| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 一、前言 | 第11-28页 |
| (一) 马铃薯生产和晚疫病 | 第11-17页 |
| 1. 我国马铃薯生产现状 | 第11页 |
| 2. 马铃薯晚疫病 | 第11-12页 |
| ·马铃薯晚疫病的起源、流行及危害 | 第11-12页 |
| ·P.infestans群体结构 | 第12页 |
| 3. 马铃薯晚疫病防治 | 第12-14页 |
| ·马铃薯抗病育种研究 | 第12-13页 |
| ·化学防治 | 第13页 |
| ·生物防治 | 第13-14页 |
| 4. P.infestans的侵染循环 | 第14-17页 |
| (二) 马铃薯晚疫病菌 | 第17-22页 |
| 1. P.infestans分类地位 | 第17页 |
| 2. P.infestans形态结构 | 第17-19页 |
| 3. 卵菌与真菌的区别 | 第19-20页 |
| 4. P.infestans生理特征 | 第20-21页 |
| 5. P.infestans生殖方式 | 第21-22页 |
| (三) P.infestans的基因组测序 | 第22-23页 |
| (四) 非编码RNA的调控作用 | 第23-27页 |
| (五) 研究内容和意义 | 第27-28页 |
| 二、实验材料和方法 | 第28-44页 |
| (一) 样品的采集 | 第28-30页 |
| (二) P.infestans分离及保存 | 第30-31页 |
| 1. 组织分离 | 第30页 |
| 2. 单孢分离 | 第30页 |
| 3. 菌种保存 | 第30-31页 |
| (三) P.infestans最适生长条件测定 | 第31-32页 |
| (四) 不同发育阶段菌体的培养 | 第32-33页 |
| (五) P.infestans致病力测定 | 第33-36页 |
| 1. 马铃薯植株准备 | 第33页 |
| 2. 播种及接种 | 第33-34页 |
| 3. 统计马铃薯植株叶片发病指数 | 第34-36页 |
| (六) P.infestans小RNA深度测序 | 第36-41页 |
| 1. 样品收集 | 第36-37页 |
| 2. RNA提取及浓度检测 | 第37页 |
| 3. 小RNA测序流程 | 第37-41页 |
| (七) 利用体外siRNA饲喂沉默DCL1和DCL2 | 第41-42页 |
| (八) Stem-loop Q-PCR实验 | 第42-44页 |
| 三、实验结果 | 第44-67页 |
| (一) P.infestans不同生长阶段菌体的收集以及RNA的分离 | 第44-46页 |
| (二) 小RNA测序结果 | 第46-63页 |
| 1. 序列文库制备和数据分析 | 第46-50页 |
| 2. 小RNA在P.infestans染色体上的分布情况 | 第50-53页 |
| 3. 预测已知保守的miRNA和新的miRNA | 第53-58页 |
| 4. miRNA和相应靶基因功能的识别 | 第58-60页 |
| 5. 调节ABC转运蛋白基因的miRNA | 第60-63页 |
| (三) 孢子囊芽管的萌发和生长需要Dicer1(DCL1)的功能 | 第63-67页 |
| 四、讨论 | 第67-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 附录1 培养基配方 | 第78-81页 |
| 附录2 甲醛变性胶配方 | 第81-82页 |
| 附录3 小RNA测序相关试剂,仪器 | 第82-84页 |
| 附录4 文中涉及的miRNA序列信息 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附图 | 第87-94页 |
