| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 两栖动物生存现状 | 第11-12页 |
| 2 两栖类免疫系统研究进展 | 第12-16页 |
| ·两栖类非特异性免疫 | 第12-14页 |
| ·特异性免疫 | 第14-15页 |
| ·红细胞的免疫功能 | 第15-16页 |
| 3 两栖类能量系统研究进展 | 第16-17页 |
| 4 两栖类抗氧化系统研究进展 | 第17-18页 |
| 5 两栖类热激蛋白研究进展 | 第18-21页 |
| ·两栖动物Hsp70超家族 | 第18-19页 |
| ·两栖动物Hsp70表达调控 | 第19-20页 |
| ·细胞保护 | 第20页 |
| ·免疫作用 | 第20-21页 |
| 6 棘胸蛙简介 | 第21页 |
| 7 研究目的及意义 | 第21-24页 |
| 第二章 研究方法 | 第24-41页 |
| 1 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| 2 免疫指标的建立与优化 | 第25-33页 |
| ·血细胞吞噬功能 | 第25-28页 |
| ·呼吸爆发强度测定 | 第28-29页 |
| ·胃溶菌酶活力测定 | 第29-30页 |
| ·红细胞吞噬能力的测定 | 第30-33页 |
| 3 抗氧化研究 | 第33-36页 |
| ·丙二醛(MDA)含量 | 第33-34页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性 | 第34页 |
| ·谷胱甘肽(GSH)含量 | 第34-36页 |
| 4 能量指标的测定方法 | 第36-37页 |
| ·肌肉及肝脏粗脂肪含量测定 | 第36-37页 |
| ·糖类含量的测定 | 第37页 |
| 5 热激蛋白(HSP70)片段克隆及半定量PCR | 第37-41页 |
| ·总RNA提取 | 第37-38页 |
| ·引物设计 | 第38页 |
| ·RT-PCR扩增、测序及分析 | 第38-39页 |
| ·半定量PCR | 第39-40页 |
| ·电泳及灰度分析 | 第40-41页 |
| 第三章 急性冷胁迫和恢复对棘胸蛙免疫和抗氧化防御的影响 | 第41-51页 |
| 1 引言 | 第41-42页 |
| 2 材料及方法 | 第42-44页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·实验动物 | 第42页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·越冬期生境温度监测 | 第42页 |
| ·动物与驯化 | 第42-43页 |
| ·急性冷胁迫和恢复实验 | 第43页 |
| ·免疫指标的测定 | 第43页 |
| ·脾巨噬细胞呼吸爆发测定 | 第43页 |
| ·血细胞吞噬 | 第43页 |
| ·胃溶菌酶活力测定 | 第43页 |
| ·氧化指标的测定 | 第43-44页 |
| ·丙二醛(MDA) | 第44页 |
| ·谷胱甘肽(GSH)测定 | 第44页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)测定 | 第44页 |
| ·热激蛋白(Hsp70)mRNA相对表达量分析 | 第44页 |
| ·数据分析 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-48页 |
| ·越冬期环境温度监测 | 第44-45页 |
| ·免疫指标 | 第45页 |
| ·氧化还原状态指标 | 第45-47页 |
| ·肝脏Hsp70mRNA表达变化 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 第四章 温度波动对冬眠态棘胸蛙免疫功能、能量蓄积与利用及HSP70表达的影响 | 第51-65页 |
| 1 引言 | 第51-52页 |
| 2 材料及方法 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·实验动物 | 第52页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·越冬期生境温度监测 | 第52页 |
| ·动物与驯化 | 第52-53页 |
| ·人工诱导冬眠实验 | 第53页 |
| ·冬眠温度波动实验 | 第53-54页 |
| ·免疫指标测定方法 | 第54页 |
| ·血细胞吞噬 | 第54页 |
| ·脾巨噬细胞呼吸爆发 | 第54页 |
| ·胃溶菌酶活力 | 第54页 |
| ·能量指标的测定方法 | 第54页 |
| ·肌肉及肝脏粗脂肪含量测定 | 第54页 |
| ·血糖类含量的测定 | 第54页 |
| ·肝糖原及肌糖原含量的测定 | 第54页 |
| ·Hsp70基因组织表达分析 | 第54页 |
| ·数据统计 | 第54页 |
| 3 实验结果 | 第54-61页 |
| ·越冬期环境温度监测 | 第54-55页 |
| ·人工诱导冬眠 | 第55-56页 |
| ·温度波动对非特异性免疫指标的影响 | 第56-58页 |
| ·温度波动对能量指标的影响 | 第58-61页 |
| ·温度波动对肝糖原和肌糖原含量的影响 | 第58-59页 |
| ·温度波动对血糖含量的影响 | 第59-60页 |
| ·温度波动对肝脂肪和肌脂肪含量的影响 | 第60-61页 |
| ·温度波动对Hsp70mRNA相对表达量变化的影响 | 第61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| 第五章 小结与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第88-89页 |
| 攻读硕士学位期间参加的学术会议 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
