| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-24页 |
| 第一章 SOCS2 对GH 信号通路的调控 | 第13-18页 |
| ·SOCS 蛋白家族的发现 | 第13页 |
| ·SOCS2 蛋白的结构及其作用机制 | 第13-15页 |
| ·SOCS2 的SH2 结构域 | 第14页 |
| ·SOCS 盒序列 | 第14页 |
| ·SOCS2 的N 端结构 | 第14-15页 |
| ·SOCS2 基因表达的调控 | 第15-16页 |
| ·SOCS2 对GH 信号通路的调控 | 第16-18页 |
| 第二章 GH 受体信号通路及对脂代谢和肥胖作用 | 第18-24页 |
| ·GH 的分泌和调节 | 第18-21页 |
| ·G H 信号通路 | 第18页 |
| ·GHR 的二聚化和激活 | 第18-19页 |
| ·JAK2 介导生长激素信号通路 | 第19-20页 |
| ·GH 调节STAT 转录因子 | 第20页 |
| ·MAPK 和PI3K 信号通路 | 第20-21页 |
| ·GHR-JAK2 信号通路的负向调节 | 第21-22页 |
| ·SOCS 负向调控GH 信号 | 第21页 |
| ·PTPs 对GH 信号的调节 | 第21-22页 |
| ·GH 与脂代谢和肥胖 | 第22-24页 |
| 实验研究 | 第24-58页 |
| 前言 | 第24-25页 |
| 第三章 GH 对猪原代脂肪细胞脂代谢及SOCS2 和SOCS3 mRNA 表达的影响 | 第25-34页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·猪原代脂肪细胞的分离和原代培养 | 第25-26页 |
| ·细胞的分组和试验处理 | 第26页 |
| ·脂肪细胞的油红O 染色 | 第26页 |
| ·脂肪细胞的甘油三脂(TG)测定 | 第26页 |
| ·细胞中总RNA 的提取 | 第26页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第26-27页 |
| ·Real-time PCR 扩增 | 第27页 |
| ·数据统计及分析 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-32页 |
| ·RNAiso Plus 提取的细胞总RNA 完整性检验 | 第27-28页 |
| ·不同GH 浓度的毒性检验 | 第28页 |
| ·GH 处理对猪原代脂肪细胞分化的影响 | 第28-29页 |
| ·GH 处理猪原代脂肪细胞甘油三酯沉积的影响 | 第29-30页 |
| ·GH 对脂肪分化因子PPARγ和脂肪酸合成酶FAS mRNA 表达的影响 | 第30页 |
| ·GH 对TG 降解过程限速酶ATGL 和HSL mRNA 表达的影响 | 第30-31页 |
| ·GH 对FAS/ATGL 和FAS/HSL mRNA 比值的影响 | 第31页 |
| ·GH 诱导SOCS2 和SOCS3 mRNA 的表达 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 SOCS2 腺病毒载体的构建 | 第34-48页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·样品、菌株、质粒及细胞株 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-42页 |
| ·SOCS2 基因克隆 | 第34-36页 |
| ·DH5α感受态的制备(CaCl2) | 第36-37页 |
| ·质粒转化 | 第37页 |
| ·质粒的小量提取 | 第37页 |
| ·重组穿梭穿梭质粒的构建 | 第37-39页 |
| ·pAd-SOCS2 的构建 | 第39-41页 |
| ·大量pAd-SOCS2 的获得和PacⅠ酶切线性化 | 第41页 |
| ·pAd-SOCS2 的包装、扩繁和滴度测定 | 第41-42页 |
| ·数据统计及分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-46页 |
| ·SOCS2 的克隆 | 第42-43页 |
| ·pAd-CMV-SOCS2 重组质粒的构建 | 第43-45页 |
| ·重组质粒pAd-SOCS2 的筛选和鉴定 | 第45页 |
| ·pAd-SOCS2 的包装 | 第45-46页 |
| ·Ad-SOCS2 的扩繁与滴度测定 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 超表达SOCS2 对GH 调控脂肪细胞分化与脂质代谢中的影响 | 第48-58页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·原代脂肪细胞培养 | 第48页 |
| ·Ad-SOCS2 的MOI 值测定 | 第48页 |
| ·实验分组和处理 | 第48页 |
| ·细胞中总蛋白的提取 | 第48-49页 |
| ·免疫印记检测 | 第49-50页 |
| ·Real-time PCR 扩增 | 第50页 |
| ·数据分析 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-56页 |
| ·Ad-SOCS2 MOI 值的测定 | 第50-51页 |
| ·Ad-SOCS2 感染脂肪细胞中SOCS2 的表达 | 第51-52页 |
| ·超表达 SOCS2 对GH 诱导的脂肪分化因子和脂质代谢关键酶表达的影响 | 第52-54页 |
| ·SOCS2 对GH 诱导的JAK/STAT 信号通路关键因子的影响 | 第54-55页 |
| ·超表达SOCS2 对GH 诱导的SOCS3 mRNA 表达的影响 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 创新点 | 第58页 |
| 进一步研究内容 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 缩略词表 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
