 第18-19页 |
·信号传递与调控 | 第19-20页 |
4 植物启动子 | 第20-22页 |
·植物启动子的含义 | 第20页 |
·启动子的类型与其应用 | 第20-22页 |
·组成型启动子 | 第20-21页 |
·组织特异性的启动子 | 第21页 |
·诱导型启动子 | 第21-22页 |
5 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 克隆AtTPS03基因全长CDNA与构建过表达载体PHB-O | 第23-37页 |
1 材料与方法 | 第23-30页 |
·材料 | 第23页 |
·供试材料 | 第23页 |
·菌株 | 第23页 |
·载体与质粒 | 第23页 |
·分子生物学常用试剂 | 第23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·拟南芥cDNA的获得 | 第23-24页 |
·AtTPS03全长cDNA片段的PCR扩增 | 第24-25页 |
·PCR产物回收(参照北京新长江凝胶回收试剂盒说明) | 第25页 |
·对PCR扩增产物的测序和比对 | 第25-27页 |
·pHB-O的过表达载体构建 | 第27-29页 |
·特异性引物的设计 | 第27-28页 |
·PCR产物(目的片段)与过表达载体pHB的连接 | 第28-29页 |
·工程菌的转化 | 第29-30页 |
·大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备 | 第29页 |
·热激法转化大肠杆菌 | 第29页 |
·冻熔法转化根癌农杆菌LBA4404 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-37页 |
·拟南芥cDNA的制备 | 第30页 |
·目的片段的克隆与检测结果 | 第30-37页 |
·质粒酶切验证 | 第31-32页 |
·序列分析 | 第32-35页 |
·过表达载体PCR验证结果 | 第35-37页 |
第三章 农杆菌介导转湘油15的方法与转化体的筛选 | 第37-43页 |
1 材料与方法 | 第37-40页 |
·材料 | 第37-38页 |
·供试材料 | 第37页 |
·供试菌株与相关载体 | 第37页 |
·各类培养基 | 第37-38页 |
·所用抗生素 | 第38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·PPT工作浓度的探索 | 第38-39页 |
·甘蓝型油菜的遗传转化 | 第39-40页 |
·转化体的筛选 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-43页 |
·抗性植株的PCR检测 | 第40-41页 |
·甘蓝型油菜子叶柄的转化效率 | 第41-43页 |
第四章 指示基因在转基因植株与湘油15中的表达 | 第43-45页 |
1 材料与方法 | 第43-44页 |
·材料 | 第43页 |
·供试材料 | 第43页 |
·分子生物学试剂 | 第43页 |
·方法 | 第43-44页 |
·材料的准备 | 第43页 |
·RT-PCR | 第43页 |
·指示基因BnPR1,BnPDF1.2的引物设计 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-45页 |
第五章 讨论 | 第45-48页 |
1 植物RNA的提取 | 第45页 |
2 过表达载体PHB-O的构建 | 第45页 |
3 农杆菌介导的遗传转化湘油15 | 第45-46页 |
4 转基因植株的表型观察 | 第46页 |
5 结论及创新点 | 第46-47页 |
6 下一步工作计划 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录 技术路线图 | 第53-54页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56页 |