| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第1章 文章综述 | 第13-22页 |
| ·引言 | 第13-14页 |
| ·卵泡刺激素的研究进展 | 第14-17页 |
| ·卵泡刺激素简介 | 第14-15页 |
| ·相同的α亚基 | 第15-16页 |
| ·不同的β亚基 | 第16页 |
| ·国内外FSH的研究进展简介 | 第16-17页 |
| ·FSH的作用机理 | 第17-20页 |
| ·FSH的基因结构 | 第17-18页 |
| ·FSH的生理作用 | 第18-19页 |
| ·FSH的合成与代谢 | 第19页 |
| ·FSH作用的分子机制 | 第19-20页 |
| ·本实验研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第2章 梅花鹿FSHα/β亚基的基因克隆 | 第22-38页 |
| ·主要实验仪器和药品 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·菌株与载体 | 第22页 |
| ·工具酶及试剂 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-30页 |
| ·含梅花鹿FSHα/β亚基的质粒DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·紫外分光光度计检测DNA的浓度和纯度 | 第24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA | 第24页 |
| ·PCR克隆梅花鹿FSHα/β亚基 | 第24页 |
| ·0.2 mL微量离心管中配置PCR反应各成分 | 第24-25页 |
| ·PCR产物切胶回收 | 第25-26页 |
| ·E.coli JM109感受态细胞制备 | 第26-27页 |
| ·TA克隆 | 第27页 |
| ·转化 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的筛选、鉴定及测序 | 第28-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-37页 |
| ·梅花鹿FSHα/β亚基基因克隆及回收纯化 | 第30-33页 |
| ·FSHα/β基因片段与pMD18-T Vector连接、转化 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的筛选、鉴定及测序 | 第34-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第3章 梅花鹿FSHα/β亚基表达载体构建 | 第38-47页 |
| ·主要实验仪器和药品 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·菌株与载体 | 第38页 |
| ·工具酶及试剂 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-43页 |
| ·表达载体pGEX-6p-2质粒的大量制备 | 第38-39页 |
| ·表达载体pGEX-6p-2酶切,胶回收载体片段 | 第39-42页 |
| ·目的基因酶切,回收 | 第42页 |
| ·目的基因与酶切载体连接及转化 | 第42-43页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·表达载体pGEX-6p-2质粒提取及酶切 | 第43页 |
| ·表达载体pGEX-6p-2与FSHα/β的连接、转化 | 第43-44页 |
| ·重组质粒α/β-P的鉴定 | 第44-47页 |
| 第4章 融合蛋白表达及鉴定 | 第47-54页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·菌株与载体 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要药品的配制 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·感受态细胞BL21的制备 | 第48页 |
| ·重组表达载体转化BL21 | 第48页 |
| ·菌落PCR检测重组菌 | 第48页 |
| ·融合蛋白的诱导、表达 | 第48-49页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测表达蛋白 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-53页 |
| ·载体胶回收及转化BL21感受态细胞 | 第50-52页 |
| ·诱导、表达及SDS-PAGE电泳检测 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第5章 总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 硕士期间发表论文 | 第62-63页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第63页 |