| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1 红曲霉概述 | 第13页 |
| 2 红曲霉代谢产物——γ-氨基丁酸(GABA)概述 | 第13-14页 |
| ·GABA的结构与功能 | 第13页 |
| ·GABA的代谢 | 第13-14页 |
| 3 根癌农杆菌概述 | 第14-15页 |
| 4 丝状真菌遗传转化研究概述 | 第15-17页 |
| ·红曲霉遗传转化研究概述 | 第15-17页 |
| 5 扩增侧翼序列技术的研究概述 | 第17-19页 |
| 6 立题背景及主要研究内容 | 第19-21页 |
| ·立题背景 | 第19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 红色红曲霉(Mr-5) T-DNA转化库的构建 | 第21-30页 |
| 1 材料与仪器 | 第21-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第21-22页 |
| ·主要药品及培养基 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-25页 |
| ·红色红曲霉Mr-5菌株对潮霉素的敏感性检测 | 第23页 |
| ·根癌农杆菌介导的T-DNA转化基本步骤 | 第23-24页 |
| ·影响转化率的各种因素研究 | 第24-25页 |
| ·转化库的构建 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-29页 |
| ·红色红曲霉Mr-5菌株对潮霉素的敏感性检测 | 第25页 |
| ·各种因素对转化率的影响 | 第25-28页 |
| ·优化后的高效转化体系和T-DNA标签库的构建 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 红色红曲霉转化子的遗传稳定性分析、PCR鉴定及形态观察 | 第30-43页 |
| 1 材料与仪器设备 | 第30-31页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第30-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-33页 |
| ·转化子的遗传稳定性分析 | 第31页 |
| ·转化子潮霉素抗性的PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·转化子的形态观察 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·转化子的遗传稳定性 | 第33页 |
| ·转化子潮霉素抗性的PCR鉴定 | 第33-34页 |
| ·转化子的形态观察 | 第34-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 GABA转化子的筛选及其主要代谢产物分析 | 第43-51页 |
| 1 材料与仪器 | 第43-44页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 2 实验方法 | 第44-45页 |
| ·转化子的γ-氨基丁酸(GABA)产量测定 | 第44页 |
| ·转化子的色素产量测定 | 第44-45页 |
| ·转化子的桔霉素产量测定 | 第45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-49页 |
| ·转化子GABA分析 | 第45-46页 |
| ·转化子色素分析 | 第46-49页 |
| ·转化子桔霉素分析 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 转化子T-DNA侧翼序列的TAIL-PCR扩增及生物信息学分析 | 第51-60页 |
| 1 材料与仪器 | 第51-52页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第51-52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-56页 |
| ·转化子T-DNA侧翼序列的TAIL-PCR扩增 | 第52-55页 |
| ·TAIL-PCR产物的连接、转化及测序 | 第55-56页 |
| ·扩增片段的生物信息学分析 | 第56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-58页 |
| ·TAIL-PCR扩增 | 第56-57页 |
| ·扩增产物的测序及生物信息学分析 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 小结与建议 | 第60-62页 |
| 1 小结 | 第60-61页 |
| 2 建议 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 TAIL-PCR测序结果 | 第69-74页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢词 | 第75-76页 |
