| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-18页 |
| ·发展简史 | 第9页 |
| ·TTV 作为一种新型肝炎病毒的发现 | 第9-12页 |
| ·历史 | 第9页 |
| ·理化性质 | 第9-10页 |
| ·单链环状 DNA 病毒 | 第10-11页 |
| ·TTV 的变异 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12-14页 |
| ·感染途径 | 第12-13页 |
| ·TTV 在不同人群中的感染率 | 第13-14页 |
| ·地区分布 | 第14页 |
| ·TTV 的检测方法 | 第14-15页 |
| ·TTV 和它的潜在致病性 | 第15-17页 |
| ·肝脏疾病 | 第15页 |
| ·血液疾病 | 第15-16页 |
| ·肺部疾病 | 第16页 |
| ·特发性炎症性肌病 | 第16页 |
| ·免疫抑制 | 第16页 |
| ·系统性红斑狼疮 | 第16-17页 |
| ·动物 TTV | 第17-18页 |
| ·非人灵长类的 TTV | 第17页 |
| ·其他动物的 TTV | 第17-18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18页 |
| 2. 上海地区和内蒙古呼和浩特市地区人 TTV 的流行病学调查 | 第18-22页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·样品 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-21页 |
| ·引物的设计与合成 | 第19页 |
| ·样品处理 | 第19页 |
| ·DNA 模板的制备 | 第19-20页 |
| ·目的片段的扩增 | 第20页 |
| ·PCR 产物的凝胶电泳检测 | 第20页 |
| ·PCR 产物凝胶回收 | 第20-21页 |
| ·回收产物与pMD18-T 载体连接反应 | 第21页 |
| ·转化及测序 | 第21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-22页 |
| ·样品中TTV 第20 型 SAa-10 的检测 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22页 |
| 3. TTV 基因的全长扩增 | 第22-28页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-25页 |
| ·PCR 扩增 | 第24页 |
| ·电泳 | 第24页 |
| ·PCR 产物凝胶回收 | 第24-25页 |
| ·回收产物与pMD18-T 载体连接反应 | 第25页 |
| ·转化及测序 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-28页 |
| ·结果 | 第25-27页 |
| ·进化分析 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28页 |
| 4. TTV ORF1 基因的原核表达载体的构建和表达蛋白的纯化 | 第28-38页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·样品、菌株和质粒 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-34页 |
| ·引物的设计与合成 | 第29-30页 |
| ·PCR 扩增 | 第30页 |
| ·目的片段的回收 | 第30-31页 |
| ·目的基因的克隆 | 第31页 |
| ·克隆质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·原核表达载体PET-30a-ORF1 的构建 | 第32-33页 |
| ·重组表达载体的诱导表达 | 第33页 |
| ·最优表达时间的确定 | 第33-34页 |
| ·表达产物的纯化 | 第34页 |
| ·表达产物的复性 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·ORF1 基因的 PCR 结果 | 第34-35页 |
| ·目的基因的克隆鉴定 | 第35页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第35-36页 |
| ·蛋白原核表达及最优表达时间的确定 | 第36页 |
| ·蛋白的可溶性分析 | 第36-37页 |
| ·蛋白的纯化与复性 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 5. 结论 | 第38页 |
| 6. 展望 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 作者简历 | 第45页 |