| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-24页 |
| 第一章 转基因家畜动物的现状及未来 | 第11-17页 |
| ·转基因技术的发展 | 第11页 |
| ·转基因动物在生物医学上的应用 | 第11-13页 |
| ·利用转基因动物乳腺生产药物 | 第11-12页 |
| ·在转基因动物中生产抗体的研究 | 第12页 |
| ·利用转基因动物进行血液更换 | 第12页 |
| ·异种移植 | 第12-13页 |
| ·转基因动物在农业上的应用 | 第13-14页 |
| ·改变畜禽胴体组成 | 第13-14页 |
| ·促进泌乳 | 第14页 |
| ·增加毛的生产 | 第14页 |
| ·生产环保性动物 | 第14页 |
| ·转基因动物和疾病控制 | 第14-15页 |
| ·提高疾病抑制的转基因方案 | 第14-15页 |
| ·转基因技术应用于乳腺疾病治疗的研究 | 第15页 |
| ·新兴的转基因技术 | 第15-16页 |
| ·利用慢病毒转染受精卵和卵母细胞 | 第15页 |
| ·生产嵌合体一代 | 第15-16页 |
| ·RNAi（核糖核酸干扰） | 第16页 |
| ·转基因动物的安全性 | 第16-17页 |
| 第二章 FMDV 2A 在构建共表达载体中的研究进展 | 第17-19页 |
| ·利用 IRES 构建共表达载体 | 第17页 |
| ·构建融合蛋白表达载体 | 第17页 |
| ·利用自剪切多肽构建共表达载体 | 第17-18页 |
| ·FMDV 2A 的剪切机制 | 第17页 |
| ·FMDV 2A 在构建多顺反子表达载体中的应用 | 第17-18页 |
| ·问题与展望 | 第18-19页 |
| 第三章 白细胞介素2 的研究进展 | 第19-20页 |
| ·白细胞介素2 的一般性质 | 第19页 |
| ·白细胞介素2 的生物活性 | 第19页 |
| ·IL-2 的应用研究 | 第19-20页 |
| 第四章 本研究目的意义及技术路线 | 第20-24页 |
| ·本研究目的意义 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20页 |
| ·hIL-2 基因的克隆修饰 | 第20页 |
| ·构建具有FMDV2A 元件的hIL-2 表达载体 | 第20页 |
| ·细胞培养 | 第20页 |
| ·细胞转染和阳性筛选 | 第20页 |
| ·对目的基因在阳性细胞中的表达进行鉴定 | 第20页 |
| ·研究方法及技术路线 | 第20-24页 |
| ·hIL-2 基因的克隆 | 第20页 |
| ·FMDV2A 的获得 | 第20页 |
| ·β-酪蛋白调控序列的获得 | 第20页 |
| ·neo 基因的获得 | 第20-21页 |
| ·EGFP 基因的获得 | 第21页 |
| ·表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·细胞转染 | 第22-23页 |
| ·阳性细胞的检测 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-51页 |
| 第五章 hIL-2 基因的克隆和修饰 | 第24-32页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·试验材料 | 第24-26页 |
| ·试验方法 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·人血总RNA 的提取结果 | 第28-29页 |
| ·逆转录PCR 扩增hIL-2 CDS 区结果 | 第29页 |
| ·hIL-2 基因 CDS 区的克隆及鉴定结果 | 第29-31页 |
| ·菌落测序结果 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第六章 FMDV 2A 介导的双基因乳腺特异性表达载体的构建 | 第32-43页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-36页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·山羊β-酪蛋白启动子片段克隆及鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·EGFP 基因的克隆及鉴定结果 | 第37-39页 |
| ·neo 基因的克隆及鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·双基因表达载体的构建结果 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第七章 奶山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第43-46页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-44页 |
| ·试验结果 | 第44-45页 |
| ·组织块贴壁培养法培养原代山羊乳腺上皮细胞 | 第44页 |
| ·细胞的传代培养结果 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第八章 重组质粒转染山羊乳腺上皮细胞及转染后的检测 | 第46-51页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-47页 |
| ·试验试剂 | 第46页 |
| ·试验仪器及设备 | 第46页 |
| ·试验方法 | 第46-47页 |
| ·试验结果 | 第47-49页 |
| ·转染后细胞的EGFP 检测结果 | 第47-48页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞hIL-2 和EGFP 的mRNA 检测结果 | 第48-49页 |
| ·阳性细胞中的IL-2 和EGFP 蛋白表达检测结果 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 结论、创新点及不足 | 第51-52页 |
| 1 结论 | 第51页 |
| 2 创新点 | 第51页 |
| 3 不足之处 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录 | 第59-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
