| 目录 | 第1-6页 |
| CONTENTS | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-23页 |
| ·极地微生物多样性 | 第14-15页 |
| ·极地微生物生物活性物质 | 第15-16页 |
| ·极地微生物适冷酶 | 第16-19页 |
| ·极地微生物适冷酶种类 | 第18页 |
| ·适冷酶催化特性及其适冷机制 | 第18-19页 |
| ·适冷蛋白酶 | 第19-21页 |
| ·蛋白酶的分类 | 第19页 |
| ·适冷蛋白酶来源及种类 | 第19-20页 |
| ·适冷蛋白酶的酶学特征 | 第20页 |
| ·适冷蛋白酶的研究方法 | 第20-21页 |
| ·适冷蛋白酶基因的克隆与异源表达 | 第21-22页 |
| ·小结 | 第22-23页 |
| 第二章 极地微生物产适冷蛋白酶的筛选及分子鉴定 | 第23-32页 |
| ·材料与方法 | 第23-26页 |
| ·菌种来源与发酵培养基 | 第23页 |
| ·产适冷蛋白酶菌株的筛选 | 第23-24页 |
| ·蛋白酶酶活测定 | 第24-25页 |
| ·产适冷蛋白酶菌株的分子鉴定和系统发育分析 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·酶活力测定标准曲线 | 第26页 |
| ·极地微生物产适冷蛋白酶菌株的筛选 | 第26-29页 |
| ·产适冷蛋白酶菌株的分子鉴定和系统发育学分析 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 菌株Pseudoalteromonas sp.QI-1发酵及产酶条件优化 | 第32-45页 |
| ·材料与方法 | 第32-35页 |
| ·菌株与培养基 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-44页 |
| ·温度对Pseudoalteromonas sp.QI-1的生长及产酶的影响 | 第35-36页 |
| ·不同接种密度对Pseudoalteromonas sp.QI-1生长及产酶的影响 | 第36-37页 |
| ·通气量对Pseudoalteromonas sp.QI-1生长及产酶的影响 | 第37-38页 |
| ·初始pH值对Pseudoalteromonas sp.QI-1生长及产酶的影响 | 第38-39页 |
| ·盐度对Pseudoalteromonas sp.QI-1生长及产酶的影响 | 第39-40页 |
| ·氮源的优化 | 第40页 |
| ·碳源的优化 | 第40-41页 |
| ·酪蛋白对Pseudoalteromonas sp.QI-1生长及产酶的影响 | 第41页 |
| ·金属离子对Pseudoalteromonas sp.QI-1生长及产酶的影响 | 第41-42页 |
| ·表面活性剂对Pseudoalteromonas sp.QI-1生长及产酶的影响 | 第42页 |
| ·正交实验结果分析 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶粗酶酶学性质及酶谱 | 第45-52页 |
| ·材料及方法 | 第45-47页 |
| ·培养基及粗酶液的制备 | 第45页 |
| ·最适温度 | 第45页 |
| ·最适pH | 第45-46页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第46页 |
| ·酶的温度稳定性 | 第46页 |
| ·酶的pH稳定性 | 第46页 |
| ·蛋白酶酶谱(Zymograms) | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-51页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶的最适作用温度 | 第47-48页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶的最适作用pH | 第48页 |
| ·金属离子对Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶酶活的影响 | 第48-49页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶的热稳定性 | 第49页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶的pH值稳定性 | 第49-50页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1蛋白酶酶谱 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第五章 Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶基因的克隆与表达 | 第52-71页 |
| ·材料与方法 | 第53-59页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-59页 |
| ·结果 | 第59-69页 |
| ·目的DNA片段的制备 | 第59-60页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1基因组DNA的部分消化 | 第60页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1基因文库的构建 | 第60-61页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1基因文库中表达蛋白酶活性克隆的筛选 | 第61-62页 |
| ·序列测定与序列分析 | 第62-65页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1适冷蛋白酶表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·Pseudoalteromonas sp.QI-1蛋白酶基因pro-2127在大肠杆菌中的诱导表达 | 第66-67页 |
| ·重组子pColdⅢ-pro-2127表达蛋白酶PRO-2127的最适温度和最适pH | 第67-68页 |
| ·含pro-2127基因的重组大肠杆菌表达条件的优化 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-71页 |
| 第六章 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 发表论文 | 第84-86页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第86页 |
