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OSP-1启动子及与CMV结合的双启动子真核表达载体在奶山羊卵巢壁颗粒细胞中的表达与鉴定

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一篇 文献综述第13-30页
 第一章 奶山羊产羔性状分子育种的研究进展第13-17页
   ·西农萨能奶山羊品种简介第13-14页
   ·现代生物技术的应用第14-17页
     ·性别控制技术第14页
     ·分子标记的应用第14-15页
     ·转基因动物技术的应用第15-17页
 第二章 启动子的研究进展第17-24页
   ·启动子第17-18页
   ·常用启动子第18-20页
   ·卵巢特异性启动子第20-22页
   ·双启动子研究进展第22-24页
 第三章 实时定量PCR 技术及其在动物研究中的应用第24-29页
   ·实时定量PCR 技术的背景第24页
   ·实时定量PCR 技术原理第24-25页
   ·实时定量PCR 技术的标记方法第25-29页
     ·Taqman 探针第25-26页
     ·内嵌染料第26-27页
     ·分子信标第27-29页
 第四章 本研究的目的及意义第29-30页
第二篇 试验研究第30-56页
 第五章 不同启动子表达载体的构建与鉴定第30-43页
   ·材料与方法第30-38页
     ·试验材料第30-32页
       ·试验样品第30页
       ·主要仪器设备第30-31页
       ·试验主要试剂和载体等第31-32页
     ·试验方法第32-38页
       ·载体构建图第32页
       ·目的基因片段的克隆第32-35页
       ·pCMV-EGFP 载体构建第35-36页
       ·pOSP1-EGFP 载体的构建第36-37页
       ·pCMV-OSP1-EGFP 载体的构建第37-38页
       ·质粒的大量提取第38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·目的基因片段的克隆第38-39页
     ·pCMV-EGFP 载体的构建第39页
     ·pOSP1-EGFP 载体的构建第39-40页
     ·pCMV-OSP1-EGFP 载体的构建第40-41页
   ·讨论第41-42页
     ·关于引物设计第41页
     ·关于PCR 扩增第41-42页
     ·关于OSP-1 启动子第42页
   ·小结第42-43页
 第六章 奶山羊卵泡颗粒细胞的分离培养第43-48页
   ·材料与方法第43-45页
     ·试验材料第43-44页
       ·试验样品第43页
       ·主要仪器设备第43-44页
       ·主要试验试剂第44页
     ·试验方法第44-45页
       ·奶山羊卵泡颗粒细胞的采集和原代培养第44页
       ·奶山羊卵泡颗粒细胞的传代培养第44-45页
       ·奶山羊卵泡颗粒细胞的冻存第45页
   ·结果与分析第45-46页
     ·奶山羊卵泡颗粒细胞原代培养观察第45-46页
     ·奶山羊卵泡颗粒细胞传代培养观察第46页
   ·讨论第46-47页
   ·小结第47-48页
 第七章 不同启动子表达载体的转染与鉴定第48-56页
   ·材料与方法第48-52页
     ·试验材料第48-49页
       ·试验样品第48页
       ·主要仪器设备第48页
       ·主要试剂和载体第48-49页
     ·试验方法第49-52页
       ·各组织细胞的复苏与传代第49-50页
       ·转染各组织细胞第50页
       ·实时定量PCR 鉴定第50-52页
   ·结果与分析第52-54页
     ·荧光检测pOSP1- EGFP 在各组织细胞中的表达第52-53页
     ·实时定量PCR 鉴定第53-54页
   ·讨论第54-55页
     ·关于实时定量PCR第54页
     ·关于OSP-1 启动子的特异性表达第54-55页
     ·关于双启动子的转录活性第55页
   ·小结第55-56页
主要结论第56-57页
本研究的创新点第57-58页
进一步研究的问题第58-59页
附录第59-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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